实验二十一生物因素对微生物的影响一、实验目的和内容目的：了解某一抗生素的抗菌范围，学习抗菌谱试验的基本方法。内容：利用滤纸条法测定青霉素的抗菌谱。二、实验材料和用具大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌。豆芽汁葡萄糖琼脂培养基、青霉素溶液（80万单位/毫升）、氨苄青霉素溶液（80万单位/毫升）、无菌平皿、无菌滤纸条、镊子、接种环等。三、操作步骤1.将豆芽汁葡萄糖琼脂培养基溶化后，冷至45℃左右倒平板。2.无菌操作，用镊子将无菌滤纸条分别浸入过滤除菌的青霉素溶液和氨芋青霉素溶液中润湿，并在容器内壁沥去多余溶液，再将滤纸条按图21-1所示分别贴在两个已凝固的上述平板上。注意滤纸条形状要规则，滤纸条上含有的溶液量不要太多，而且在贴滤纸条时不要在培养基上拖动滤纸条，避免抗生素溶液在培养基中扩散时分布时不均匀。3.无菌操作，用接种环从滤纸条边缘分别垂直向外划直线接种大肠杆菌、金黄色葡萄球菌及枯草芽孢子杆菌（图21-1）。接种区图21-1抗生素抗菌谱试验1.滤纸条；2.试验菌注意划线接种时要尽量靠近滤纸条，但不要接触，避免将滤纸条上的抗生素溶液与菌种混合。4．将接种好的平板倒置37℃温室保温24h，取出观察并记录三种细菌的生长状况，四、实验报告绘图表示并说明青霉素和氨苄青霉素对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌及枯草芽孢杆菌的抑菌效55
55 实验二十一 生物因素对微生物的影响 一、 实验目的和内容 目的：了解某一抗生素的抗菌范围，学习抗菌谱试验的基本方法。 内容：利用滤纸条法测定青霉素的抗菌谱。 二、 实验材料和用具 大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌。 豆芽汁葡萄糖琼脂培养基、青霉素溶液（80 万单位/毫升）、氨苄青霉素溶液（80 万单位/ 毫升）、无菌平皿、无菌滤纸条、镊子、接种环等。 三、 操作步骤 1. 将豆芽汁葡萄糖琼脂培养基溶化后，冷至 45℃左右倒平板。 2. 无菌操作，用镊子将无菌滤纸条分别浸入过滤除菌的青霉素溶液和氨苄青霉素溶液中润 湿，并在容器内壁沥去多余溶液，再将滤纸条按图 21-1 所示分别贴在两个已凝固的上述平板上。 注意滤纸条形状要规则，滤纸条上含有的溶液量不要太多，而且在贴滤纸条时不要在培养基 上拖动滤纸条，避免抗生素溶液在培养基中扩散时分布时不均匀。 3. 无菌操作，用接种环从滤纸条边缘分别垂直向外划直线接种大肠杆菌、金黄色葡萄球菌 及枯草芽孢子杆菌（图 21-1）。 图 21-1 抗生素抗菌谱试验 1.滤纸条；2.试验菌 注意划线接种时要尽量靠近滤纸条，但不要接触，避免将滤纸条上的抗生素溶液与菌种混合。 4. 将接种好的平板倒置 37℃温室保温 24h，取出观察并记录三种细菌的生长状况。 四、 实验报告 绘图表示并说明青霉素和氨苄青霉素对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌及枯草芽孢杆菌的抑菌效
能，解释其原理。五、问题和思考1.如果抑菌带内隔一段时间后又长出少数菌落，你如何解释这种现象？2．某实验室获得一株产抗生素的菌株，请设计一个简单实验，测定此菌株所产抗生素的抗菌谱。3．根据青霉素的抗菌机制，你的平板上出现的抑菌带是致死效应还是抑制效应？与抗生素的浓度有无关系？56
56 能，解释其原理。 五、 问题和思考 1. 如果抑菌带内隔一段时间后又长出少数菌落，你如何解释这种现象？ 2. 某实验室获得一株产抗生素的菌株，请设计一个简单实验，测定此菌株所产抗生素的抗 菌谱。 3. 根据青霉素的抗菌机制，你的平板上出现的抑菌带是致死效应还是抑制效应？与抗生素 的浓度有无关系？