实验十九温度对微生物的影响一、实验目的和内容目的：了解温度对不同类型微生物生长的影响，区别微生物的最适生长温度与最适代谢温度。内容：通过在不同温度条件下培养不同类型微生物，了解微生物的最适生长温度与最适代谢温度及最适发酵温度的差别。二、实验材料和用具大肠杆菌，嗜热脂肪芽孢杆菌（Bacillusstearothermophilus），萨伏斯达诺氏假单胞菌（Pseudomonassavastanoi），粘质沙雷氏菌，酿酒酵母。牛肉膏蛋白陈琼脂培养基、装有蛋白陈葡萄糖发酵培养基的试管（内含倒置德汉氏小管）、无菌平皿，接种环等。三、操作步骤1牛肉膏蛋白陈琼脂培养基溶化倒平板。注意倒平板时培养基量适当增加，使凝固后的培养基厚度为一般培养基厚度的1.5~2倍，避免在高温（60℃）条件下培养微生物时培养基干裂。2.取8套牛肉膏蛋白陈琼脂平板，在皿底用记号笔划分为四区，分别标上大肠杆菌，嗜热脂肪芽孢杆菌，萨伏斯达诺氏假单胞菌及粘质沙雷氏菌。3.在上述平板各个区域分别无菌操作划线接种相应的四种菌，各取两套平板倒置于4℃、20℃、37℃及60℃条件下保温24~48h，观察细菌的生长状况及粘质沙雷氏菌产色素量情况。4.在4支装有蛋白陈葡萄糖发酵醇培养基及倒置德汉氏小管的试管中接入酿酒酵母，分别置于4℃、20℃、37℃及60℃条件下培养24~48h，观察酿酒酵母的生长状况以及发酵产气量。四、实验报告比较上述五种微生物在不同温度条件下的生长状况（“_”表示不生长，“+”表示生长较差，“++”表示生长一般，“+++”表示生长良好）以及粘质沙雷氏菌产色素和酿酒酵母产气量的多少（“_”、“+”、“++”、“+++”表示），结果填入下表：嗜热脂肪萨斯达诺氏粘质沙雷氏菌酿酒酵母温度（℃)大肠杆菌芽孢杆菌假单胞菌生长状况产气量生长状况产色素量420376051
51 实验十九 温度对微生物的影响 一、 实验目的和内容 目的：了解温度对不同类型微生物生长的影响，区别微生物的最适生长温度与最适代谢温度。 内容：通过在不同温度条件下培养不同类型微生物，了解微生物的最适生长温度与最适代谢 温度及最适发酵温度的差别。 二、 实验材料和用具 大肠杆菌，嗜热脂肪芽孢杆菌（Bacillus stearothermophilus），萨伏斯达诺氏假单胞菌 （Pseudomonas savastanoi），粘质沙雷氏菌，酿酒酵母。 牛肉膏蛋白胨琼脂培养基、装有蛋白胨葡萄糖发酵培养基的试管（内含倒置德汉氏小管）、 无菌平皿，接种环等。 三、 操作步骤 1. 牛肉膏蛋白胨琼脂培养基溶化倒平板。 注意倒平板时培养基量适当增加，使凝固后的培养基厚度为一般培养基厚度的 1.5~2 倍，避 免在高温（60℃）条件下培养微生物时培养基干裂。 2. 取 8 套牛肉膏蛋白胨琼脂平板，在皿底用记号笔划分为四区，分别标上大肠杆菌，嗜热 脂肪芽孢杆菌，萨伏斯达诺氏假单胞菌及粘质沙雷氏菌。 3. 在上述平板各个区域分别无菌操作划线接种相应的四种菌，各取两套平板倒置于 4℃、 20℃、37℃及 60℃条件下保温 24~48h，观察细菌的生长状况及粘质沙雷氏菌产色素量情况。 4. 在 4 支装有蛋白胨葡萄糖发酵培养基及倒置德汉氏小管的试管中接入酿酒酵母，分别置 于 4℃、20℃、37℃及 60℃条件下培养 24~48h，观察酿酒酵母的生长状况以及发酵产气量。 四、 实验报告 比较上述五种微生物在不同温度条件下的生长状况（“-”表示不生长，“+”表示生长较差， “++”表示生长一般，“+++”表示生长良好）以及粘质沙雷氏菌产色素和酿酒酵母产气量的多 少（“-”、“+”、“++”、“+++”表示），结果填入下表： 粘质沙雷氏菌 酿酒酵母 温度（℃） 大肠杆菌 嗜热脂肪 芽孢杆菌 萨斯达诺氏 假单胞菌 生长状况 产色素量 生长状况 产气量 4 20 37 60
五、问题和思考1.为什么微生物最适生长温度并不一定等于其代谢或发酵最适温度？2.在下列地方有可能存在何种类型的微生物（就温度而言）？a.深海海水；b.海底火山口附近的海水；c.温泉；d.温带土壤表层；e.植物组织3.你认为高温微生物能感染温血动物吗？为什么？4.进行体外DNA扩增的PCR（polymerasechainreaction）技术之所以能够迅速发展和广泛应用，其中最重要的是得益于Taq酶的发现和生产，你知道这种酶是从什么菌中分离的吗？该菌是属于本实验中涉及的哪种类型微生物？52
52 五、 问题和思考 1. 为什么微生物最适生长温度并不一定等于其代谢或发酵最适温度？ 2. 在下列地方有可能存在何种类型的微生物（就温度而言）？ a.深海海水； b.海底火山口附近的海水； c.温泉； d.温带土壤表层； e.植物组织 3. 你认为高温微生物能感染温血动物吗？为什么？ 4. 进行体外 DNA 扩增的 PCR（polymerase chain reaction）技术之所以能够迅速发展和广 泛应用，其中最重要的是得益于 Taq 酶的发现和生产，你知道这种酶是从什么菌中分离的吗？该 菌是属于本实验中涉及的哪种类型微生物？