实验二十三糖发酵试验一、实验目的和内容目的:了解糖发酵的原理和在肠道细菌鉴定中的重要作用,掌握通过糖发酵鉴定不同微生物的方法。内容:学习如何使用德汉氏小管进行糖发酵试验。二、实验材料和用具大肠杆菌、普通变形杆菌斜面各一支。葡萄糖发酵培养基试管和乳糖发酵培养基试管各3支(内装有倒置的德汉氏小管)。试管架,接种环等。三、操作步骤可根据细菌分解利用糖能力的差异表现出是否产酸产气作为鉴定菌种的依据。是否产酸,可在糖发酵培养基中加入指示剂溴甲酚紫(即B.C.P指示剂,其pH在5.2以下呈黄色,pH在6.8以上呈紫色),经培养后根据指示剂的颜色变化来判断。是否产气,可在发酵培养基中放入倒置的德汉氏小管,观察有无气泡来证明。如图23-1。摩气泡黄色一紫色黄色4CBA图23-1糖发酵试验1.用记号笔在各试管外壁上分别标明发酵培养基名称和所接种的细菌菌名。2.取葡萄糖发酵培养基试管3支,分别接入大肠杆菌,普通变形杆菌,第三支不接种,作为对照。另取乳糖发酵培养基试管3支,同样分别接入大肠杆菌,第三支不接种,作为对照。在接种后,轻缓摇动试管,使其均匀,防止倒置的小管进入气泡,3.将接种过和作为对照的6支试管均置37℃培养24~48小时。60
60 实验二十三 糖发酵试验 一、 实验目的和内容 目的:了解糖发酵的原理和在肠道细菌鉴定中的重要作用,掌握通过糖发酵鉴定不同微生物 的方法。 内容:学习如何使用德汉氏小管进行糖发酵试验。 二、 实验材料和用具 大肠杆菌、普通变形杆菌斜面各一支。 葡萄糖发酵培养基试管和乳糖发酵培养基试管各 3 支(内装有倒置的德汉氏小管)。 试管架,接种环等。 三、 操作步骤 可根据细菌分解利用糖能力的差异表现出是否产酸产气作为鉴定菌种的依据。是否产酸,可 在糖发酵培养基中加入指示剂溴甲酚紫(即 B.C.P 指示剂,其 pH 在 5.2 以下呈黄色,pH 在 6.8 以上呈紫色),经培养后根据指示剂的颜色变化来判断。是否产气,可在发酵培养基中放入倒置 的德汉氏小管,观察有无气泡来证明。如图 23-1。 图 23-1 糖发酵试验 1. 用记号笔在各试管外壁上分别标明发酵培养基名称和所接种的细菌菌名。 2. 取葡萄糖发酵培养基试管 3 支,分别接入大肠杆菌,普通变形杆菌,第三支不接种,作 为对照。另取乳糖发酵培养基试管 3 支,同样分别接入大肠杆菌,第三支不接种,作为对照。 在接种后,轻缓摇动试管,使其均匀,防止倒置的小管进入气泡。 3. 将接种过和作为对照的 6 支试管均置 37℃培养 24~48 小时
4.观察各试管颜色变化及德汉氏小管有无气泡。四、实验报告将结果填入下表。“+”表示产酸或产气,“_”表示不产酸或不产气。糖类发酵大肠杆菌对照普通变形杆菌葡萄糖发酵乳糖发酵五、问题和思考假如某种微生物可以有氧代谢葡萄糖,发酵试验应该出现什么结果?61
61 4. 观察各试管颜色变化及德汉氏小管有无气泡。 四、 实验报告 将结果填入下表。“+”表示产酸或产气,“-”表示不产酸或不产气。 糖类发酵 大肠杆菌 普通变形杆菌 对 照 葡萄糖发酵 乳糖发酵 五、 问题和思考 假如某种微生物可以有氧代谢葡萄糖,发酵试验应该出现什么结果?