实验二细菌形态的观祭一、实验目的和内容目的:巩固油镜的使用;掌握细菌形态观察的基本方法,了解细菌的基本形态。内容:1.观察细菌的基本形态染色装片。2.观察枯草芽孢杆菌活菌。3.观察细菌细胞结构的染色装片。二、实验材料和用具肺炎链球菌(Streptococcuspneumoniae)、霍乱弧菌(Vibriocholerae)、大肠杆菌(Escherichiacoli)、白喉棒杆菌(Corynebacteriumdiphtneriae)、炭疽杆菌(Bacillusanthracis)、普通变形杆菌(Proteusvulgaris)、枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)、褐球固氮菌(Azotobacterchroococcum)等细菌的装片,枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)的斜面菌种。香柏油、二甲苯、无菌水。显微镜、擦镜纸、接种环、酒精灯、载玻片、盖玻片、吸水纸、小滴管。三、操作步骤(一)、观察细菌的基本形态用低倍镜、高倍镜和油镜观察肺炎链球菌、霍乱弧菌、大肠杆菌、白喉棒杆菌、炭疽杆菌等细菌的染色装片,并分别在油镜下绘图。(二)观察细菌的细胞结构用低倍镜、高倍镜和油镜观察褐球固氮菌(示荚膜)、枯草芽孢杆菌(示芽孢)、伤寒杆菌(示鞭毛)等细菌的染色装片,并分别在油镜下绘图。(三)观察枯草芽孢杆菌活菌常用压滴法(图2-1)1.将洁净无油腻的载片放于自己右边前方,在中央放一小滴无菌水。2.将酒精灯放于自己正前方,点燃。3.用无菌操作的方法从枯草芽孢杆菌斜面中沾取少量菌体,与载片上的水滴充分混匀,把接种环上残留的菌体杀灭后,放回试管架。4.用镊子加一洁净的盖玻片,使其一边先接触菌液,然后将整个盖玻片慢慢放下,注意不要产生气泡。如菌液过多,可用吸水纸适当吸去一部分。6
6 实验二 细菌形态的观察 一、 实验目的和内容 目的:巩固油镜的使用;掌握细菌形态观察的基本方法,了解细菌的基本形态。 内容:1. 观察细菌的基本形态染色装片。 2. 观察枯草芽孢杆菌活菌。 3. 观察细菌细胞结构的染色装片。 二、 实验材料和用具 肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)、霍乱弧菌(Vibrio cholerae)、大肠杆菌(Escherichia coli)、白喉棒杆菌(Corynebacterium diphtneriae)、炭疽杆菌(Bacillus anthracis)、普通变形杆菌 (Proteus vulgaris)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、褐球固氮菌(Azotobacter chroococcum)等细 菌的装片,枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的斜面菌种。 香柏油、二甲苯、无菌水。 显微镜、擦镜纸、接种环、酒精灯、载玻片、盖玻片、吸水纸、小滴管。 三、 操作步骤 (一)、观察细菌的基本形态 用低倍镜、高倍镜和油镜观察肺炎链球菌、霍乱弧菌、大肠杆菌、白喉棒杆菌、炭疽杆菌等 细菌的染色装片,并分别在油镜下绘图。 (二)观察细菌的细胞结构 用低倍镜、高倍镜和油镜观察褐球固氮菌(示荚膜)、枯草芽孢杆菌(示芽孢)、伤寒杆菌(示 鞭毛)等细菌的染色装片,并分别在油镜下绘图。 (三)观察枯草芽孢杆菌活菌 常用压滴法(图 2-1) 1. 将洁净无油腻的载片放于自己右边前方,在中央放一小滴无菌水。 2. 将酒精灯放于自己正前方,点燃。 3. 用无菌操作的方法从枯草芽孢杆菌斜面中沾取少量菌体,与载片上的水滴充分混匀,把 接种环上残留的菌体杀灭后,放回试管架。 4. 用镊子加一洁净的盖玻片,使其一边先接触菌液,然后将整个盖玻片慢慢放下,注意不 要产生气泡。如菌液过多,可用吸水纸适当吸去一部分
5.先用低倍镜然后转用高倍镜观察,观察时光线要适当调暗些。图2-1压滴法制片示意图四、注意事项1.注意擦镜头时,只能用擦镜纸。2.观察完毕,必须将镜筒上升,才能取下装片,放入另一装片后,要按使用油镜的要求,重新操作,不能在油镜下直接取下和替换装片,切记!3.无菌操作过程中,接种环灭菌后不能触及其他物品,挑菌不能过多。五、演示1.细菌细胞结构装片示范镜。2.无菌操作过程。3.怎样盖盖玻片才不产生气泡。六、实验报告(一)绘图1.绘出你所观察到的几种细菌的个体形态视野图。2.绘出你所观察到的细菌细胞结构视野图,并注明各部分。(二)试指出在制备活菌装片时,应注意什么问题?七、问题和思考1.无菌操作过程中,可否将棉塞放在桌面上?为什么?2.试设计一个准备本实验的工作方案。7
7 5. 先用低倍镜然后转用高倍镜观察,观察时光线要适当调暗些。 图 2-1 压滴法制片示意图 四、 注意事项 1. 注意擦镜头时,只能用擦镜纸。 2. 观察完毕,必须将镜筒上升,才能取下装片,放入另一装片后,要按使用油镜的要求, 重新操作,不能在油镜下直接取下和替换装片,切记! 3. 无菌操作过程中,接种环灭菌后不能触及其他物品,挑菌不能过多。 五、 演示 1. 细菌细胞结构装片示范镜。 2. 无菌操作过程。 3. 怎样盖盖玻片才不产生气泡。 六、 实验报告 (一)绘图 1. 绘出你所观察到的几种细菌的个体形态视野图。 2. 绘出你所观察到的细菌细胞结构视野图,并注明各部分。 (二)试指出在制备活菌装片时,应注意什么问题? 七、 问题和思考 1. 无菌操作过程中,可否将棉塞放在桌面上?为什么? 2. 试设计一个准备本实验的工作方案