第一部分专业基础性实验实验一显微镜油浸系物镜的使用一、实验目的和内容目的：复习显微镜低倍镜和高倍镜的使用技术，了解油浸系物镜的基本原理，掌握油浸系物镜的使用方法。内容：1.学习油浸系物镜的使用方法。2.用油镜观察枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌染色装片。二、实验材料和用具枯草芽孢杆菌（Bacillussubtills）、金黄色葡萄球菌（Staphylococcusaureus）的染色装片。香柏油、二甲苯。显微镜、擦镜纸。三、操作步骤（一）观察前的准备1310图1-1显微镜由机械装置和光学系统两大部分组成1.物镜转换器2.接物镜3.游标卡尺4.载物台5.聚光器6.彩虹光阑7.光源8.镜座9.电源开关10.光源滑动变阻器11.粗调螺旋12.微调螺旋13.镜臂14.镜筒15.目镜16.标本移动螺旋1.将显微镜置于平稳的实验台上，镜座距实验台边沿约3~4cm。坐正，练习用双眼同时观察，以减少眼晴疲劳，也便于边观察边绘图或纪录。2.调节光源：将低倍镜转到工作位置，把光圈完全打开，聚光器升至与载物台相距约1mm左右。转动反光镜采集光源，光线较强的天然光源宜用平面镜，光线较弱的天然光源或人工光源3
3 第一部分 专业基础性实验 实验一 显微镜油浸系物镜的使用 一、 实验目的和内容 目的：复习显微镜低倍镜和高倍镜的使用技术，了解油浸系物镜的基本原理，掌握油浸系物 镜的使用方法。 内容：1. 学习油浸系物镜的使用方法。 2. 用油镜观察枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌染色装片。 二、 实验材料和用具 枯草芽孢杆菌（Bacillus subtills）、金黄色葡萄球菌 (Staphylococcus aureus)的染色装片。 香柏油、二甲苯。 显微镜、擦镜纸。 三、 操作步骤 （一）观察前的准备 图 1-1 显微镜由机械装置和光学系统两大部分组成 1. 物镜转换器 2. 接物镜 3.游标卡尺 4.载物台 5.聚光器 6. 彩虹光阑 7.光源 8. 镜座 9. 电源开关 10. 光源滑动变阻器 11. 粗调螺旋 12. 微调螺旋 13. 镜臂 14.镜筒 15.目镜 16.标本 移动螺旋 1. 将显微镜置于平稳的实验台上，镜座距实验台边沿约 3~4cm。坐正，练习用双眼同时观 察，以减少眼睛疲劳，也便于边观察边绘图或纪录。 2. 调节光源：将低倍镜转到工作位置，把光圈完全打开，聚光器升至与载物台相距约 1mm 左右。转动反光镜采集光源，光线较强的天然光源宜用平面镜，光线较弱的天然光源或人工光源
宜用凹面镜，对光至视野内均匀明亮为止。观察染色装片时，光线宜强；观察未染色装片时，光线不宜太强。3.根据使用者的个人情况，调节双筒显微镜的目镜。双筒显微镜的目镜间距可以适当调节，而左目镜上一般还配有曲光度调节环，可以适应眼距不同或两眼视力有差异的不同观察者。（二）低倍镜观察染色装片首先上升镜筒，将枯草芽孢杆菌染色装片置于载物台上，用标本夹夹住，将观察位置移至物镜正下方，物镜降至距装片0.5cm处，适当缩小光圈然后两眼从目镜观察，转动粗调节器使物镜逐渐上升（或使镜台下降）至发现物像时，改用细调节器调节到物像清楚为止。通过玻片夹推进器慢慢移动装片，把合适的观察部位移至视野中心。（三）高倍镜观察眼晴离开目镜从侧面观察，旋转转换器，将高倍镜转至正下方，注意避免镜头与玻片相撞。再由目镜观察，仔细调节光圈，使光线的明亮度适宜。用细调节器校正焦距使物镜清晰为止。将最适宜观察部位移至视野中心，绘图。不要移动装片位置，准备用油镜观察。（四）油镜观察1.提起镜筒约2cm，将油镜转至正下方。在玻片标本的镜检部位（镜头的正下方）滴一滴香柏油。H2图1-2装香柏油的双层瓶1.香柏油，2.二甲苯2.从侧面注视，用粗调节器小心降下镜筒，使油镜浸在镜油中至油圈不扩大为止，镜头儿乎与装片接触，但不可压及装片，以免压碎玻片，损坏镜头。3.将光线调亮，双眼从目镜观察，用粗调节器将镜筒徐徐上升（切总反方向旋转），当视野中有物像出现时，再用细调节器校正焦距。如因镜头下降未到位或镜头上升太快未找到物像，必4
4 宜用凹面镜，对光至视野内均匀明亮为止。观察染色装片时，光线宜强；观察未染色装片时，光 线不宜太强。 3. 根据使用者的个人情况，调节双筒显微镜的目镜。双筒显微镜的目镜间距可以适当调节， 而左目镜上一般还配有曲光度调节环，可以适应眼距不同或两眼视力有差异的不同观察者。 （二）低倍镜观察染色装片 首先上升镜筒，将枯草芽孢杆菌染色装片置于载物台上，用标本夹夹住，将观察位置移至物 镜正下方，物镜降至距装片 0.5cm 处，适当缩小光圈然后两眼从目镜观察，转动粗调节器使物镜 逐渐上升（或使镜台下降）至发现物像时，改用细调节器调节到物像清楚为止。通过玻片夹推进 器慢慢移动装片，把合适的观察部位移至视野中心。 （三）高倍镜观察 眼睛离开目镜从侧面观察，旋转转换器，将高倍镜转至正下方，注意避免镜头与玻片相撞。 再由目镜观察，仔细调节光圈，使光线的明亮度适宜。用细调节器校正焦距使物镜清晰为止。将 最适宜观察部位移至视野中心，绘图。不要移动装片位置，准备用油镜观察。 （四）油镜观察 1. 提起镜筒约 2cm，将油镜转至正下方。在玻片标本的镜检部位（镜头的正下方）滴一滴 香柏油。 图 1-2 装香柏油的双层瓶 1.香柏油，2.二甲苯 2. 从侧面注视，用粗调节器小心降下镜筒，使油镜浸在镜油中至油圈不扩大为止，镜头几 乎与装片接触，但不可压及装片，以免压碎玻片，损坏镜头。 3. 将光线调亮，双眼从目镜观察，用粗调节器将镜筒徐徐上升（切忌反方向旋转），当视野 中有物像出现时，再用细调节器校正焦距。如因镜头下降未到位或镜头上升太快未找到物像，必
须在从侧面观察，将油镜降下，重复操作直至物像看清为止。仔细观察并绘图。4.再次观察，提高镜筒，换上金黄色葡萄球菌染色装片，依次用低倍镜、高倍镜和油镜观察，绘图。重复观察时可比第一次少加香柏油。（五）镜检完毕后的工作1.移开物镜镜头。2.取出装片。3．清洁油镜油镜使用完毕后，须用擦镜纸擦去镜头上的香柏油，再有擦镜纸沾少许二甲苯擦掉残留的香柏油，最后再用干净的擦镜纸擦干残留的二甲苯。4．擦净显微镜，将各部分还原。将接物镜呈“八”字形降下，不可使其正对聚光器，同时降下聚光器，转动反光镜使其镜面垂直于镜座。最后套上镜罩，对号放入镜箱中，置阴凉干燥处存放。四、注意事项1．使用油镜必须按先用低倍镜和高倍镜观察，再用油镜观察的程序操作。2.下降镜头时，一定要从侧面注视，切忌用眼晴对着目镜，边观察边下降镜头的错误操作，以免压碎玻片而损坏镜头。3.使用二甲苯擦镜头时，注意二甲苯不能过多，以防溶解固定透镜的树脂。4.注意保持显微镜的洁净，对金属部分要用软布擦拭，擦镜头必须用擦镜纸，切勿用手或用普通布、纸等，以免损坏镜头。五、演示如何使用油镜观察染色装片的要点，如滴油、下降镜头、调焦、擦拭镜头等。六、实验报告分别绘出在高倍镜和油镜下观察到的枯燥芽孢杆菌及金黄色葡萄球菌的形态，注明物镜放大倍数和总放大率。七、问题和思考1.用油镜便于观察细菌的依据是什么？2.使用油镜应特别注意哪些问题？3.当物镜从低倍镜转到高倍镜和油镜时，对照明度有何要求？应如何调节？5
5 须在从侧面观察，将油镜降下，重复操作直至物像看清为止。仔细观察并绘图。 4. 再次观察，提高镜筒，换上金黄色葡萄球菌染色装片，依次用低倍镜、高倍镜和油镜观 察，绘图。重复观察时可比第一次少加香柏油。 （五）镜检完毕后的工作 1. 移开物镜镜头。 2. 取出装片。 3. 清洁油镜 油镜使用完毕后，须用擦镜纸擦去镜头上的香柏油，再有擦镜纸沾少许二甲 苯擦掉残留的香柏油，最后再用干净的擦镜纸擦干残留的二甲苯。 4. 擦净显微镜，将各部分还原。将接物镜呈“八”字形降下，不可使其正对聚光器，同时 降下聚光器，转动反光镜使其镜面垂直于镜座。最后套上镜罩，对号放入镜箱中，置阴凉干燥处 存放。 四、 注意事项 1. 使用油镜必须按先用低倍镜和高倍镜观察，再用油镜观察的程序操作。 2. 下降镜头时，一定要从侧面注视，切忌用眼睛对着目镜，边观察边下降镜头的错误操作， 以免压碎玻片而损坏镜头。 3. 使用二甲苯擦镜头时，注意二甲苯不能过多，以防溶解固定透镜的树脂。 4. 注意保持显微镜的洁净，对金属部分要用软布擦拭，擦镜头必须用擦镜纸，切勿用手或 用普通布、纸等，以免损坏镜头。 五、 演示 如何使用油镜观察染色装片的要点，如滴油、下降镜头、调焦、擦拭镜头等。 六、 实验报告 分别绘出在高倍镜和油镜下观察到的枯燥芽孢杆菌及金黄色葡萄球菌的形态，注明物镜放大 倍数和总放大率。 七、 问题和思考 1. 用油镜便于观察细菌的依据是什么？ 2. 使用油镜应特别注意哪些问题？ 3. 当物镜从低倍镜转到高倍镜和油镜时，对照明度有何要求？应如何调节？