双抗体夹心法 ◼ 此法常用于测定抗原, 将已知抗体吸附于固相 载体, 加入待检标本(含相应抗原)与之结合。 温育后洗涤，加入酶标抗体和底物进行测定。 （1）双抗体夹心法 乙肝表面抗原
双抗体夹心法 ◼ 此法常用于测定抗原, 将已知抗体吸附于固相 载体, 加入待检标本(含相应抗原)与之结合。 温育后洗涤，加入酶标抗体和底物进行测定。 （1）双抗体夹心法 乙肝表面抗原
间接法 ◼ 此法是测定抗体最常用的方法。将已知抗原吸 附于固相载体，加入待检标本(含相应抗体)与 之结合。洗涤后，加入酶标抗球蛋白抗体(酶 标抗抗体)和底物进行测定。 （2）间接法ELISA
间接法 ◼ 此法是测定抗体最常用的方法。将已知抗原吸 附于固相载体，加入待检标本(含相应抗体)与 之结合。洗涤后，加入酶标抗球蛋白抗体(酶 标抗抗体)和底物进行测定。 （2）间接法ELISA
竞争法 ◼ 此法可用于抗原和半抗原的定量测定，也可用于测 定抗体。以测定抗原为例, 将抗原吸附于固相载体； 加入待测抗原和一定量特异性抗体，使固相抗原与 待测抗原二者竞争与抗体结合；经过洗涤分离，最 后结合于固相的抗体与待测抗原含量呈负相关。 （3）竞争法 黄曲霉素
竞争法 ◼ 此法可用于抗原和半抗原的定量测定，也可用于测 定抗体。以测定抗原为例, 将抗原吸附于固相载体； 加入待测抗原和一定量特异性抗体，使固相抗原与 待测抗原二者竞争与抗体结合；经过洗涤分离，最 后结合于固相的抗体与待测抗原含量呈负相关。 （3）竞争法 黄曲霉素
2.3 ELISA测定中酶的作用 ◼ 由于酶的催化效率很高，间接地放大了免疫反 应的结果，使测定具有极高的灵敏度
2.3 ELISA测定中酶的作用 ◼ 由于酶的催化效率很高，间接地放大了免疫反 应的结果，使测定具有极高的灵敏度
（1）酶标记的抗体或抗原的制备 ◼ 酶标记的抗体或抗原是ELISA中最关键的试剂。 良好的结合物既保持了酶的催化活性，也保持 了抗体或抗原的免疫活性。 ◼ 酶标记抗体的制备主要有戊二醛交联法和过碘 酸盐氧化法两种方法。酶结合物一般需经离子 交换层析或分子筛分离纯化
（1）酶标记的抗体或抗原的制备 ◼ 酶标记的抗体或抗原是ELISA中最关键的试剂。 良好的结合物既保持了酶的催化活性，也保持 了抗体或抗原的免疫活性。 ◼ 酶标记抗体的制备主要有戊二醛交联法和过碘 酸盐氧化法两种方法。酶结合物一般需经离子 交换层析或分子筛分离纯化