2 酶联免疫测定（ELISA） ◼ 酶联免疫测定 （ enzyme-linked immunosorbent assay ，ELISA）是继放射免疫测定技术之后发 展起来的一项新的免疫学技术。 ◼ ELISA自上世纪70年代出现开始，就因其高度 的准确性、特异性、适用范围宽、检测速度快 以及费用低等优点，在临床和生物疾病诊断与 控制等领域中倍受重视，成为检验中最为广泛 应用的方法之一
2 酶联免疫测定（ELISA） ◼ 酶联免疫测定 （ enzyme-linked immunosorbent assay ，ELISA）是继放射免疫测定技术之后发 展起来的一项新的免疫学技术。 ◼ ELISA自上世纪70年代出现开始，就因其高度 的准确性、特异性、适用范围宽、检测速度快 以及费用低等优点，在临床和生物疾病诊断与 控制等领域中倍受重视，成为检验中最为广泛 应用的方法之一
2.1 ELISA的基本原理 ◼ （1）利用抗原与抗体的特异反应将待测 物与酶连接（或建立关联）。 ◼ （2）通过酶与底物产生颜色反应，用于 定量测定。 ◼ 它将酶促反应的高效率和免疫反应的高度专 一性有机地结合起来，可对生物体内各种微 量有机物的含量进行测定。测定的对象可以 是抗体也可以是抗原。 重点
2.1 ELISA的基本原理 ◼ （1）利用抗原与抗体的特异反应将待测 物与酶连接（或建立关联）。 ◼ （2）通过酶与底物产生颜色反应，用于 定量测定。 ◼ 它将酶促反应的高效率和免疫反应的高度专 一性有机地结合起来，可对生物体内各种微 量有机物的含量进行测定。测定的对象可以 是抗体也可以是抗原。 重点
ELISA试剂盒的组成 ◼ 完整的ELISA试剂盒包含以下各组分： （1）包被抗原或抗体的固相载体（免疫吸附剂）； （2）酶标记的抗原或抗体（标记物）； （3）酶作用的底物（显色剂）； （4）阴性和阳性对照品（定性测定），参考标准 品和控制血清（定量测定）； （5）结合物及标本的稀释液； （6）洗涤液；（含吐温20磷酸盐缓冲液） （7）酶反应终止液。（常用硫酸） 必需
ELISA试剂盒的组成 ◼ 完整的ELISA试剂盒包含以下各组分： （1）包被抗原或抗体的固相载体（免疫吸附剂）； （2）酶标记的抗原或抗体（标记物）； （3）酶作用的底物（显色剂）； （4）阴性和阳性对照品（定性测定），参考标准 品和控制血清（定量测定）； （5）结合物及标本的稀释液； （6）洗涤液；（含吐温20磷酸盐缓冲液） （7）酶反应终止液。（常用硫酸） 必需
酶标仪和酶标板 DNM-9602A酶标分析仪 酶标板
酶标仪和酶标板 DNM-9602A酶标分析仪 酶标板
2.2 ELISA的基本类型 ◼ 随着ELISA在生物检测分析领域的广泛应用， 根据试剂的来源和标本的情况以及检测的具体 条件，逐渐演变出了几种不同类型的检测方法： （5）捕获法测IgM抗体； （6）ABS-ELISA法； （7）PCR-酶联免疫测定法； （8）斑点免疫酶结合试验。 （1）夹心法； （2）间接法； （3）竞争法； （4）双位点一步法；
2.2 ELISA的基本类型 ◼ 随着ELISA在生物检测分析领域的广泛应用， 根据试剂的来源和标本的情况以及检测的具体 条件，逐渐演变出了几种不同类型的检测方法： （5）捕获法测IgM抗体； （6）ABS-ELISA法； （7）PCR-酶联免疫测定法； （8）斑点免疫酶结合试验。 （1）夹心法； （2）间接法； （3）竞争法； （4）双位点一步法；