❑ 用于固定化的酶，起初都是采用经提取和分离纯化后的酶， 后来随着固定化技术的发展，作为固定化的对象已不一定 是酶，也可对含酶细胞或细胞器进行固定化。1973年，日 本的千畑一郎等成功的使用固定化大肠杆菌菌体中的天冬 氨酸酶，由反丁烯二酸连续生产L-天冬氨酸，将固定化微 生物细胞首次应用于工业生产，使细胞固定化技术迅速发 展1986年，我国科学家利用固定化原生质体发酵生产碱性 磷酸酶和葡萄糖氧化酶等相继获得成功
❑ 用于固定化的酶，起初都是采用经提取和分离纯化后的酶， 后来随着固定化技术的发展，作为固定化的对象已不一定 是酶，也可对含酶细胞或细胞器进行固定化。1973年，日 本的千畑一郎等成功的使用固定化大肠杆菌菌体中的天冬 氨酸酶，由反丁烯二酸连续生产L-天冬氨酸，将固定化微 生物细胞首次应用于工业生产，使细胞固定化技术迅速发 展1986年，我国科学家利用固定化原生质体发酵生产碱性 磷酸酶和葡萄糖氧化酶等相继获得成功
❑ 目前，固定化技术已经取得了许多重要成果，充分发挥了 固定化酶和固定化细胞在改革工艺和降低成本方面的巨大 潜力。但从目前的发展状况来看，尽管酶种类繁多，但已 经固定化的酶却相对有限，采用固定化酶技术大规模生产 的企业尚属少数，真正在工业上使用的固定化酶还仅限于 葡萄糖异构酶、葡萄糖氧化酶和青霉素酰化酶等为数不多 的十几个酶种，故仍需大力研究开发使更多的固定化酶和 细胞能适用于工业规模生产
❑ 目前，固定化技术已经取得了许多重要成果，充分发挥了 固定化酶和固定化细胞在改革工艺和降低成本方面的巨大 潜力。但从目前的发展状况来看，尽管酶种类繁多，但已 经固定化的酶却相对有限，采用固定化酶技术大规模生产 的企业尚属少数，真正在工业上使用的固定化酶还仅限于 葡萄糖异构酶、葡萄糖氧化酶和青霉素酰化酶等为数不多 的十几个酶种，故仍需大力研究开发使更多的固定化酶和 细胞能适用于工业规模生产
4.3固定化酶的制备方法 ❑ 固定化酶的制备方法、制备材料多种多样，不同的制备方 法和材料，固定化后酶的特性不同。对于特定的目标酶， 要根据酶自身的性质、应用目的、应用环境来选择固定化 载体和方法
4.3固定化酶的制备方法 ❑ 固定化酶的制备方法、制备材料多种多样，不同的制备方 法和材料，固定化后酶的特性不同。对于特定的目标酶， 要根据酶自身的性质、应用目的、应用环境来选择固定化 载体和方法
❑ 在具体选择时，一般应遵循以下几个原则。 （1）必须注意维持酶的构象，特别是活性中心的构象。 酶的催化反应取决于酶本身蛋白质分子所特有的高级 结构和活性中心，为了不损害酶的催化活性及专一性， 酶在固定化状态下发挥催化作用时，既需要保证其高 级结构，又要使构成活性中心的氨基酸残基不发生变 化
❑ 在具体选择时，一般应遵循以下几个原则。 （1）必须注意维持酶的构象，特别是活性中心的构象。 酶的催化反应取决于酶本身蛋白质分子所特有的高级 结构和活性中心，为了不损害酶的催化活性及专一性， 酶在固定化状态下发挥催化作用时，既需要保证其高 级结构，又要使构成活性中心的氨基酸残基不发生变 化
❑ 这就要求酶与载体的结合部位不应当是酶的活性部位，应 避免活性中心的氨基酸残基参与固定化反应；另外，由于 酶蛋白的高级结构是凭借疏水键、氢键、盐键等较弱的键 维持的，所以固定化时应采取尽可能温和的条件，避免那 些可能导致酶蛋白高级结构破坏的条件，如高温、强酸、 强碱、有机溶剂等处理
❑ 这就要求酶与载体的结合部位不应当是酶的活性部位，应 避免活性中心的氨基酸残基参与固定化反应；另外，由于 酶蛋白的高级结构是凭借疏水键、氢键、盐键等较弱的键 维持的，所以固定化时应采取尽可能温和的条件，避免那 些可能导致酶蛋白高级结构破坏的条件，如高温、强酸、 强碱、有机溶剂等处理