蛋白质的盐析 ·分段盐析:调节盐浓度,可使混合蛋白质溶液 中的几种蛋白质分段析出: 鸡蛋清中球蛋白(50%(NH4)2SO4饱和度) 清蛋白(饱和NH4)2SO4)。 =2∑mz
蛋白质的盐析 ❖ 分段盐析:调节盐浓度,可使混合蛋白质溶液 中的几种蛋白质分段析出: 鸡蛋清中球蛋白(50%(NH4 )2SO4饱和度), 清蛋白(饱和(NH4 )2SO4 )。 2 2 1 i I = miZ
⑧在蛋白质的盐析中,通常采用的中性盐有硫酸铵、 硫酸钠、硫酸钾、硫酸镁、氯化钠和磷酸钠等,其 中以疏酸铵最为常用。因为硫酸铵在水中的溶解度 大而且温度系数小(在25℃时,溶解度为767g/L; 0℃时,溶解度为697g/L)不影响酶的活性,分离 效果好,而且价廉易得。然而用硫酸铵进行盐析时, 缓冲能力较差,而且铵离子的存在会干扰蛋白质的 测定,所以有时也用其他中性盐进行盐析
❖ 在蛋白质的盐析中,通常采用的中性盐有硫酸铵、 硫酸钠、硫酸钾、硫酸镁、氯化钠和磷酸钠等,其 中以硫酸铵最为常用。因为硫酸铵在水中的溶解度 大而且温度系数小(在25℃ 时,溶解度为767g/L; 0℃时,溶解度为697g/L)不影响酶的活性,分离 效果好,而且价廉易得。然而用硫酸铵进行盐析时, 缓冲能力较差,而且铵离子的存在会干扰蛋白质的 测定,所以有时也用其他中性盐进行盐析
硫酸铵沉淀蛋白质主要与盐浓度有关,硫酸铵浓 度的表示方法是以饱和溶液的百分数表示,称为 百分饱和度,而不用实际的克数或克分子数,这 是由于当固体硫酸铵加到水溶液中去时,会出现 相当大的非线性体积变化。 操作流程: 蛋白质溶液 加入硫酸铵 静止沉淀 离心或过滤 收集沉淀
硫酸铵沉淀蛋白质主要与盐浓度有关,硫酸铵浓 度的表示方法是以饱和溶液的百分数表示,称为 百分饱和度,而不用实际的克数或克分子数,这 是由于当固体硫酸铵加到水溶液中去时,会出现 相当大的非线性体积变化。 蛋白质溶液 加入硫酸铵 静止沉淀 离心或过滤 收集沉淀 操作流程:
蛋白质的盐析 盐溶 盐析 离子强度 硫酸铵对马血红蛋白的溶解度的影响
蛋白质的盐析 硫酸铵对马血红蛋白的溶解度的影响 离子强度 盐溶 盐 析
2、有机溶剂沉淀法 常用的是乙醇、丙酮。 聚乙二醇
2、有机溶剂沉淀法 ❖常用的是乙醇、丙酮。 ❖聚乙二醇