第七章蛋白质的性质和分离纯化 Properties and Purification of Protein Dextran bead 688
第七章 蛋白质的性质和分离纯化 Properties and Purification of Protein
第二节蛋白质分离纯化及含量测定 蛋白质分离纯化的总目标： 。增加制品的纯度或比活性（单位蛋白质 重量中目标蛋白质的含量或生物活性) 蛋白质分离纯化的基本原则： ·选择好的材料 ÷摸清目的蛋白质的稳定性 。探索有效的抽提法和浓缩法 ·建立一套层析的组合 以较好的方法贮存
第二节 蛋白质分离纯化及含量测定 蛋白质分离纯化的总目标: ❖ 增加制品的纯度或比活性（单位蛋白质 重量中目标蛋白质的含量或生物活性） 蛋白质分离纯化的基本原则: ❖ 选择好的材料 ❖ 摸清目的蛋白质的稳定性 ❖ 探索有效的抽提法和浓缩法 ❖ 建立一套层析的组合 ❖ 以较好的方法贮存
蛋白质分离纯化的步骤及具体方法 、 初（粗）提 三、细分级分离 组织、细胞破碎 (精纯化) 缓冲液提取。 ÷分子筛层析 二、粗分级分离 亲和层析 (粗纯化) 。疏水/反相层析 。盐析 。离子交换层析 有机溶剂沉淀 吸附层析 等电点沉淀 。电泳等 超滤浓缩等 四、结晶
一、初(粗)提 ❖ 组织、细胞破碎 ❖ 缓冲液提取。 二、粗分级分离 （粗纯化） ❖ 盐析 ❖ 有机溶剂沉淀 ❖ 等电点沉淀 ❖ 超滤浓缩等 三、细分级分离 （精纯化） ❖ 分子筛层析 ❖ 亲和层析 ❖ 疏水/反相层析 ❖ 离子交换层析 ❖ 吸附层析 ❖ 电泳等 四、结晶 蛋白质分离纯化的步骤及具体方法
蛋白质分离纯化的方法依据性质 。蛋白质分子的大小 。蛋白质溶解度 ·蛋白质电荷状况 。蛋白质吸附性质 ÷蛋白质生物学亲和性
❖ 蛋白质分子的大小 ❖ 蛋白质溶解度 ❖ 蛋白质电荷状况 ❖ 蛋白质吸附性质 ❖ 蛋白质生物学亲和性 蛋白质分离纯化的方法依据性质
依据分子大小不同的纯化方法 加压 1、透析和超滤 透析：分离无机盐、单糖 蛋白质溶液 等小分子。 半透膜 超滤：分离无机盐、单糖 支持膜的栅板 等小分子。 超滤液 超滤
一、依据分子大小不同的纯化方法 1、透析和超滤 透析：分离无机盐、单糖 等小分子。 超滤：分离无机盐、单糖 等小分子