(2)TPCK(N-对甲苯磺酰苯丙酰氯甲基酮) TPCK修饰His,使His烷基化。 C TPE(N-对甲苯磺酰苯丙氨酸乙酯) TPOK(N-对-甲苯磺酰苯丙酰氯甲基酮， NE c五GCH-C·CEC N-tosyl-L-phenylala-nyl chloromethylketone) 作用 定位基() CHa R-C一CHC十 HN- 0 -8O 烧化排 砖凝乳蛋白衡的Hi35: 烷化了的酵唑乐 TPCK 的咪理环 NH CH,CH-C-OR' 定位裤(R)】
（2）TPCK（N-对甲苯磺酰苯丙酰氯甲基酮） TPCK修饰His，使His烷基化。 TPE（N-对甲苯磺酰苯丙氨酸乙酯）
(3)碘乙酸、对氯汞苯甲酸修饰巯基：PITC、 FDNB修饰氨基；环己二酮修饰胍基等。 2、动力学参数测定法 3、X-光衍射分析 4、基因定位突变法 胰蛋白酶Asp12突变为Asn102;keat降低5000倍
（3）碘乙酸、对氯汞苯甲酸修饰巯基；PITC、 FDNB修饰氨基；环己二酮修饰胍基等。 ３、X-光衍射分析 ４、基因定位突变法 胰蛋白酶 Asp102突变为Asn102；kcat降低5000倍。 ２、动力学参数测定法
化学反应自由能方程式G=H-TS (AG是总自由能的变化，H是总热能的变化， S是熵的变化) 当4G>0,反应不能自发进行。 当4G<0,反应能自发进行。 活化能：分子由常态转变为活化状态所需的能量。 是指在一定温度下，1mol反应物全部进入活化 状态所需的自由能
化学反应自由能方程式 ΔG =ΔH -TΔS （ ΔG是总自由能的变化， ΔH 是总热能的变化， ΔS是熵的变化） 当ΔG＞0，反应不能自发进行。 当ΔG＜0，反应能自发进行。 活化能：分子由常态转变为活化状态所需的能量。 是指在一定温度下，1mol 反应物全部进入活化 状态所需的自由能
化学反应速率的依赖因素： ①分子间碰撞频率： ②有效碰撞分子的百分数。 加快反应速度的方法： ① 供给能量，如加温、光照等 ②使用催化剂，降低活化能
化学反应速率的依赖因素： 分子间碰撞频率； 有效碰撞分子的百分数。 加快反应速度的方法： 供给能量，如加温、光照等 使用催化剂，降低活化能
过渡态 非催化反应活化能 能量改变 一般催化剂 反应括化能 酶促反应活化能 初 态 反应总能量变化 终态 活化过程 酶促反应活化能的改变
一般催化剂 反应活化能 反应总能量变化 酶促反应活化能 非催化反应活化能 初 态 终 态 能 量 改 变 活 化 过 程 酶促反应活化能的改变 过渡态