大肠杆菌的检测 （1）常规检测方法 国家标准：国家标准采用三步法，即：乳糖发酵试验、分离 培养和证实试验。 • 乳糖发酵试验：样品稀释后，选择三个稀释度，每个稀释度 接种三管乳糖胆盐发酵管。36±1℃培养48±2h，观察是否 产气。 • 分离培养：将产气发酵管培养物转种于伊红美蓝琼脂平板上， 36±1℃培养18-24h，观察菌落形态。 • 证实试验：挑取平板上的可疑菌落，进行革兰氏染色观察。 同时接种乳糖发酵管36±1℃培养24±2h，观察产气情况。 • 报告：根据证实为大肠杆菌阳性的管数，查MPN表，报告每 100ml（g）大肠菌群的MPN值
大肠杆菌的检测 （1）常规检测方法 国家标准：国家标准采用三步法，即：乳糖发酵试验、分离 培养和证实试验。 • 乳糖发酵试验：样品稀释后，选择三个稀释度，每个稀释度 接种三管乳糖胆盐发酵管。36±1℃培养48±2h，观察是否 产气。 • 分离培养：将产气发酵管培养物转种于伊红美蓝琼脂平板上， 36±1℃培养18-24h，观察菌落形态。 • 证实试验：挑取平板上的可疑菌落，进行革兰氏染色观察。 同时接种乳糖发酵管36±1℃培养24±2h，观察产气情况。 • 报告：根据证实为大肠杆菌阳性的管数，查MPN表，报告每 100ml（g）大肠菌群的MPN值
检样 稀释 乳糖胆盐发酵管 24h±2h 379℃±1℃ 不产气 产气 大肠菌群阴性 伊红美蓝琼脂平板 18-24h 报告☐ 37℃±2℃ 革兰氏染色 乳L糖发酵管 24h±2h 37℃±2℃ 革兰氏阳性 革兰氏阴性 加气 不产气 大肠菌群阴性 无芽孢杆 报告☐ 大肠菌群阴性■ 大肠菌群阳性 报告] 报告☐ 图 大肠菌群的检验程序图
原国家商检局制订的行业标准，等效采用美国FDA的 标准方法，用于对出口食品中的大肠杆菌进行检测。 本方法采用两步法： • 推测试验：样品稀释后，选择三个稀释度，每个稀释 度接种三管LST肉汤。36±1℃培养48±2h，观察是否 产气。 • 证实试验：将产气管培养物接种煌绿乳糖胆盐 （BGLB）肉汤管中，36±1℃培养48±2h，观察是否 产气。以BGLB产气为阳性。查MPN表，报告每ml(g) 样品中大肠菌群的MPN值
原国家商检局制订的行业标准，等效采用美国FDA的 标准方法，用于对出口食品中的大肠杆菌进行检测。 本方法采用两步法： • 推测试验：样品稀释后，选择三个稀释度，每个稀释 度接种三管LST肉汤。36±1℃培养48±2h，观察是否 产气。 • 证实试验：将产气管培养物接种煌绿乳糖胆盐 （BGLB）肉汤管中，36±1℃培养48±2h，观察是否 产气。以BGLB产气为阳性。查MPN表，报告每ml(g) 样品中大肠菌群的MPN值
(2) PCR方法 ➢ 大肠杆菌是食品和水源污染粪便的指示菌。 ➢ Gene-TARK研制出用浸染棒检测大肠杆菌中 16SrRNA的探针，样品需前增菌处理，以异硫 氰荧光素（FITC）标记探针，再用辣根过氧 化物酶标记抗FITC抗体检测杂交复合物。 ➢ Hsu等报导此方法特异性（除相近的志贺氏菌 外）达100％，假阳性率达1.2％
(2) PCR方法 ➢ 大肠杆菌是食品和水源污染粪便的指示菌。 ➢ Gene-TARK研制出用浸染棒检测大肠杆菌中 16SrRNA的探针，样品需前增菌处理，以异硫 氰荧光素（FITC）标记探针，再用辣根过氧 化物酶标记抗FITC抗体检测杂交复合物。 ➢ Hsu等报导此方法特异性（除相近的志贺氏菌 外）达100％，假阳性率达1.2％
8.1.2 沙门氏菌属（Salmonella) ❖ 沙门氏菌是引起食物中毒的重要病原菌。在世界各 国各类细菌性的食物中毒中，沙门氏菌常居前列。 因此，沙门氏菌的检测是各国检验机构对多种进出 口食品的必检项目之一。 ❖ 沙门氏菌属是肠杆菌科中最复杂的菌属。它属于革 兰氏阴性杆菌。可根据沙门氏菌的菌体抗原（O抗 原）分群（A, B, C等），再根据其鞭毛抗原（H抗 原）分血清型（1、2等）
8.1.2 沙门氏菌属（Salmonella) ❖ 沙门氏菌是引起食物中毒的重要病原菌。在世界各 国各类细菌性的食物中毒中，沙门氏菌常居前列。 因此，沙门氏菌的检测是各国检验机构对多种进出 口食品的必检项目之一。 ❖ 沙门氏菌属是肠杆菌科中最复杂的菌属。它属于革 兰氏阴性杆菌。可根据沙门氏菌的菌体抗原（O抗 原）分群（A, B, C等），再根据其鞭毛抗原（H抗 原）分血清型（1、2等）