存在问题:当系线长度增加 时,系统的表面张力增大, 可能导致溶质在界面上的 吸附.这种现象在处理含细 胞和固体微粒的料液时尤 为严重,细胞或固体微粒容 易集中在界面上,给萃取操 作带来因难,.但对于可溶 性蛋白质.这种界面吸附现 象很少发生,一般可不考虑
存在问题:当系线长度增加 时,系统的表面张力增大, 可能导致溶质在界面上的 吸附.这种现象在处理含细 胞和固体微粒的料液时尤 为严重,细胞或固体微粒容 易集中在界面上,给萃取操 作带来因难,.但对于可溶 性蛋白质.这种界面吸附现 象很少发生,一般可不考虑
2)盐 :图为各种离子在PEF/DX系统中的m. 图 示:HPO4 2-和H2PO4 - (H1.5PO4 -1.5 )离子在 PEG/DX系统的m小, 因此利用pH > 7的 磷酸盐buffer很容易改变,使带负电pro 有较高的m. HFS:盐的种类和浓度影响pro的HFS, 从 而影响pro的m。当盐的浓度很大时(如 >1mol/dm3 ), 由于强烈的盐析,蛋白质的 溶解度达到极限,表现分配系数增大,此 时m与pro浓度有关。利用这一特点,通 过调节ATPS盐浓度,可选择性萃取不同 的pro。 不良影响:改变各相中成相物质的组成和相 体积比。如PEG/Kpi系统中上、下相(或 称轻重组)的PEG和磷钾浓度
2)盐 :图为各种离子在PEF/DX系统中的m. 图 示:HPO4 2-和H2PO4 - (H1.5PO4 -1.5 )离子在 PEG/DX系统的m小, 因此利用pH > 7的 磷酸盐buffer很容易改变,使带负电pro 有较高的m. HFS:盐的种类和浓度影响pro的HFS, 从 而影响pro的m。当盐的浓度很大时(如 >1mol/dm3 ), 由于强烈的盐析,蛋白质的 溶解度达到极限,表现分配系数增大,此 时m与pro浓度有关。利用这一特点,通 过调节ATPS盐浓度,可选择性萃取不同 的pro。 不良影响:改变各相中成相物质的组成和相 体积比。如PEG/Kpi系统中上、下相(或 称轻重组)的PEG和磷钾浓度
3)、pH value A (pH – pI) value pro(Z) lnm
3)、pH value A (pH – pI) value pro(Z) lnm
B 交错分配法(cross partitioning): 当加入不同种类的盐时,由于相 间电位不同,lnm–pH关系曲线也 不一样。但在pro的pI处,由于 Z=0,m应相同,即两条关系曲 线交于一点。所以, 通过测定不 同盐类存在下 lnm–pH曲线的交 点,可测定蛋白质\细胞器以及微 粒的pI。 C pH影 响 磷 酸 盐 解 离 : 即影响 PEG/Kpi系统的相间电位和蛋白 质的分配系数。对某些pro, pH的 很小变化会使m改变2~3个数量 级
B 交错分配法(cross partitioning): 当加入不同种类的盐时,由于相 间电位不同,lnm–pH关系曲线也 不一样。但在pro的pI处,由于 Z=0,m应相同,即两条关系曲 线交于一点。所以, 通过测定不 同盐类存在下 lnm–pH曲线的交 点,可测定蛋白质\细胞器以及微 粒的pI。 C pH影 响 磷 酸 盐 解 离 : 即影响 PEG/Kpi系统的相间电位和蛋白 质的分配系数。对某些pro, pH的 很小变化会使m改变2~3个数量 级