16 沉淀法
16 沉淀法
⚫ 沉淀法是最古老的分离和纯化生物物质的方法， 目前仍广泛应用在工业上和实验室中。 ⚫ 由于其浓缩作用常大于纯化作用，因而沉淀法通 常作为初步分离的一种方法，用于从去除了菌体 或细胞碎片的发酵液中沉淀出生物物质，然后再 利用色层分离等方法进一步提高其纯度。 ⚫ 沉淀法由于成本低、收率高(不会使蛋白质等大分 子失活)、浓缩倍数高可达l0-50倍和操作简单等 优点，是下游加工过程中应用广泛的值得注意的 方法
⚫ 沉淀法是最古老的分离和纯化生物物质的方法， 目前仍广泛应用在工业上和实验室中。 ⚫ 由于其浓缩作用常大于纯化作用，因而沉淀法通 常作为初步分离的一种方法，用于从去除了菌体 或细胞碎片的发酵液中沉淀出生物物质，然后再 利用色层分离等方法进一步提高其纯度。 ⚫ 沉淀法由于成本低、收率高(不会使蛋白质等大分 子失活)、浓缩倍数高可达l0-50倍和操作简单等 优点，是下游加工过程中应用广泛的值得注意的 方法
定义 沉淀是物理环境的变化引起溶质的溶解度降低、 生成固体凝聚物的现象。 沉淀的种类 盐析 等电点沉淀 有机溶剂沉淀 非离子型聚合物沉淀法 聚电解质沉淀法 高价金属离子沉淀法 热沉淀法
定义 沉淀是物理环境的变化引起溶质的溶解度降低、 生成固体凝聚物的现象。 沉淀的种类 盐析 等电点沉淀 有机溶剂沉淀 非离子型聚合物沉淀法 聚电解质沉淀法 高价金属离子沉淀法 热沉淀法
蛋白质表面特性 蛋白质溶解：相似者相溶 亲水性和疏水性： 有利因素：亲水性，包括氢键、极 性基团、离子化侧链、亲水蛋白 所占的%等。如白蛋白 不利因素：疏水性，包括暴露的疏 水基团、疏水蛋白所占的%等。 如纤维蛋白原
蛋白质表面特性 蛋白质溶解：相似者相溶 亲水性和疏水性： 有利因素：亲水性，包括氢键、极 性基团、离子化侧链、亲水蛋白 所占的%等。如白蛋白 不利因素：疏水性，包括暴露的疏 水基团、疏水蛋白所占的%等。 如纤维蛋白原
蛋白质溶液的稳定因素 1)、水化层(hydration shell) tight hydration shell(0.35g water/1g pro) loose hydration shell(2g water /1g pro) 2)、静电排斥 zeta电势 Nernst Potential—胶核表面电位(不可测) Stern Potential—(不可测) Potential—滑面电位(可测,mobility) 水化层 zeta电势 静电排斥 Tight hydration shell Protein core Loose hydration shell
蛋白质溶液的稳定因素 1)、水化层(hydration shell) tight hydration shell(0.35g water/1g pro) loose hydration shell(2g water /1g pro) 2)、静电排斥 zeta电势 Nernst Potential—胶核表面电位(不可测) Stern Potential—(不可测) Potential—滑面电位(可测,mobility) 水化层 zeta电势 静电排斥 Tight hydration shell Protein core Loose hydration shell