实验八十三实验性心肌缺血-再灌注损伤组织器官缺血一段时间后恢复血供，部分患者会使组织的损伤加重、器官功能进一步恶化，这种现象称缺血一再灌注损伤多种器官都可发生再灌注损伤，其中心肌、脑和肠道的再灌注损伤最常见。目前认为，再灌注损伤的机制主要有自由基损伤学说、钙超负荷、白细胞作用和高能磷酸化合物缺乏。通过实验研究其发病机制和有效保护措施是改善临床治疗的关键。【实验目的】复制大白鼠心脏再湛流综合征模型。观察再灌注时心律失常的表现及心功能指标改变。【实验原理】本实验通过结扎大鼠左心耳根部下方2mm处冠状动脉，造成左室壁大部分梗塞，5min后解除结扎线，恢复血供，观察再灌注后心功能及心电图变化。【实验动物】雄性大白鼠【器材、药品】Powerlab生物信号记录处理系统，小动物人工呼吸机，小动物手术器械，小拉钧一副、电烧的器一台、直径3mm、长2cm的封口胶管一根、气管插管，左心室导管。【方法步骤与观察项目】本实验以心电图、左室内压（LVP）、左室内压变化速率最大值（土dp/dtmax）、左室舒张末期压（LVEDP）为观察指标。（一）取体重200～300g，健康雄性大白鼠两只，称重后腹腔内注射3%戊巴比妥钠溶液（45mg/kg）麻醉动物。（二）将动物仰卧固定于小动物手术台上，用标准肢体L导联记录心电图。三）剪去手术部位被毛，在颈部作2.5cm长纵切口，分离气管，插入气管插管。（四）分离右颈总动脉，穿结扎线两根，结扎远心端后用小动脉夹夹紧近心端，插入直径约为0.5mm～0.8mm聚乙烯导管，用结扎线轻扎固定，然后松开动脉夹，将导管缓馒入左心室，双重结扎固定，导管另一端经压力传感器与Powerlab生物信号记录处理系统相连，两只动物同时连续测定心功能指标，包括LVP、土dp/dtmaX、LVEDP。（五）在胸骨左侧旁药0.5cm处用电烧灼器从第3至5肋纵行切开皮肤与肌层：自切口处开胸，立即作正压人工呼吸（吸室内空气，通气量为2ml100g体重，频率60～70次/min）
实验八十三 实验性心肌缺血-再灌注损伤 组织器官缺血一段时间后恢复血供，部分患者会使组织的损伤加重、器官功能进一步 恶化，这种现象称缺血-再灌注损伤多种器官都可发生再灌注损伤，其中心肌、脑和肠道 的再灌注损伤最常见。目前认为，再灌注损伤的机制主要有自由基损伤学说、钙超负荷、 白细胞作用和高能磷酸化合物缺乏。通过实验研究其发病机制和有效保护措施是改善临床 治疗的关键。 【实验目的】 复制大白鼠心脏再湛流综合征模型。观察再灌注时心律失常的表现及心功能指标改 变。 【实验原理】 本实验通过结扎大鼠左心耳根部下方 2mm 处冠状动脉，造成左室壁大部分梗塞，5min 后解除结扎线，恢复血供，观察再灌注后心功能及心电图变化。 【实验动物】 雄性大白鼠 【器材、药品】 Powerlab 生物信号记录处理系统，小动物人工呼吸机，小动物手术器械，小拉钧一 副、电烧的器一台、直径 3mm、长 2cm 的封口胶管一根、气管插管，左心室导管。 【方法步骤与观察项目】 本实验以心电图、左室内压（LVP）、左室内压变化速率最大值（±dp/dt max）、左室 舒张末期压（LVEDP）为观察指标。 (一) 取体重 200～300g，健康雄性大白鼠两只，称重后腹腔内注射 3％戊巴比妥钠溶 液（45mg/kg）麻醉动物。 (二) 将动物仰卧固定于小动物手术台上，用标准肢体 L 导联记录心电图。 (三) 剪去手术部位被毛，在颈部作 2.5cm 长纵切口，分离气管，插入气管插管。 (四) 分离右颈总动脉，穿结扎线两根，结扎远心端后用小动脉夹夹紧近心端，插入直 径约为 0．5mm～0.8mm 聚乙烯导管，用结扎线轻扎固定，然后松开动脉夹，将导管缓馒插 入左心室，双重结扎固定，导管另一端经压力传感器与 Powerlab 生物信号记录处理系统 相连，两只动物同时连续测定心功能指标， 包括 LVP、±dp/dt max、LVEDP。 (五) 在胸骨左侧旁约 0.5cm 处用电烧灼器从第 3 至 5 肋纵行切开皮肤与肌层；自切口 处开胸，立即作正压人工呼吸（吸室内空气，通气量为 2ml100g 体重，频率 60～70 次/min）
剪开心包，暴露心脏。以左冠状静脉主干为标志，在左心耳根部下方2mm处进针，用5/0线穿过左冠状动脉下方的心肌表层，在肺动脉圆锥旁出针（如图3-43左），将心脏放回原处。待心电图恢复稳定10min后，描记正常心电图及心功能指标。结扎冠脉，结扎时将硅胶管置于结扎线与血管之间，使硅胶管压迫引起冠脉梗塞5min，每分钟记录心电图及心功能指标一次。5min后松线解除梗塞，恢复灌流30min，动态记录解除结扎后10sec、30sec、1min、5min、10min、20min、30min时心电图及心功能指标，观察心律失常（如图3-43右）发生的时间及心功能指标改变情况，动物有否死亡。有条件时可测定血清LDH活性、MDA含量等。图3-43（六）根据实验设计课要求，设计心肌保护药物的观察比较。（七）实验结束后，从主动脉根部注射碳素墨汁来验证左冠状动脉主干是否结扎准确。【注意事项】（一）作左心室插管时，应小心谨慎，防止出血，勿刺破主动脉壁及心室壁。（二）本实验宜选用雄性大白鼠。因雌性大白鼠冠脉结扎缺血时间需10min以上，且模型不甚稳定。三）严格掌握缺血时间，过长或过短都不易诱发再灌注性心律失常。（四）作冠脉穿线用无创伤小圆缝合针，动作要轻巧，位置准确，进针宜浅，否则易引起传导阻滞而致死。（何芳）
剪开心包， 暴露心脏。 以左冠状静脉主干为标志，在左心耳根部下方 2mm 处进针， 用 5/0 线穿过左冠状动脉下方的心肌表层，在肺动脉圆锥旁出针(如图 3-43 左)，将心脏 放回原处。待心电图恢复稳定 10min 后，描记正常心电图及心功能指标。结扎冠脉，结扎 时将硅胶管置于结扎线与血管之间，使硅胶管压迫引起冠脉梗塞 5min，每分钟记录心电图 及心功能指标一次。5min 后松线解除梗塞，恢复灌流 30min，动态记录解除结扎后 10sec、 30sec、1min、5min、10min、20min、30min 时心电图及心功能指标，观察心律失常（如图 3-43 右）发生的时间及心功能指标改变情况，动物有否死亡。有条件时可测定血清 LDH 活 性、MDA 含量等。 图 3-43 (六) 根据实验设计课要求，设计心肌保护药物的观察比较。 (七) 实验结束后，从主动脉根部注射碳素墨汁来验证左冠状动脉主干是否结扎准确。 【注意事项】 (一) 作左心室插管时，应小心谨慎，防止出血，勿刺破主动脉壁及心室壁。 (二) 本实验宜选用雄性大白鼠。因雌性大白鼠冠脉结扎缺血时间需 10min 以上，且模 型不甚稳定。 (三) 严格掌握缺血时间，过长或过短都不易诱发再灌注性心律失常。 (四) 作冠脉穿线用无创伤小圆缝合针， 动作要轻巧，位置准确，进针宜浅，否则易 引起传导阻滞而致死。 （何芳）