(三)提取 1.沉淀法 (1)等电点沉淀法(isoelectric precipitation) ⚫ 氨基酸(两性电解质)在等电点时溶解度最低。 ⚫ 较少单独使用,多与其它方法联合使用(如盐析法、有 机溶剂法),因蛋白质在等电点仍有一定的溶解度
(三)提取 1.沉淀法 (1)等电点沉淀法(isoelectric precipitation) ⚫ 氨基酸(两性电解质)在等电点时溶解度最低。 ⚫ 较少单独使用,多与其它方法联合使用(如盐析法、有 机溶剂法),因蛋白质在等电点仍有一定的溶解度
谷氨酸分子中有两个羧基和一个碱性氨基, 溶于水后呈离子状态。 离子态 GA+ GA± GA– GA= pH 2 3.22 7.0 >12 等电点
谷氨酸分子中有两个羧基和一个碱性氨基, 溶于水后呈离子状态。 离子态 GA+ GA± GA– GA= pH 2 3.22 7.0 >12 等电点
(2)不溶性盐沉淀法 某些代谢产物在一定pH下,能与酸、碱或金属 离子等形成不溶性盐沉淀析出,再用适当方法使复 合物溶解。 锌盐法:提取谷氨酸 钙盐法:提取柠檬酸 单 宁:提取酶
(2)不溶性盐沉淀法 某些代谢产物在一定pH下,能与酸、碱或金属 离子等形成不溶性盐沉淀析出,再用适当方法使复 合物溶解。 锌盐法:提取谷氨酸 钙盐法:提取柠檬酸 单 宁:提取酶
(3)有机溶剂沉淀法 试剂:丙酮、乙醇、甲醇等亲水溶剂 乙醇沉淀多糖: 在较高的醇浓度下,降低多糖分子与水之间的亲 和力,使多糖分子之间相互结合形成沉淀
(3)有机溶剂沉淀法 试剂:丙酮、乙醇、甲醇等亲水溶剂 乙醇沉淀多糖: 在较高的醇浓度下,降低多糖分子与水之间的亲 和力,使多糖分子之间相互结合形成沉淀