织变白无绿色，将提取液移入10一15ml具塞刻度试管内，用1.5m1蒸馏水及少量丙酮冲洗磨碎器几次，最后用丙酮定容至10ml，此液为80%丙酮提取液：（二）静置几分钟后，用小离心机离心，吸取滤液2ml，加80%丙酮2m1稀释后，倒入lcm比色杯中，以80%丙酮作对照，分别在645nm、663nm和652nm下测定光密度。代入上述公式，计算出叶绿素含量。（三）若以黄瓜为材料，因叶绿素只存在于黄瓜果皮中，所以取样用锋利解剖刀在黄瓜头部或尾部平整部分轻轻将绿色表皮削下，然后称取0.5g样品研磨提取，提取物加1.5m1水，带上果肉，将会影响取样准确性，则用打孔器取样亦很好。用打孔器在黄瓜适当部位打孔，将打孔器取出的果肉中表皮一层用刀切下，称取0.5-1.0g样品（约5-10片，因打孔大小片数不同），然后按上述方法提取滴定。但计算叶绿素的单位是mg（或ug）/cm面积，上面各公式中的w（重量）改为面积。其值为nπr（n为所取小圆片片数，元为园周率3.1416，I为打孔器半径）。18
18 织变白无绿色，将提取液移入 10－15ml 具塞刻度试管内，用 1.5m1 蒸馏水及少量丙酮冲 洗磨碎器几次，最后用丙酮定容至 10ml，此液为 80％丙酮提取液； （二）静置几分钟后，用小离心机离心，吸取滤液 2ml，加 80％丙酮 2m1 稀释后，倒入 lcm 比色杯中，以 80％丙酮作对照，分别在 645nm、663nm 和 652nm 下测定光密度。代入上 述公式，计算出叶绿素含量。 （三）若以黄瓜为材料，因叶绿素只存在于黄瓜果皮中，所以取样用锋利解剖刀在黄瓜头 部或尾部平整部分轻轻将绿色表皮削下，然后称取 0.5g 样品研磨提取，提取物加 1.5m1 水，带上果肉，将会影响取样准确性，则用打孔器取样亦很好。用打孔器在黄瓜适当部位 打孔，将打孔器取出的果肉中表皮一层用刀切下，称取 0.5-1.0g 样品（约 5-10 片，因打 孔大小片数不同），然后按上述方法提取滴定。但计算叶绿素的单位是 mg（或 ug) /cm2 面 积，上面各公式中的 w（重量）改为面积。其值为 nπr 2 （n 为所取小圆片片数，π为园 周率 3.1416，r 为打孔器半径）
实验八水果、蔬菜粗纤维的测定方法一、实验目的了解和掌握水果、蔬产品中粗纤维的检测方法。二、实验原理样品相继与热的稀酸、稀碱共煮，并分别经过滤分离、洗涤残留物等操作，再进行干燥、灰化。酸可将糖、淀粉、果胶质和部分半纤维素水解而除去。碱能溶解蛋白质、部分半纤维素、本质素和皂化脂肪酸而将其除去。再用乙醇和乙醚处理。所得的残渣干燥后减去灰分重即为粗纤维含量。三、实验试剂及仪器设备（一）实验试剂试剂纯度均为分析纯，所用水为蒸馏水或同等纯度的水。1、硫酸溶液：c（1/2H2SO4)=0.255士0.005mo1/L，溶液浓度须经标定：2、氢氧化钠溶液：c（NaOH）=0.313士0.005mo1/L，溶液浓度须经标定3、95%乙醇：4、无水乙醚；5、消泡剂：如正辛醇等；6、石棉：加1:3的盐酸溶液（V：V）于石棉上并且煮沸大约45min，过滤、水洗、干燥后置550℃的马福炉中灼烧16h。取出放冷后加入硫酸煮沸30min，然后过滤，用蒸馅水洗净酸。再加入氢氧化钠煮沸30min，然后过滤，用硫酸洗一次，再用水洗净、烘干后置于550℃的马福炉中灼烧4h。冷却后加水成悬浊物，贮存于广口瓶中。（二）实验仪器感量0.0001g的电子天平、组织捣碎机、实验室用粉碎机、电热板、回流装置、适用于粗纤维含量测定的亚麻布、直径80mm或100mm的布氏漏斗、直径100mm或120mm的短颈漏斗、500ml或1000ml的抽滤瓶、30mL的古氏璃、电热鼓风干燥箱、马福炉、干19
19 实验八 水果、蔬菜粗纤维的测定方法 一、实验目的 了解和掌握水果、蔬菜产品中粗纤维的检测方法。 二、实验原理 样品相继与热的稀酸、稀碱共煮，并分别经过滤分离、洗涤残留物等操作，再进行干 燥、灰化。酸可将糖、淀粉、果胶质和部分半纤维素水解而除去。碱能溶解蛋白质、部分 半纤维素、本质素和皂化脂肪酸而将其除去。再用乙醇和乙醚处理。所得的残渣干燥后减 去灰分重即为粗纤维含量。 三、实验试剂及仪器设备 （一）实验试剂 试剂纯度均为分析纯，所用水为蒸馏水或同等纯度的水。 1、硫酸溶液：c（1／2H2SO4)=0.255 士 0.005mo1／L，溶液浓度须经标定； 2、氢氧化钠溶液：c（NaOH）=0.313 士 0.005 mo1／L，溶液浓度须经标定； 3、95％乙醇； 4、无水乙醚； 5、消泡剂：如正辛醇等； 6、石棉：加 1:3 的盐酸溶液（V：V）于石棉上并且煮沸大约 45min，过滤、水洗、干燥 后置 550℃的马福炉中灼烧 16h。取出放冷后加入硫酸煮沸 30min，然后过滤，用蒸馏水洗 净酸。再加入氢氧化钠煮沸 30 min，然后过滤，用硫酸洗一次，再用水洗净、烘干后置于 550℃的马福炉中灼烧 4h。冷却后加水成悬浊物，贮存于广口瓶中。 （二）实验仪器 感量 0.0001g 的电子天平、组织捣碎机、实验室用粉碎机、电热板、回流装置、适用 于粗纤维含量测定的亚麻布、直径 80mm 或 l00mm 的布氏漏斗、直径 l00mm 或 120mm 的 短颈漏斗、500ml 或 1000ml 的抽滤瓶、30mL 的古氏坩埚、电热鼓风干燥箱、马福炉、干
燥器等。四、试样的选取和制备（一）易捣碎的样品：选取有代表性的样品，经组织捣碎机匀浆后装入广口瓶中备用。（二）不易捣碎的样品：选取有代表性的样品，先取样按国标测定出水分含量（BI）。同时将样品置80℃烘箱烘干后用粉碎机粉碎，全部通过0.84mm（20目）的筛子。收集后装入广口瓶中备用。（三）经测定脂肪含量（c）后的残渣供粗纤维含量测定用。五、测定步骤（一）称样1、准确称取易捣碎样品的制备样品约20g，置500ml锥形瓶中；2、准确称取不易捣碎的样品制备样品约3g，置500ml锥形瓶中。同时称样按国标测定出水分含量（B2）3、准确称取脱脂残渣约3g，置500ml锥形瓶中。（二）蒸发水分和提取脂肪称样后，若水分含量高，可置80℃，烘箱中蒸发掉大部分水分。若脂肪含量超过1%者，可用乙醚多次浸泡、洗涤试样，然后倾析去掉溶剂，不能损失残渣，最后风干多余的溶剂。（三）酸处理1、加入95-100℃的硫酸溶液200ml（室温时量取）。如果起泡较多可预先加几滴消泡剂。装上冷凝管，立即在电热板上加热至微沸（约2min），微沸30士1min。微沸过程中需摇动几次锥形瓶，防止试样沾在液面之上；2、连接好抽滤装置，迅速抽滤分离。并且用95-100℃的热水洗涤残渣至滤液呈中性（蓝色石蕊试纸不变色）。（四）碱处理1、将留有残渣的亚麻布贴在短颈漏斗的内壁上，不要堵塞下水口。用95-100℃的氢氧化钠溶液200ml（室温时量取）将残渣冲洗入原锥形瓶中。装上冷凝管，立即在电热板上加20
20 燥器等。 四、试样的选取和制备 （一）易捣碎的样品：选取有代表性的样品，经组织捣碎机匀浆后装入广口瓶中备用。 （二）不易捣碎的样品：选取有代表性的样品，先取样按国标测定出水分含量（B1）。同 时将样品置 80℃烘箱烘干后用粉碎机粉碎，全部通过 0.84mm（20 目）的筛子。收集后装 入广口瓶中备用。 （三）经测定脂肪含量（c）后的残渣供粗纤维含量测定用。 五、测定步骤 （一）称样 1、准确称取易捣碎样品的制备样品约 20g，置 500ml 锥形瓶中； 2、准确称取不易捣碎的样品制备样品约 3g，置 500ml 锥形瓶中。同时称样按国标测定出 水分含量（B2）； 3、准确称取脱脂残渣约 3g，置 500ml 锥形瓶中。 （二）蒸发水分和提取脂肪 称样后，若水分含量高，可置 80℃，烘箱中蒸发掉大部分水分。若脂肪含量超过 1％ 者，可用乙醚多次浸泡、洗涤试样，然后倾析去掉溶剂，不能损失残渣，最后风干多余的 溶剂。 （三）酸处理 1、加入 95-100℃的硫酸溶液 200ml（室温时量取）。如果起泡较多可预先加几滴消泡剂。 装上冷凝管，立即在电热板上加热至微沸（约 2min），微沸 30 士 1min。微沸过程中需摇 动几次锥形瓶，防止试样沾在液面之上； 2、连接好抽滤装置，迅速抽滤分离。并且用 95-100℃的热水洗涤残渣至滤液呈中性（蓝 色石蕊试纸不变色）。 （四）碱处理 1、将留有残渣的亚麻布贴在短颈漏斗的内壁上，不要堵塞下水口。用 95-100℃的氢氧化 钠溶液 200ml（室温时量取）将残渣冲洗入原锥形瓶中。装上冷凝管，立即在电热板上加
热至微沸（约2min），微沸30士1min；2、连接好抽滤装置（铺有石棉的古氏），迅速抽滤分离。用硫酸溶液20ml（室温）洗涤残渣。再用95-100℃的热水充分洗涤后抽干，然后依次用乙醇和乙醚洗涤一次（脱脂样品不用乙醚再洗），抽干。（五）干燥将盛有残渣的古氏埚置130士2℃的烘箱中干操2h后取出，置干燥器中冷却至室温后称重（A,）。（六）灰化将盛有残渣的古氏置550士25℃的马福炉中灰化2h，待温度降至200℃以下时取出置干燥器中冷却至室温后称重。再将古氏置马福炉中灰化1h。重复操作直至2次称量差不超过0.5mg（Az）。或者将盛有残渣的古氏埚置600士15℃的马福炉中灰化0.5h。待温度降至200℃以下时取出置干燥器中冷却至室温后称重(A2)。（七）同一试样平行做2次测定。六、测定结果的计算公式（一）按五（一）1取样的计算公式：粗纤维(%)=2×100(式 1-8-1)W式中：A一一为古氏埚十粗纤维十残渣中灰分，gA2——为古氏埚十残渣中灰分，g;W——为试样的质量，g。（二）按五（一）2取样的计算公式：A,-A2粗纤维(%)=×100×(1-B)(式1-8-2)Wx(1-B,)式中：A一一为古氏埚十粗纤维十残渣中灰分，g;A2——为古氏埚十残渣中灰分，g；W——为试样的质量，g;21
21 热至微沸（约 2min），微沸 30 士 1min； 2、连接好抽滤装置（铺有石棉的古氏坩埚），迅速抽滤分离。用硫酸溶液 20ml（室温）洗 涤残渣。再用 95-100℃的热水充分洗涤后抽干，然后依次用乙醇和乙醚洗涤一次（脱脂样 品不用乙醚再洗），抽干。 （五）干燥 将盛有残渣的古氏坩埚置 130 士 2℃的烘箱中干操 2h 后取出，置干燥器中冷却至室温 后称重（A1）。 （六）灰化 将盛有残渣的古氏坩埚置 550 士 25℃的马福炉中灰化 2h，待温度降至 200℃以下时取 出置干燥器中冷却至室温后称重。再将古氏坩埚置马福炉中灰化 1h。重复操作直至 2 次称 量差不超过 0.5mg（A2）。 或者将盛有残渣的古氏坩埚置 600 士 15℃的马福炉中灰化 0.5h。待温度降至 200℃以 下时取出置干燥器中冷却至室温后称重(A2)。 （七）同一试样平行做 2 次测定。 六、测定结果的计算公式 （一）按五（一）1 取样的计算公式： ( ) 100 W A - A % 1 2 粗纤维 = × (式 1-8-1) 式中：A1——为古氏坩埚十粗纤维十残渣中灰分，g； A2——为古氏坩埚十残渣中灰分，g； W——为试样的质量，g。 （二）按五（一）2 取样的计算公式： ( ) ( ) ( ) 1 2 1 2 100 1 B W 1- B A - A % × × − × 粗纤维 = (式 1-8-2) 式中：A1——为古氏坩埚十粗纤维十残渣中灰分，g； A2——为古氏坩埚十残渣中灰分，g； W——为试样的质量，g；
B——为不易捣碎样品测定出的水分含量；B2一一为不易捣碎样品处理后测定出的水分含量。（三）按五（一）3取样的计算公式：粗纤维(%)=AA×100×(1-C)(式 1-8-3)W式中：A——为古氏埚十粗纤维十残渣中灰分，g;A2——为古氏十残渣中灰分，g;W——为试样的质量，g;B——为不易捣碎样品测定出的水分含量；C一一为测定的脂肪含量。七、备注（一）取2次测定的算术平均值作为测定结果。（二）测定结果低于10%时，2次测定结果之差的绝对值不得超过0.40：测定结果大于10%时，2次测定结果之差的相对值不得超过4%。22
22 B1——为不易捣碎样品测定出的水分含量； B2——为不易捣碎样品处理后测定出的水分含量。 （三）按五（一）3 取样的计算公式： ( ) 100 ( ) 1 C W A - A % 1 2 粗纤维 = × × − (式 1-8-3) 式中：A1——为古氏坩埚十粗纤维十残渣中灰分，g； A2——为古氏坩埚十残渣中灰分，g； W——为试样的质量，g； B1——为不易捣碎样品测定出的水分含量； c——为测定的脂肪含量。 七、备注 （一）取 2 次测定的算术平均值作为测定结果。 （二）测定结果低于 10％时，2 次测定结果之差的绝对值不得超过 0.40；测定结果大于 10％时，2 次测定结果之差的相对值不得超过 4％