（三）步骤1.培养基的配制：根据所培养的光合细菌的菌种不同，选用不同的水源配制培养基，如果菌种为淡水种，用自来水或蒸馏水配制；如果菌种为海水种，则用天然过滤海水配制。按培养基配方把所列物质称量（复合维生素B除外），混合溶解，再煮沸或灭菌，冷却后加入复合维生素B，备用。酵母膏3g蛋白陈3gCaCh20.3g0.5gMgSO4-7H20蒸馏水（或海水）1000ml6.8pH2.形态观察：先将光合细菌的培养材料摇匀，倒出少许于一小烧杯中，用吸管取1滴置于载玻片上，加上盖玻片，先在低倍镜下观察，后转至高倍镜下观察：小园形且数量多，会缓慢运动。3.培养：将培养基装入50ml或100ml三角烧瓶（装2/3），再将光合细菌种倒入三角烧瓶至满，摇匀，倒出少许于一小烧杯中，用血球计数板计数。用保鲜膜加橡胶圈密封。经1～2周培养即可见菌液颜色由橙黄色转变为红褐色，再计数。4.计数方法：将三角烧瓶摇匀后，倒出少许于一小烧杯中，用移液管取1ml置25m或50ml烧杯中，加入蒸馏水24ml或49ml稀释，用血球计数板计数。（四）作业1.试比较光合细菌与微藻类培养方法的不同之处，为什么？2.掌握光合细菌的培养方法。3.写一份详细的实验报告。二、微藻的形态观察与培养（一）饵用微藻类的形态观察1、目的1）重新认识、学习显微镜的使用方法和描绘生物图：2.）观察饵用绿藻、金黄藻、硅藻类、蓝藻类的形态特征；2、器材显微镜、载玻片、盖玻片、吸管、常见饵用微藻类、鲁哥氏（lugois）液（即碘液）等培养材料3、步骤将各微藻种类的培养材料摇匀，用专用吸管取观察材料置于载玻片上1一2滴，慢慢盖上玻片，先在低倍镜下观察，后逐渐转至中倍和高倍镜下观察，在低倍镜下可观察到种类的大小轮部、运动情况，然后在中倍镜下时，从盖玻片边缘加进半滴碘液，可以看到运动种类遇到碘液时随即死亡。最后在高倍镜下详细观察固定后的细胞形态特征。1）绿藻类：特征：色素体绿色，杯状。①衣藻（Chlamydomonassp.）：单细胞，卵形，细胞壁平清，细胞前端中央常有乳头4
4 （三）步骤 1. 培养基的配制：根据所培养的光合细菌的菌种不同，选用不同的水源配制培养基， 如果菌种为淡水种，用自来水或蒸馏水配制；如果菌种为海水种，则用天然过滤海水配制。 按培养基配方把所列物质称量（复合维生素 B 除外），混合溶解，再煮沸或灭菌，冷却后 加入复合维生素 B，备用。 酵母膏 3g 蛋白胨 3g CaCl2 0.3g MgSO4·7H2O 0.5g 蒸馏水（或海水） 1000ml pH 6.8 2. 形态观察：先将光合细菌的培养材料摇匀，倒出少许于一小烧杯中，用吸管取 1 滴 置于载玻片上，加上盖玻片，先在低倍镜下观察，后转至高倍镜下观察：小园形且数量多， 会缓慢运动。 3. 培养：将培养基装入 50m1 或 100ml 三角烧瓶（装 2/3），再将光合细菌种倒入三角 烧瓶至满，摇匀，倒出少许于一小烧杯中，用血球计数板计数。用保鲜膜加橡胶圈密封。 经 1～2 周培养即可见菌液颜色由橙黄色转变为红褐色，再计数。 4. 计数方法：将三角烧瓶摇匀后，倒出少许于一小烧杯中，用移液管取 1ml 置 25ml 或 50ml 烧杯中，加入蒸馏水 24ml 或 49ml 稀释，用血球计数板计数。 （四）作业 1. 试比较光合细菌与微藻类培养方法的不同之处，为什么？ 2. 掌握光合细菌的培养方法。 3. 写一份详细的实验报告。 二、微藻的形态观察与培养 （一）饵用微藻类的形态观察 1、目的 1） 重新认识、学习显微镜的使用方法和描绘生物图； 2.）观察饵用绿藻、金黄藻、硅藻类、蓝藻类的形态特征； 2、器材 显微镜、载玻片、盖玻片、吸管、常见饵用微藻类、鲁哥氏（lugois）液（即 碘液）等培养材料 3、步骤 将各微藻种类的培养材料摇匀，用专用吸管取观察材料置于载玻片上 1—2 滴，慢慢 盖上玻片，先在低倍镜下观察，后逐渐转至中倍和高倍镜下观察，在低倍镜下可观察到种 类的大小轮廓、运动情况，然后在中倍镜下时，从盖玻片边缘加进半滴碘液，可以看到运 动种类遇到碘液时随即死亡。最后在高倍镜下详细观察固定后的细胞形态特征。 1） 绿藻类：特征：色素体绿色，杯状。 ①衣藻（Chlamydomonas sp.）：单细胞，卵形，细胞壁平清，细胞前端中央常有乳头
状突起，前端基部着生2条等长的鞭毛，鞭毛基部具1一2个伸缩泡，色素体1个，杯状，绿色，有蛋白核，色素体和碘的作用呈褐色至灰黑色，蛋白核呈暗紫至黑色。细胞核呈淡黄褐色，1个眼点桔红色位于细胞一侧。②亚心形扁藻（Platymonassubcordiformis）：单生，体背后部略隆起，腹平坦，前端较宽阔，中间有浅凹陷由基部处着生4条不等长的鞭毛，鞭毛要在较暗视野方能观察到，1红色眼点位于蛋白核旁，蛋白核大型，向上开口。色素体绿色，杯状。在色素体外有细胞核1个。③青岛大扁藻（Phelgolandica）：形态特征与亚心形扁藻相似，只是个体比其大，且有多眼点的现象。④盐藻（Dunaliellasalina）：单生，细胞梨形，前端着生2条长鞭毛（比细胞长约1/3），色素体杯状，有1个具鞘的蛋白核，细胞核位于原生质中，眼点大，位于体的前端。蛋白核小球藻（Chlorellapyrenoidosa）：单生，细胞球形，具杯状色素体，蛋白核球形，细胞核位于中央。2）金黄藻类：特征：色素体褐色，侧生。①湛江叉鞭金藻(Dicrateriazhanjiangensis)：单生，细胞球形，具2条等长的鞭毛，且和细胞等长。色素体侧生，黄褐色。液泡1一3个，分散在细胞质中。细胞前端或后端常具1个白糖素体，白糖素与碘液不呈色，系白色不透明状。②球等鞭金藻（Isochrysisgalbana）：单生，无细胞壁，形状长椭圆形，具2条等长的长鞭毛约为细胞1一2倍，细胞运动缓慢，是其他运动种类所没有的特点。色素体2片，位置不固定，常是侧生、金黄色乃至褐色、1个暗红色眼点位于中央位置。细胞核1个，中位。代谢产物的白糖体随个体生长而长大。观察球等鞭金藻的群胶相。异胶藻（Hetcrogloeasp.）：属黄藻类。单生，细胞长圆形，色素体1块，侧生，黄绿色。3）蓝藻类：钝顶螺旋藻（Spiralinaplatensis）：细胞近方形，长26um、宽6~8um，藻丝由多细胞组成，兰绿色，横壁略收益。螺旋疏松，螺宽26～36um，旋间距43～57um，细胞内有颗粒体，横壁处无颗粒，未端细胞宽园形。4）硅藻类：特征：色素体黄褐色，块状。①三角褐藻（Phacodactylumtricorntun）：细胞有三出放射形和棱形的，以前者的数量多，后者少，细胞中心部分有一个细胞核，有黄褐色的色素体1一3片。棱形细胞两端略钝，弯向同侧，形态同小新月菱形藻。在固体培养基内会出现卵园形。②小新月菱形藻（Nitzschiaclesrtum）：细胞壁壳面中央膨大，呈纺锤形，两端渐尖，皆朝同方向弯曲。色素体黄褐色2片，位于细胞中央的两侧。③牟勒氏角毛藻（Chaetocerosmuelleri)：绝大多数是单生，偶有2一3个细胞组成群体，壳面椭圆至圆形，中央略凸或平坦。壳环皇长方形至四角形，壳环带不明显，角毛细而长，末端尖，自细胞角长出，几乎与纵轴平行，需调节光源在较暗视野可以看出，或角毛收缩。色素体1个，片状，黄褐色。④简单钙质角毛藻（Chaetocerossimplexvar.calcitrans）：形态同牟勒氏角毛藻，只休眠孢壳上具有细小的刺，而牟勒氏角毛藻的休眠孢的初生壳和次生壳皆光滑无刺。③中肋骨条藻（Skeletonemacostatum）：链状群体，细胞透镜形或圆柱形，壳面圆而5
5 状突起，前端基部着生 2 条等长的鞭毛，鞭毛基部具 1—2 个伸缩泡，色素体 1 个，杯状， 绿色，有蛋白核，色素体和碘的作用呈褐色至灰黑色，蛋白核呈暗紫至黑色。细胞核呈淡 黄褐色，1 个眼点桔红色位于细胞一侧。 ②亚心形扁藻（Platymonas subcordiformis）：单生，体背后部略隆起，腹平坦，前端 较宽阔，中间有浅凹陷由基部处着生 4 条不等长的鞭毛，鞭毛要在较暗视野方能观察到， 1 红色眼点位于蛋白核旁，蛋白核大型，向上开口。色素体绿色，杯状。在色素体外有细 胞核 1 个。 ③青岛大扁藻（P.helgolandica）：形态特征与亚心形扁藻相似，只是个体比其大，且 有多眼点的现象。 ④盐藻（Dunaliella salina）：单生，细胞梨形，前端着生 2 条长鞭毛（比细胞长约 1/3）， 色素体杯状，有 1 个具鞘的蛋白核，细胞核位于原生质中，眼点大，位于体的前端。 ⑤蛋白核小球藻（Chlorella pyrenoidosa）：单生，细胞球形，具杯状色素体，蛋白核 球形，细胞核位于中央。 2）金黄藻类：特征：色素体褐色，侧生。 ①湛江叉鞭金藻(Dicrateria zhanjiangensis)：单生，细胞球形，具2条等长的鞭毛，且 和细胞等长。色素体侧生，黄褐色。液泡1—3个，分散在细胞质中。细胞前端或后端常具 1个白糖素体，白糖素与碘液不呈色，系白色不透明状。 ②球等鞭金藻（Isochrysis galbana）：单生，无细胞壁，形状长椭圆形，具 2 条等长的 长鞭毛约为细胞 1—2 倍，细胞运动缓慢，是其他运动种类所没有的特点。色素体 2 片， 位置不固定，常是侧生、金黄色乃至褐色、1 个暗红色眼点位于中央位置。细胞核 1 个， 中位。代谢产物的白糖体随个体生长而长大。 观察球等鞭金藻的群胶相。 ③异胶藻（Hetcrogloea sp.）：属黄藻类。单生，细胞长圆形，色素体 1 块，侧生，黄 绿色。 3）蓝藻类： 钝顶螺旋藻（Spiralina platensis）：细胞近方形，长 2～6μm、宽 6～8μm，藻丝由多细 胞组成，兰绿色，横壁略收益。螺旋疏松，螺宽 26～36μm，旋间距 43～57μm，细胞内有 颗粒体，横壁处无颗粒，末端细胞宽园形。 4）硅藻类：特征：色素体黄褐色，块状。 ①三角褐藻（Phacodactylum tricorntun）：细胞有三出放射形和棱形的，以前者的数量 多，后者少，细胞中心部分有一个细胞核，有黄褐色的色素体 1—3 片。棱形细胞两端略 钝，弯向同侧，形态同小新月菱形藻。在固体培养基内会出现卵园形。 ②小新月菱形藻（Nitzschia clesrtum）：细胞壁壳面中央膨大，呈纺锤形，两端渐尖， 皆朝同方向弯曲。色素体黄褐色 2 片，位于细胞中央的两侧。 ③牟勒氏角毛藻（Chaetoceros muelleri）：绝大多数是单生，偶有 2—3 个细胞组成群 体，壳面椭圆至圆形，中央略凸或平坦。壳环呈长方形至四角形，壳环带不明显，角毛细 而长，末端尖，自细胞角长出，几乎与纵轴平行，需调节光源在较暗视野可以看出，或角 毛收缩。色素体 1 个，片状，黄褐色。 ④简单钙质角毛藻（Chaetoceros simplex var.calcitrans）：形态同牟勒氏角毛藻，只休 眠孢壳上具有细小的刺，而牟勒氏角毛藻的休眠孢的初生壳和次生壳皆光滑无刺。 ⑤中肋骨条藻（Skeletonema costatum）：链状群体，细胞透镜形或圆柱形，壳面圆而