遗传育种学实验教案
遗传育种学实验教案
实验一鱼类肾细胞的染色体制作技术一、教学目的：1.掌握鱼类肾细胞染色体制作的原理和技术二、教学重点：1.掌握鱼类肾细胞染色体制作的原理和技术三、教学难点：鱼类肾细胞染色体制作的原理和技术四、教学方法：1、实验演示与指导2、学生操作五、教学用具：实验材料：鲫鱼（或罗非鱼，或鬼）成鱼。实验器材：甲醇、冰醋酸、注射器、针头、剪刀、镊子、尼龙筛绢（260目）、离心机、离心管、吸管、显微镜。实验试剂：PHA溶液、鱼类生理盐水、秋水仙素溶液、0.075M的氯化钾低渗溶液、卡诺氏固定液和Giemsa染色液六、教学过程：1．讲解实验目的，实验原理，实验材料、器材与试剂，实验步骤以及实验操作中的注意事项。2.演示注射、解剖、剥取头肾和细胞悬液制备等步骤。3.安排学生按照讲义进行实验。4.在固定过程中，安排同学观察染色体示范片。5.完成固定步骤进行滴片和染色演示，同时说明影响结果的因素与注意事项。6.组织学生观察染色体制片，根据同学制片的效果和上课实验操作表现给出现场操作成绩。七、课程小结：注意培养同学动手能力、观察能力、结果分析能力。八、作业：撰写实验报告
实验一 鱼类肾细胞的染色体制作技术 一、 教学目的： 1. 掌握鱼类肾细胞染色体制作的原理和技术 二、 教学重点： 1. 掌握鱼类肾细胞染色体制作的原理和技术 三、 教学难点： 鱼类肾细胞染色体制作的原理和技术 四、 教学方法： 1、实验演示与指导 2、学生操作 五、 教学用具： 实验材料 ：鲫鱼（或罗非鱼，或鬼鮋）成鱼。 实验器材：甲醇、冰醋酸、注射器、针头、剪刀、镊子、尼龙筛绢（260 目）、离心 机、离心管、吸管、显微镜。 实验试剂：PHA 溶液、鱼类生理盐水、秋水仙素溶液、0.075M 的氯化钾低渗溶液、 卡诺氏固定液和 Giemsa 染色液 六、 教学过程： 1． 讲解实验目的，实验原理，实验材料、器材与试剂，实验步骤以及实验操作中的 注意事项。 2． 演示注射、解剖、剥取头肾和细胞悬液制备等步骤。 3． 安排学生按照讲义进行实验。 4． 在固定过程中，安排同学观察染色体示范片。 5． 完成固定步骤进行滴片和染色演示，同时说明影响结果的因素与注意事项。 6． 组织学生观察染色体制片，根据同学制片的效果和上课实验操作表现给出现场操 作成绩。 七、 课程小结： 注意培养同学动手能力、观察能力、结果分析能力。 八、 作业： 撰写实验报告
实验二染色体核型分析方法一、教学目的：1.掌握染色体组型分析的方法二、教学重点：1.掌握染色体组型分析的方法三、教学难点：掌握染色体组型分析的方法四、教学方法：1、实验演示与指导2、学生操作五、教学用具：实验材料：杂色鲍染色体图实验器材：圆规、直尺或三角板、剪刀。六、教学过程：1．讲解实验目的，实验原理，实验材料、器材与试剂，实验步骤以及实验操作中的注意事项。2.安排学生按照讲义进行实验。七、课程小结：注意培养同学动手能力、观察能力、结果分析能力。八、作业：撰写实验报告
实验二 染色体核型分析方法 一、 教学目的： 1. 掌握染色体组型分析的方法 二、 教学重点： 1. 掌握染色体组型分析的方法 三、 教学难点： 掌握染色体组型分析的方法 四、 教学方法： 1、实验演示与指导 2、学生操作 五、 教学用具： 实验材料：杂色鲍染色体图 实验器材：圆规、直尺或三角板、剪刀。 六、 教学过程： 1． 讲解实验目的，实验原理，实验材料、器材与试剂，实验步骤以及实验操作中的注 意事项。 2． 安排学生按照讲义进行实验。 七、 课程小结： 注意培养同学动手能力、观察能力、结果分析能力。 八、 作业： 撰写实验报告
实验三：鱼类肝脏酯酶同工酶电泳分析教学方法：教师先用约30分钟的时间讲述实验的目的、原理、实验材料、器材、试剂、实验步骤、注意事项以及实验报告的要求等，重点或难点之处需要给学生做演示。然后学生自已动手实验，教师实时指导。教学学时：8学时一、目的：了解原理、掌握技术、加深对同功酶概念的认识和了解二、原理：什么是同功酶？同工酶→聚丙烯酰胺凝胶电泳→不同酶蛋白带被分开→染色显出谱带丙烯酰胺（Acr）+甲叉双丙烯酰胺（Bis，交联剂）→（APS，TEMED）聚丙烯酰胺醋酸酯（酯酶水解）→水解产物（十坚牢蓝）→显色三、材料：鲫鱼（肝脏）四、器材：注意移液枪的量程和用法、离心机的用法五、实验试剂：边讲述便请同学自己检查台面上的试验试剂六、步骤：安装电泳槽（教师演示）→制胶→样品制备→上样前的准备→上样→电泳（黑板图示）→剥胶（演示）→染色→保存→观察记录（黑板图示）→收拾台面七、注意事项：样品尽量保持低温；离心要平衡；丙烯酰胺有毒；灌胶动作要迅速以防聚合；八、作业：完成实验报告，画图说明试验结果。迁移常数：R=酶带中心与原点的距离/溴酚兰与原点的距离两种生物的相同值=两种生物相同酶带数/（不同酶带数+相同酶带数）
实验三：鱼类肝脏酯酶同工酶电泳分析 教学方法：教师先用约 30 分钟的时间讲述实验的目的、原理、实验材料、器材、 试剂、实验步骤、注意事项以及实验报告的要求等，重点或难点之处 需要给学生做演示。然后学生自己动手实验，教师实时指导。 教学学时：8 学时 一、目的：了解原理、掌握技术、加深对同功酶概念的认识和了解 二、原理： 什么是同功酶？ 同工酶 → 聚丙烯酰胺凝胶电泳 → 不同酶蛋白带被分开 →染色显出谱带 丙烯酰胺（Acr）＋甲叉双丙烯酰胺（Bis，交联剂）→ （APS, TEMED）聚 丙烯酰胺 醋酸萘酯（酯酶水解） →水解产物（＋坚牢蓝）→显色 三、材料：鲫鱼（肝脏） 四、器材：注意移液枪的量程和用法、离心机的用法 五、实验试剂：边讲述便请同学自己检查台面上的试验试剂 六、步骤： 安装电泳槽（教师演示） → 制胶 → 样品制备 →上样前的准备→ 上样→ 电泳（黑板图示）→ 剥胶（演示） → 染色→ 保存 → 观察记录（黑板图 示） → 收拾台面 七、注意事项：样品尽量保持低温；离心要平衡；丙烯酰胺有毒；灌胶动作要迅 速以防聚合； 八、作业：完成实验报告，画图说明试验结果。 迁移常数：R=酶带中心与原点的距离/溴酚兰与原点的距离 两种生物的相同值=两种生物相同酶带数/（不同酶带数+相同酶带数）
试验四：鱼类DNA简易提取法教学方法：教师先用约30分钟的时间讲述实验的目的、原理、实验材料、器材、试剂、实验步骤、注意事项以及实验报告的要求等，重点或难点之处需要给学生做演示。然后学生自己动手实验，教师实时指导。教学学时：4学时一、目的：了解原理、掌握提取方法二、原理：缓冲液裂解细胞→蛋白酶K消化去蛋白→酚、氯仿抽提去蛋白→离心分层→乙醇沉淀DNA一→TE溶解DNA三、材料：大黄鱼（肝脏）四、器材：五、试剂：六、步骤：研磨样品（匀浆）→酚/氯仿抽提蛋白（750ul）→离心分层→重复抽提→氯仿/异戊醇抽提→离心→上清用95%乙醇沉淀→75%乙醇洗涤一→TE或ddH,0溶解（50-200ul）→收拾台面七、注意事项：样品要磨成匀浆：动作要轻柔：离心时要平衡：DNA干燥要适当八、完成试验报告，描述DNA提取过程中观察到的现象实验五DNA浓度测定与纯度鉴定教学方法：教师先用约30分钟的时间讲述实验的目的、原理、实验材料、器材、试剂、实验步骤、注意事项以及实验报告的要求等，重点或难点之处需要给学生做演示。然后学生自己动手实验，教师实时指导
试验四：鱼类 DNA 简易提取法 教学方法：教师先用约 30 分钟的时间讲述实验的目的、原理、实验材料、器材、 试剂、实验步骤、注意事项以及实验报告的要求等，重点或难点之处 需要给学生做演示。然后学生自己动手实验，教师实时指导。 教学学时：4 学时 一、目的：了解原理、掌握提取方法 二、原理： 缓冲液裂解细胞 → 蛋白酶 K 消化去蛋白 → 酚、氯仿抽提去蛋白→ 离心 分层→ 乙醇沉淀 DNA → TE 溶解 DNA 三、材料：大黄鱼（肝脏） 四、器材： 五、试剂： 六、步骤： 研磨样品（匀浆）→ 酚/氯仿抽提蛋白（750ul）→ 离心分层 →重复抽提→ 氯仿/异戊醇抽提 →离心→ 上清用 95％乙醇沉淀→ 75％乙醇洗涤 → TE 或 ddH2O 溶解（50－200ul）→收拾台面 七、注意事项： 样品要磨成匀浆；动作要轻柔；离心时要平衡；DNA 干燥要适当 八、 完成试验报告，描述 DNA 提取过程中观察到的现象 实验五 DNA 浓度测定与纯度鉴定 教学方法：教师先用约 30 分钟的时间讲述实验的目的、原理、实验材料、器材、 试剂、实验步骤、注意事项以及实验报告的要求等，重点或难点之处 需要给学生做演示。然后学生自己动手实验，教师实时指导