植物生物学实验指导书黄世玉张丽莉谢潮添编集美大学水产学院二〇〇九年一月
植物生物学实验指导书 黄世玉 张丽莉 谢潮添 编 集美大学水产学院 二〇〇九年一月
植物生物学实验指导目录实验一显微镜的使用及生物绘图实验二植物细胞的分裂及贮藏物质的观察9实验三植物组织的观察13实验四根尖分区和根的解剖结构与种子的解剖观察.18实验五茎的解剖结构、叶的形态及解剖结构、营养器官的变态.21实验六植物繁殖器官花、果实、种子形态观察.25实验七花粉与种子活力的测定:37实验八植物类群的野外生态观察39实验九植物标本的采集、制作和保存40实验十植物检索表的使用与编制.49实验十一51植物活死细胞鉴定实验十二植物组织的水势和渗透势.54.57实验十三植物根系活力的测定实验十四叶绿体色素的定量测定..59实验十五植物光合强度的测定(改良半叶法)63
植物生物学实验指导 目 录 实验一 显微镜的使用及生物绘图 . 1 实验二 植物细胞的分裂及贮藏物质的观察 . 9 实验三 植物组织的观察 . 13 实验四 根尖分区和根的解剖结构与种子的解剖观察 . 18 实验五 茎的解剖结构、叶的形态及解剖结构、营养器官的变态 . 21 实验六 植物繁殖器官花、果实、种子形态观察 . 25 实验七 花粉与种子活力的测定 . 37 实验八 植物类群的野外生态观察 . 39 实验九 植物标本的采集、制作和保存 . 40 实验十 植物检索表的使用与编制 . 49 实验十一 植物活死细胞鉴定 . 51 实验十二 植物组织的水势和渗透势 . 54 实验十三 植物根系活力的测定 . 57 实验十四 叶绿体色素的定量测定 . 59 实验十五 植物光合强度的测定(改良半叶法) . 63
植物生物学实验指导实验一显微镜的使用及生物绘图一、实验目的1、了解显微镜的构造和各部分作用,掌握显微镜的使用技术和保养措施;2、认识植物细胞的构造;3、学会简易装片、徒手切片和生物绘图方法:二、实验仪器、药品和用具显微镜、擦镜纸、镊子、小剪、载玻片、盖玻片、解剖针、表面血、吸水纸、碘液、清水。三、实验材料各种切片、洋葱鳞叶。四、实验方法步骤显微镜(Microscope)是观察微小物体用的光学仪器。至今已经有300多年的历史了。在工、农、商、学、医等各个科学领域都可以看到它的身影。在生物医学方面,显微镜主要用来观察眼睛不能直接看见的组织细胞和微生物,故常将其称为生物显微镜。它是生物学研究、医学检验最常用的仪器之一。按照显微镜原理和结构的不同,可将其分为光学显微镜、非光学显微镜和光电结合型显微镜三类:1、光学显微镜:其特征之一是由光学透镜制成。这是使用量最大的一种显微镜。如手术显微镜、裂隙灯显微镜、生物显微镜等。2、非光学显微镜:它采用电子技术制成。如电子显微镜等。3、光电结合显微镜:它是光学和电子技术如录象技术、电视技术等相结合的产物。如摄影显微镜、电视显微镜等。就生物显微镜而言,根据用途不同又可分为普通型、特种型和高级型三类:1、普通型用于一般的观察和研究。2、特种型用作特种观察或在特定条件下使用:如暗视场显微镜用于观察细菌和螺旋体的运动;倒置显微镜用于细胞培养、组织培养和微生物的研究;相差显微镜用于观察无色透明的标本;荧光显微镜利用标本发出的荧光来观察物体;投影显微镜可将物像投影在投影屏上,供几个人同时观察;立体显微镜可用来观察物体的立体像等。3、高级型主要用在研究场合。如万能显微镜,变换了附件后,除了能满足普通用途外,还可以满足上述诸多特殊用途。(一)显微镜的基本结构1
植物生物学实验指导 1 实验一 显微镜的使用及生物绘图 一、实验目的 1、了解显微镜的构造和各部分作用,掌握显微镜的使用技术和保养措施; 2、认识植物细胞的构造; 3、学会简易装片、徒手切片和生物绘图方法; 二、实验仪器、药品和用具 显微镜、擦镜纸、镊子、小剪、载玻片、盖玻片、解剖针、表面皿、吸水纸、碘液、 清水。 三、实验材料 各种切片、洋葱鳞叶。 四、实验方法步骤 显微镜(Microscope)是观察微小物体用的光学仪器。至今已经有 300 多年的历史 了。在工、农 、商、学、医等各个科学领域都可以看到它的身影。在生物医学方面, 显微镜主要用来观察眼睛不能直接看见的组织细胞和微生物,故常将其称为生物显微 镜。它是生物学研究、医学检验最常用的仪器之一。按照显微镜原理和结构的不同,可 将其分为光学显微镜、非光学显微镜和光电结合型显微镜三类: 1、光学显微镜:其特征之一是由光学透镜制成。这是使用量最大的一种显微镜。 如手术显微镜、裂隙灯显微镜、生物显微镜等。 2、非光学显微镜:它采用电子技术制成。如电子显微镜等。 3、光电结合显微镜:它是光学和电子技术如录象技术、电视技术等相结合的产物。 如摄影显微镜、电视显微镜等。 就生物显微镜而言,根据用途不同又可分为普通型、特种型和高级型三类: 1、普通型用于一般的观察和研究。 2、特种型用作特种观察或在特定条件下使用:如暗视场显微镜用于观察细菌和螺 旋体的运动;倒置显微镜用于细胞培养、组织培养和微生物的研究;相差显微镜用于观 察无色透明的标本;荧光显微镜利用标本发出的荧光来观察物体;投影显微镜可将物像 投影在投影屏上,供几个人同时观察;立体显微镜可用来观察物体的立体像等。 3、高级型主要用在研究场合。如万能显微镜,变换了附件后,除了能满足普通用 途外,还可以满足上述诸多特殊用途。 (一)显微镜的基本结构
植物生物学实验指导显微镜构造很复杂,种类很多,但基本结构一般由机械部分和光学部分组成,1、机械部分:它是为光学部分服务的部件,包括以下几部分:(1)镜座:显微镜最下面的基部为镜座,起稳定和支持显微镜作用。镜座内装有光源,侧部有光源亮度调节手轮和电源开关。(2)镜臂:直立于镜座上的部分,支持显微镜的其它部分。(3)载物台:自镜臂中部向前伸出,放置标本用的平台,其中央有一个圆孔,叫通光孔。台上有玻片夹,用于固定标本;载物台下侧面有载物台调节手轮,用以移动标本。(4)镜筒:和镜臂上方连接的圆筒部分。一般长度是160一170毫米。镜筒上端装有目镜筒,用于装目镜;下端有一个可转动的圆盘,叫物镜转换器(或叫物镜旋转盘),其上装有2一4个物镜。(5)调节器(也叫调节螺旋):为镜臂上可转动的手轮,能使载物台上下移动,调节焦距。外侧大的手轮为粗调手轮,升降载物台较快,用于低倍镜对焦;内侧小的为微调手轮,升降载物台较慢,用于高倍镜对焦。(6)聚光镜孔径光栏和聚光镜升降调节手轮。2、光学部分:由接目镜、接物镜、光源、聚光器等四部件组成。(1)接目镜:装于镜筒上方,由两组透镜构成,接目镜的作用是把接物镜所形成的倒立实像再放大成为一个虚像。(2)接物镜:装在镜筒下端物镜转换器的孔中,一般的显微镜有2~4个接物镜镜头:每个镜头都是由一系列的复式透镜组成的,其上也有放大倍数记号,有4×,10×,40×及100×。4×及10×接物镜是低倍镜,40×是高倍镜,100×是油镜。低倍镜常用于搜索观察对象及观察标本全貌,高倍镜则用于观察标本某部分或较细微的结构,油镜则常用于观察微生物或动植物更细微的结构。(3)聚光镜:位于载物台(通光孔)下方,由两块或数块镜组成,它能将光线集中以射入接物镜和接目镜,有的聚光器可升降,便于调光,集光器下有一可伸缩的园形光圈,叫孔径光阑。用光阑杆调节该光栏的大小,以调节光线强弱。(4)光源和光源集光镜:通过集光镜将光源的像投射到聚光镜孔径光阑的平面。(二)显微镜的使用方法:1、灯光照明:首先把显微镜放在自己左肩一侧台前,镜座距桌边约两寸,镜臂朝内,镜筒朝外。用手转动物镜转换器,使低倍接物镜和镜筒成一直线,正对通光孔。用左眼从接目镜向下注视,打开光源,调节亮度控制手轮,直到获得所需亮度。2
植物生物学实验指导 2 显微镜构造很复杂,种类很多,但基本结构一般由机械部分和光学部分组成。 1、机械部分:它是为光学部分服务的部件,包括以下几部分: ⑴ 镜座:显微镜最下面的基部为镜座,起稳定和支持显微镜作用。镜座内装有光 源,侧部有光源亮度调节手轮和电源开关。 ⑵ 镜臂:直立于镜座上的部分,支持显微镜的其它部分。 ⑶ 载物台:自镜臂中部向前伸出,放置标本用的平台,其中央有一个圆孔,叫通 光孔。台上有玻片夹,用于固定标本;载物台下侧面有载物台调节手轮,用以移动标本。 ⑷ 镜筒:和镜臂上方连接的圆筒部分。一般长度是160-170毫米。镜筒上 端装有目镜筒,用于装目镜;下端有一个可转动的圆盘,叫物镜转换器(或叫物镜旋转 盘),其上装有2-4个物镜。 ⑸ 调节器(也叫调节螺旋):为镜臂上可转动的手轮,能使载物台上下移动,调节 焦距。外侧大的手轮为粗调手轮,升降载物台较快,用于低倍镜对焦;内侧小的为微调 手轮,升降载物台较慢,用于高倍镜对焦。 ⑹ 聚光镜孔径光栏和聚光镜升降调节手轮。 2、光学部分:由接目镜、接物镜、光源、聚光器等四部件组成。 ⑴ 接目镜:装于镜筒上方,由两组透镜构成,接目镜的作用是把接物镜所形成的 倒立实像再放大成为一个虚像。 ⑵ 接物镜:装在镜筒下端物镜转换器的孔中,一般的显微镜有 2~4 个接物镜镜头, 每个镜头都是由一系列的复式透镜组成的,其上也有放大倍数记号,有 4×,10×,40 ×及 100×。4×及 10×接物镜是低倍镜,40×是高倍镜,100×是油镜。低倍镜常用 于搜索观察对象及观察标本全貌,高倍镜则用于观察标本某部分或较细微的结构,油镜 则常用于观察微生物或动植物更细微的结构。 ⑶ 聚光镜:位于载物台(通光孔)下方,由两块或数块镜组成,它能将光线集中 以射入接物镜和接目镜,有的聚光器可升降,便于调光,集光器下有一可伸缩的园形光 圈,叫孔径光阑。用光阑杆调节该光栏的大小,以调节光线强弱。 ⑷ 光源和光源集光镜:通过集光镜将光源的像投射到聚光镜孔径光阑的平面。 (二)显微镜的使用方法: 1、灯光照明: 首先把显微镜放在自己左肩一侧台前,镜座距桌边约两寸,镜臂朝内,镜筒朝外。 用手转动物镜转换器,使低倍接物镜和镜筒成一直线,正对通光孔。用左眼从接目镜向 下注视,打开光源,调节亮度控制手轮,直到获得所需亮度
植物生物学实验指导2、标本安放,低倍对焦:将要观察的玻片标本放在载物台通光孔的中央,玻片夹夹紧。用10×物镜对焦,旋转粗调节器,把载物台徐徐升到接物镜头差不多接近玻片标本(约半厘米)为止。在旋转粗调节器直到发现物象,观察清晰为止。如果观察部分不在视野中心,可移动玻片标本到视野中心,再上下转动粗调节器至物象清晰为止。3、瞳距的调节:通过向内或向外滑动镜筒盖版,使左、右目镜中的图象合并成一。4、筒长和视度调节:(1)读取瞳距数,旋转目镜视度调节圈,使调节圈上与瞳距数相同数值的刻线与目镜筒上的刻线对齐(左、右目同步调),此时是标准筒长位置。(2)将转换器旋至40×物镜,调节调焦手轮,对标本准确调焦。(3)转换至40X物镜,不动调焦手轮,旋转调节圈,使每个目镜中的图象分别清晰。(若上述调节效果不佳,可重复上述步骤。通过补偿使用者左、右眼视度的视度调节,修正了显微镜的筒长。这能使用户充分利用高品质物镜的优点,包括齐焦)5、视场调中心(适用于带视场光栏的集光镜):将视场光栏关至最小孔径:上下移动聚光镜把视场光栏象对焦到标本面上;调节聚光镜支架上的螺钉使聚光镜孔径光栏中心与聚光镜视场光栏中心重合。6、物镜的选择:转动物镜转换器,使所需物镜进入光路,并准确定位。7、孔径光栏的调节:通常,当孔径光栏开启到物镜出瞳的70-80%时,就可以得到有足够对比度的良好图象,欲观察光栏图象,可取下目镜,从空目镜筒中往下看物镜的出瞳。(这种光栏是为数值孔径的调节而设计的,不作亮度调节用。)8、视场光栏的调节(仅适用于带视场光栏的集光镜):调节视场光栏的大小,使之与目镜视场边缘外切.(如果开得过大,则额外的光线将进入视场,从而减弱图象的衬度,影响象质。)9、高倍镜观察:需观察更细微的结构,则需要用高倍镜观察,首先要把观察的部分移至视野中心,然后移动物镜转换器换上高倍镜,再用粗调节器徐徐将载物台距离调整,至视野中出现物象,然后用细调节器调节到看清物象止。如光线太弱,可调节孔径光栏。高倍镜下观察的标本,如果放大倍数还不够,可用油镜,换用前,同样要先在高倍镜下观察,把要观察的部分放在视野的正中央。观察到清晰的物象之后,在盖玻片上表3
植物生物学实验指导 3 2、标本安放,低倍对焦: 将要观察的玻片标本放在载物台通光孔的中央,玻片夹夹紧。用 10×物镜对焦,旋 转粗调节器,把载物台徐徐升到接物镜头差不多接近玻片标本(约半厘米)为止。在旋 转粗调节器直到发现物象,观察清晰为止。如果观察部分不在视野中心,可移动玻片标 本到视野中心,再上下转动粗调节器至物象清晰为止。 3、瞳距的调节: 通过向内或向外滑动镜筒盖版,使左、右目镜中的图象合并成一。 4、筒长和视度调节: (1)读取瞳距数,旋转目镜视度调节圈,使调节圈上与瞳距数相同数值的刻线与 目镜筒上的刻线对齐(左、右目同步调),此时是标准筒长位置。 (2)将转换器旋至 40×物镜,调节调焦手轮,对标本准确调焦。 (3)转换至 40×物镜,不动调焦手轮,旋转调节圈,使每个目镜中的图象分别清 晰。(若上述调节效果不佳,可重复上述步骤。通过补偿使用者左、右眼视度的视度调 节,修正了显微镜的筒长。这能使用户充分利用高品质物镜的优点,包括齐焦) 5、视场调中心(适用于带视场光栏的集光镜): 将视场光栏关至最小孔径;上下移动聚光镜把视场光栏象对焦到标本面上;调节聚 光镜支架上的螺钉使聚光镜孔径光栏中心与聚光镜视场光栏中心重合。 6、物镜的选择:转动物镜转换器,使所需物镜进入光路,并准确定位。 7、孔径光栏的调节: 通常,当孔径光栏开启到物镜出瞳的 70-80%时,就可以得到有足够对比度的良好图 象,欲观察光栏图象,可取下目镜,从空目镜筒中往下看物镜的出瞳。(这种光栏是为 数值孔径的调节而设计的,不作亮度调节用。) 8、视场光栏的调节(仅适用于带视场光栏的集光镜): 调节视场光栏的大小,使之与目镜视场边缘外切.(如果开得过大,则额外的光线将进 入视场,从而减弱图象的衬度,影响象质。) 9、高倍镜观察: 需观察更细微的结构,则需要用高倍镜观察,首先要把观察的部分移至视野中心, 然后移动物镜转换器换上高倍镜,再用粗调节器徐徐将载物台距离调整,至视野中出现 物象,然后用细调节器调节到看清物象止。如光线太弱,可调节孔径光栏。 高倍镜下观察的标本,如果放大倍数还不够,可用油镜,换用前,同样要先在高倍 镜下观察,把要观察的部分放在视野的正中央。观察到清晰的物象之后,在盖玻片上表