（1）样品的无菌处理 ◼ 以无菌操作，将检样25g（或25ml）剪碎 以后，放于含有225ml灭菌生理盐水或其他 稀释液的灭菌玻璃瓶内（瓶内预先置适当 数量的玻璃珠）或灭菌乳钵内，经充分振 摇或研磨做成1：10的均匀稀释液。 ◼ 固体检样在加入稀释液后，最好置灭菌均 质器中以8000r/min~100000r/min的速度 处理1min，做成1：10的均匀稀释液
（1）样品的无菌处理 ◼ 以无菌操作，将检样25g（或25ml）剪碎 以后，放于含有225ml灭菌生理盐水或其他 稀释液的灭菌玻璃瓶内（瓶内预先置适当 数量的玻璃珠）或灭菌乳钵内，经充分振 摇或研磨做成1：10的均匀稀释液。 ◼ 固体检样在加入稀释液后，最好置灭菌均 质器中以8000r/min~100000r/min的速度 处理1min，做成1：10的均匀稀释液
（2）稀释、接种 用1ml灭菌吸管吸取 1：10稀释液1ml， 沿管壁徐徐注入含有 9ml灭菌生理盐水或 其 他稀释 的试管 内 （注意吸管尖端不要 触及管内稀释液，下 同），振摇试管混合 均匀，做成1：100 的稀释液
（2）稀释、接种 用1ml灭菌吸管吸取 1：10稀释液1ml， 沿管壁徐徐注入含有 9ml灭菌生理盐水或 其 他稀释 的试管 内 （注意吸管尖端不要 触及管内稀释液，下 同），振摇试管混合 均匀，做成1：100 的稀释液
琼脂培养基配方 ◼ 蛋白胨 10 g ◼ 牛肉膏 3 g ◼ 氯化钠 5g ◼ 琼脂 15-20g ◼ 蒸馏水 1000ml
琼脂培养基配方 ◼ 蛋白胨 10 g ◼ 牛肉膏 3 g ◼ 氯化钠 5g ◼ 琼脂 15-20g ◼ 蒸馏水 1000ml
◼ 根据食品卫生标准要求或对检样污染情况的估计， 选择2~3个适宜稀释度，分别在作10倍递增稀释 的同时，即以吸取该稀释度的吸管移1ml稀释液 于灭菌平皿内，每个稀释度作两个平皿。 ◼ 稀释液移入平皿后，应及时将凉至46℃营养琼脂 培养基[可放置在（（46±1）0C）水浴锅内保温] 注入平皿15ml，并转动平皿使混合均匀，同时将 营养琼脂培养基倾入加有1ml稀释液（不含样品） 的灭菌平皿内作空白对照。 ◼ 等琼脂凝固后，翻转平板，置（36±1）0C恒温 箱内培养（48±2）h取出，计算平板内菌落数目 乘以倍数，即得1g（1mL）样品所含菌落总数
◼ 根据食品卫生标准要求或对检样污染情况的估计， 选择2~3个适宜稀释度，分别在作10倍递增稀释 的同时，即以吸取该稀释度的吸管移1ml稀释液 于灭菌平皿内，每个稀释度作两个平皿。 ◼ 稀释液移入平皿后，应及时将凉至46℃营养琼脂 培养基[可放置在（（46±1）0C）水浴锅内保温] 注入平皿15ml，并转动平皿使混合均匀，同时将 营养琼脂培养基倾入加有1ml稀释液（不含样品） 的灭菌平皿内作空白对照。 ◼ 等琼脂凝固后，翻转平板，置（36±1）0C恒温 箱内培养（48±2）h取出，计算平板内菌落数目 乘以倍数，即得1g（1mL）样品所含菌落总数