基因操作 第一节重组DNA技术 Cel Re5tt9a5C3gn沿e (recombinant DNA → technique) Nucleus STEP 1:A restriction enzyme is used to cut a specific DNA strand DNA克隆(DNA cloning) from the DNA of a cell. Original DNA Strand DNA Ligase 分子杂交(molecular hybridization) Viral DNA Virus
基因操作 第一节重组DNA技术 (recombinant DNA technique) •DNA克隆 (DNA cloning) •分子杂交(molecular hybridization)
(一)限制性内切核酸酶Restrictionenzymes 限制性内切核酸酶又称限制酶。限制酶是从核酸分子内部切割（水 解断裂)磷酸二醋键生成DNA片段的一种内切酶。 EcoR 1 from E.coli GAATTC PALINDROME AAGCTT Hind IⅡfom coak Haemophilus influenza
(一)限制性内切核酸酶Restriction enzymes 限制性内切核酸酶又称限制酶。限制酶是从核酸分子内部切割(水 解断裂)磷酸二醋键生成DNA片段的一种内切酶。 EcoR 1 from E.coli G A A T T C C T T A A G PALINDROME A A G C T T Hind III from T T C G A A Haemophilus influenza
Action of Restriction enzymes (Form restriction fragments) EcoR 1 from E.coli GAATTC A AATTC CTTAA G Sticky ends
Action of Restriction enzymes (Form restriction fragments) EcoR 1 from E.coli G A A T T C C T T A A G A A T T C C T T A A G G Sticky ends
Haellli酶的识别序列： 5--GG 'CC--3 3'--CC↑GG--5 酶切位点在GC之间，产生的片段为平末端。 5'--GG CC--3' 3'--CC GG--5
•HaeⅢ酶的识别序列： 5' GG CC 3' 3' CC GG 5' •酶切位点在GC之间，产生的片段为平末端。 5 ' GG CC 3' 3 ' CC GG 5
pstI酶的识别的序列： 5'-CTGCAG一-3 3--GACGTC--5 酶切位点在AG之间，不在对称轴上，产生 的片段则为粘性末端。 5CTGCA G一一3 3一一G ACGTC5
•pst I酶的识别的序列： 5 ' CTGCAG 3' 3' GACGTC 5' •酶切位点在AG之间，不在对称轴上，产生 的片段则为粘性末端。 5 ' CTGCA G 3' 3' G ACGTC 5