（三） V-P试验 1、原理：某些细菌能分解葡萄糖产生丙酮 酸，丙酮酸经缩合、脱羧生成乙酰甲基甲 醇，后者在强碱环境下，被空气中的氧氧 化为双乙酰，在α-萘酚和肌酸的催化作用 下，双乙酰与蛋白胨中的胍基生成红色化 合物，称V－P（+）反应
（三） V-P试验 1、原理：某些细菌能分解葡萄糖产生丙酮 酸，丙酮酸经缩合、脱羧生成乙酰甲基甲 醇，后者在强碱环境下，被空气中的氧氧 化为双乙酰，在α-萘酚和肌酸的催化作用 下，双乙酰与蛋白胨中的胍基生成红色化 合物，称V－P（+）反应
2、试验方法 （1）奥梅拉（O’Meara）法 （2）贝立脱（Barritt）氏法 （3）快速法
2、试验方法 （1）奥梅拉（O’Meara）法 （2）贝立脱（Barritt）氏法 （3）快速法
（１）奥梅拉法： 将试验菌接种于磷酸盐葡萄糖蛋白 胨水培养基，于36±1 ℃培养48h， 每 1ml培养液加奥梅拉O’Meara试剂0.1ml， 摇动试管1~2min，静置于37℃恒温箱 4h ，或在48~50 ℃水浴放置2h后判定 结果
（１）奥梅拉法： 将试验菌接种于磷酸盐葡萄糖蛋白 胨水培养基，于36±1 ℃培养48h， 每 1ml培养液加奥梅拉O’Meara试剂0.1ml， 摇动试管1~2min，静置于37℃恒温箱 4h ，或在48~50 ℃水浴放置2h后判定 结果
（2）贝立脱法： 将试验菌接种于磷酸盐葡萄糖蛋白胨水 培养基，于36±1℃培养2天，每2ml培养液 先加入6%a-萘酚纯酒精溶液1ml，再加40% 氢氧化钾水溶液0.4ml，摇动2~5min，阳性 菌常立即呈现红色，若无红色出现，静置于 室温或36±1 ℃培养 4h ，如显现红色为阳 性，呈黄色或有类似铜色者，可判定为阴性
（2）贝立脱法： 将试验菌接种于磷酸盐葡萄糖蛋白胨水 培养基，于36±1℃培养2天，每2ml培养液 先加入6%a-萘酚纯酒精溶液1ml，再加40% 氢氧化钾水溶液0.4ml，摇动2~5min，阳性 菌常立即呈现红色，若无红色出现，静置于 室温或36±1 ℃培养 4h ，如显现红色为阳 性，呈黄色或有类似铜色者，可判定为阴性
（3）快速法： 将0.5%肌酸溶液2滴放于小试管中， 挑取产酸反应的三糖铁琼脂斜面培养 物一接种环，乳化接种于其中，加入 5%α-萘酚3滴，40%氢氧化钠水溶液2 滴，振动后放置5min，判定结果。不 产酸的培养物不能使用
（3）快速法： 将0.5%肌酸溶液2滴放于小试管中， 挑取产酸反应的三糖铁琼脂斜面培养 物一接种环，乳化接种于其中，加入 5%α-萘酚3滴，40%氢氧化钠水溶液2 滴，振动后放置5min，判定结果。不 产酸的培养物不能使用