16.1 盐析沉淀 定义 蛋白质在高离子强度的溶液中溶解度降低、 发生沉淀的现象称为盐析。 原理 1.高浓度盐离子使蛋白质表面双电层厚度降 低,静电排斥作用减弱. 2.中性盐比蛋白质具更强的亲水性,因此将 与蛋白质争夺水分子
16.1 盐析沉淀 定义 蛋白质在高离子强度的溶液中溶解度降低、 发生沉淀的现象称为盐析。 原理 1.高浓度盐离子使蛋白质表面双电层厚度降 低,静电排斥作用减弱. 2.中性盐比蛋白质具更强的亲水性,因此将 与蛋白质争夺水分子
16.1.1 Cohn 经验方程 lgS=β-Ks I S:蛋白质的溶解度,g/L I:离子强度 Ks:盐析常数,斜率,与温度 和pH无关,与盐和蛋白质的种 类有关。 β : 常数,截距,与盐的种类无关, 与温度和pH蛋白质种类有关
16.1.1 Cohn 经验方程 lgS=β-Ks I S:蛋白质的溶解度,g/L I:离子强度 Ks:盐析常数,斜率,与温度 和pH无关,与盐和蛋白质的种 类有关。 β : 常数,截距,与盐的种类无关, 与温度和pH蛋白质种类有关
盐析用盐要求 盐析作用强 该盐有足够大的溶解度,适于低温操作 生物惰性 密度小 来源丰富
盐析用盐要求 盐析作用强 该盐有足够大的溶解度,适于低温操作 生物惰性 密度小 来源丰富
16.1.2 盐析的影响因素 蛋白质的种类 蛋白质的种类不同,Ks值会有所不同; 分子量越大,沉淀所需盐的量越少; 蛋白质分子不对称性越大,越容易沉淀
16.1.2 盐析的影响因素 蛋白质的种类 蛋白质的种类不同,Ks值会有所不同; 分子量越大,沉淀所需盐的量越少; 蛋白质分子不对称性越大,越容易沉淀
蛋白质的初始浓度 不同浓度的蛋白质溶液产生沉淀所要求的临 界盐浓度不同。 蛋白质浓度大时,中性盐的极限沉淀浓度低, 共沉作用强,分辨率低,但用盐量减少、蛋 白质的溶解损失小。 相反,蛋白质浓度低时,中性盐的极限沉淀 浓度高,共沉作用小,分辨率高,但用盐量 增大、蛋白质的回收率低
蛋白质的初始浓度 不同浓度的蛋白质溶液产生沉淀所要求的临 界盐浓度不同。 蛋白质浓度大时,中性盐的极限沉淀浓度低, 共沉作用强,分辨率低,但用盐量减少、蛋 白质的溶解损失小。 相反,蛋白质浓度低时,中性盐的极限沉淀 浓度高,共沉作用小,分辨率高,但用盐量 增大、蛋白质的回收率低