• ★技术要求:样品充分混匀,操作熟练快速 (15~20min完成操作),严格无菌操作; • ★注意事项:每一支吸管只能用于一个稀释 度,样品混匀处理,倾注平板时的培养基温 度; • ★适用范围:中温、好氧和兼性厌氧、能在 营养琼脂上生长的微生物, • ★误差:多次稀释造成的误差是主要来源, 其次还有由于样品内菌体分布不均匀、以及 不当操作
• ★技术要求:样品充分混匀,操作熟练快速 (15~20min完成操作),严格无菌操作; • ★注意事项:每一支吸管只能用于一个稀释 度,样品混匀处理,倾注平板时的培养基温 度; • ★适用范围:中温、好氧和兼性厌氧、能在 营养琼脂上生长的微生物, • ★误差:多次稀释造成的误差是主要来源, 其次还有由于样品内菌体分布不均匀、以及 不当操作
(二)血球计数板法
(二)血球计数板法
• 原理:将1cm2×0.1mm的薄层空间划分为400 小格,从中均匀分布地选取80或100小格,计 数其中的细胞数目,换算成单位体积中的细 胞数。 • 适用范围:个体较大细胞或颗粒,如血球、 酵母菌等。不适用于细菌等个体较小的细胞, 因为(1)细菌细胞太小,不易沉降;(2) 在油镜下看不清网格线,超出油镜工作距离。 • 特点:简便、直接、快速、准确,对酵母菌 可同时测定出芽率,或在菌悬液中加入少量 美蓝可以区分死活细胞
• 原理:将1cm2×0.1mm的薄层空间划分为400 小格,从中均匀分布地选取80或100小格,计 数其中的细胞数目,换算成单位体积中的细 胞数。 • 适用范围:个体较大细胞或颗粒,如血球、 酵母菌等。不适用于细菌等个体较小的细胞, 因为(1)细菌细胞太小,不易沉降;(2) 在油镜下看不清网格线,超出油镜工作距离。 • 特点:简便、直接、快速、准确,对酵母菌 可同时测定出芽率,或在菌悬液中加入少量 美蓝可以区分死活细胞
(三)称干重 ⚫ 将一定量的菌液中的菌体通过离心法或 过滤法分离出来,然后烘干(干燥温度 可采用105℃、100℃或80℃)、称重。 一般干重为湿重的10%~20%,而一个 细菌细胞一般重约10-12~10-13g。 ⚫ 这种方法较适合于丝状微生物的生长量 的测定,对于细菌来说,一般在实验室 或生产实践中较少使用
(三)称干重 ⚫ 将一定量的菌液中的菌体通过离心法或 过滤法分离出来,然后烘干(干燥温度 可采用105℃、100℃或80℃)、称重。 一般干重为湿重的10%~20%,而一个 细菌细胞一般重约10-12~10-13g。 ⚫ 这种方法较适合于丝状微生物的生长量 的测定,对于细菌来说,一般在实验室 或生产实践中较少使用
(四)比浊法 • 原理是在一定范围内,菌悬液中的细胞 浓度与混浊度成正比,即与光密度成正 比,菌数越多,光密度越大。因此,借 助于分光光度计,在一定波长下测定菌 悬液的光密度,就可反应出菌液的浓度。 这种方法的特点是快速、简便;但易受 干扰
(四)比浊法 • 原理是在一定范围内,菌悬液中的细胞 浓度与混浊度成正比,即与光密度成正 比,菌数越多,光密度越大。因此,借 助于分光光度计,在一定波长下测定菌 悬液的光密度,就可反应出菌液的浓度。 这种方法的特点是快速、简便;但易受 干扰