《基因工程实验》 一、课程信息 中文 基因工程实哈 课程名称 英文 Experimental Technology of Genetic Engineering 1807103 果程性质 专业必修 基本信息 课程号 学分 实验上机学时32 开课学期 5 先修课程 生物化学 面向专业生物技术 目标1：通过基因工程实验课学习，培养学生基因操作的基本职业伦理 道德，并能在基因工程学习中自觉遵守基因操作规范。 课程目标 目标2： 通过实验技术操作，使学生能够基本掌握基因工程中常用实验 的操作方法，加深和巩固课堂讲授的基因工程理论知识。 目标3：培养探索精神。具备分析实验结果的能力，可以用基因工程的理 论知识和实验技术去从事相应的科研工作，分析和解决相关的问题。 考核方式 采用当场逐组/个考核和撰写实验报告相结合的方法，对学生的实验成绩作全面的评价。本 课程采用动手操作、实验报告分别综合评定学生成绩」 评分标准 每个实验，实际操作40%，实验报告60%：实验成绩分：优、良、中、及格、不及格五级 实验指导 编者，教材名称，版别，板次 自编[]统编[ 邱高峰，基因工程实验讲义，2016年版 自编[]统编 16
16 《基因工程实验》 一、课程信息 基本信息 课程名称 中文 基因工程实验 英文 Experimental Technology of Genetic Engineering 课程号 1807103 课程性质 专业必修 学分 1 实验/上机学时 32 开课学期 5 先修课程 生物化学 面向专业 生物技术 课程目标 目标 1： 通过基因工程实验课学习，培养学生基因操作的基本职业伦理 道德，并能在基因工程学习中自觉遵守基因操作规范。 目标 2： 通过实验技术操作，使学生能够基本掌握基因工程中常用实验 的操作方法，加深和巩固课堂讲授的基因工程理论知识。 目标 3： 培养探索精神。具备分析实验结果的能力,可以用基因工程的理 论知识和实验技术去从事相应的科研工作，分析和解决相关的问题。 考核方式 采用当场逐组/个考核和撰写实验报告相结合的方法，对学生的实验成绩作全面的评价。本 课程采用动手操作、实验报告分别综合评定学生成绩。 评分标准 每个实验，实际操作 40%，实验报告 60%。实验成绩分：优、良、中、及格、不及格五级。 实验指导 书 编者，教材名称，版别， 版次 自 编 [ ]统 编 [ ] 邱高峰，基因工程实验讲义，2016 年版 自 编 [√]统 编 [ ]
二、实验教学内容 对课程目标的支撞度 实验明 实验 目编 实验类型 实费 鲜组 实验目的 实验项目内容 标标标 基因 熟悉基因 801 光 程操作规范， 验证 4 8235 验 DNA A的 搅取 沼虹 809 质和 水婴 RNA 为主 有机 泳证 *r(S0uM) 10m 801 反转 验证 4 反 805 PCR 验证 4 扩增
17 二、实验教学内容 实验项 目编号 实验 项目 名称 学 时 实 验 类 型 实 验 要 求 每 组 人 数 实验目的 实验项目内容 对课程目标的支撑度 目标 1 目标 2 目标 3 80713 601 基因 工程 实验 规范 微量 移液 器的 使用 2 验 证 必 修 4 熟悉基因工 程操作规范， 掌握微量移 液器使用方 法。 学习基因工程操 作规范，不同量程 微量移液器使用 √ √ √ 80713 602 沼虾 总 DN A 的 提取 4 验 证 必 修 4 掌握动物基因 组DNA提取基 本原理及方 法。 采用细胞裂解液 裂解细胞，加入蛋 白酶 K 除去蛋白， 然后用氯仿抽提 DNA，最后用 RNA 酶处理，获 得基因组 DNA √ √ √ 80713 603 沼虾 总 RNA 提取 4 验 证 必 修 4 掌握动物组织 总RNA提取基 本原理及方 法。 利用 TRIZOL 试剂中异硫氰酸 胍裂解细胞，促使 核蛋白体的解离， 使 RNA 与蛋白质 分离，并将 RNA 释放到溶液中，加 入氯仿时，抽提酸 性的苯酚，而酸性 苯酚可促使 RNA 进入水相，离心后 可形成水相层和 有机层，这样RNA 与仍留在有机相 中的蛋白质和 DNA 分离开。水 相层（无色）主要 为 RNA，有机相 主要为 DNA 和蛋 白质。电泳验证提 取结果 √ √ √ 80713 604 mR NA 反转 录 2 验 证 必 修 4 掌握利用反转 录酶合成 cDNA 第一链 的方法 在总 RNA 溶液中 加入 Oligo dT Primer(50μM)、 dNTP Mixture(10mM each)、Rnase free dH2O。变性、退 火后反应液 5×PrimeScript Buffer、RNase Inhibitor(40U/μl)、 PrimeScript Rtase、 RNase Free dH2O √ √ √ 80713 605 PCR 扩增 4 验 证 必 修 4 掌握 PCR 体外 大量扩增 DNA 的方法。 模板：1μl，水： 15.8μl， Buffer：4μl， dNTP：2μl √ √ √