附录II培养基的配制一、牛肉膏蛋白陈培养基（培养细菌用）牛肉膏3g蛋白陈10gNaC15g琼脂15~20g水1000mlpH7. 0~7.21.05kg/cm，121.3℃灭菌20min。二、淀粉琼脂培养基（高氏1号培养基，培养放线菌用）20g可溶性淀粉KNO:1gNaC10. 5gK_HPO40. 5gMgSO,0. 5gFeSO,0.01g琼脂20g水1000mlpH7. 2~7. 4配制时，先用少量冷水，将淀粉调成糊状，倒入煮沸的水中，在火上加热，边搅拌边加如其他成分，溶化后，补足水分至1000ml。1.05kg/cm，121.3℃灭菌20min。三、查氏（Czapek）培养基（培养霉菌用)2gNaNOsK-HPO41gKC10. 5gMgSO0. 5gFeSO0. 01g燕糖30g琼脂15~20g145
145 附录Ⅱ 培养基的配制 一、牛肉膏蛋白胨培养基(培养细菌用) 牛肉膏 3g 蛋白胨 10g NaCl 5g 琼脂 15~20g 水 1000ml pH 7.0~7.2 1.05kg/cm2 ，121.3℃灭菌 20min。 二、淀粉琼脂培养基(高氏 1 号培养基，培养放线菌用) 可溶性淀粉 20g KNO3 1g NaCl 0.5g K2HPO4 0.5g MgSO4 0.5g FeSO4 0.01g 琼脂 20g 水 1000ml pH 7.2~7.4 配制时，先用少量冷水，将淀粉调成糊状，倒入煮沸的水中，在火上加热，边搅拌边加如其 他成分，溶化后，补足水分至 1000ml。1.05kg/cm2 ，121.3℃灭菌 20min。 三、查氏（Czapek）培养基(培养霉菌用) NaNO3 2g K2HPO4 1g KCl 0.5g MgSO4 0.5g FeSO4 0.01g 蔗糖 30g 琼脂 15~20g
水1000mlpH自然1.05kg/cm，121.3℃灭菌20min四、马丁氏（Martin）琼脂培养基（分离真菌用）葡萄糖10g蛋白陈5g1gKHEPO40. 5gMgSO,·7H0100ml1/3000孟加拉红（rosebengal，玫瑰红水溶液）琼脂15~20gpH自然蒸馏水800ml112℃灭菌30min。临用前加入0.03%链霉素稀释液100ml，使每毫升培养基中含链霉素30ug。五、马丁氏培养基（培养真菌用）0. 5gKeHPO.1g,MgSO,·7H0蛋白陈5g10g葡萄糖琼脂15~20g水1000mlpH自然六、麦芽汁琼脂培养基1.取大麦或小麦若干，用水洗净，浸水6~12h，置15℃阴暗处发芽，上盖纱布一块，每日早、中、晚淋水一次，麦根伸长至麦粒的两倍时，即停止发芽，摊开晒干或烘干，贮存备用。2.将干麦芽磨碎，一份麦芽加四份水，在65℃水浴锅中糖化3~4h，糖化程度可用碘滴定之。3.将糖化液用4~6层纱布过滤，滤液如混浊不清，可用鸡蛋白澄清，方法是将一个鸡蛋白加水约20ml，调匀至生泡沫时为止，然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。4.将滤液稀释到5~6波美度，pH约6.4，加入2%琼脂即成。121℃灭菌20min。七、无氮培养基（自生固氮菌、钾细菌）146
146 水 1000ml pH 自然 1.05kg/cm2 ,121.3℃灭菌 20min。 四、马丁氏(Martin)琼脂培养基(分离真菌用) 葡萄糖 10g 蛋白胨 5g KH2PO4 1g MgSO4·7H2O O.5g 1/3000 孟加拉红(rose bengal，玫瑰红水溶液) 100ml 琼脂 15~20g pH 自然 蒸馏水 800ml 112℃灭菌 30min。 临用前加入 0.03%链霉素稀释液 100ml，使每毫升培养基中含链霉素 30μg。 五、马丁氏培养基（培养真菌用） K2HPO41g，MgSO4·7H2O 0.5g 蛋白胨 5g 葡萄糖 10g 琼脂 15~20g 水 1000ml pH 自然 六、麦芽汁琼脂培养基 1．取大麦或小麦若干，用水洗净，浸水 6~12h，置 15℃阴暗处发芽，上盖纱布一块，每日 早、中、晚淋水一次，麦根伸长至麦粒的两倍时，即停止发芽，摊开晒干或烘干，贮存备用。 2．将干麦芽磨碎，一份麦芽加四份水，在 65℃水浴锅中糖化 3~4h，糖化程度可用碘滴定之。 3．将糖化液用 4~6 层纱布过滤，滤液如混浊不清，可用鸡蛋白澄清，方法是将一个鸡蛋白 加水约 20ml，调匀至生泡沫时为止，然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。 4．将滤液稀释到 5~6 波美度，pH 约 6.4，加入 2%琼脂即成。 121℃灭菌 20min。 七、无氮培养基（自生固氮菌、钾细菌）
甘露糖（或葡萄糖）10gKHPO0. 2gMgSO,·7H00. 2gNaC10. 2g0. 2gCaSO,·2H05gCaCO3蒸馏水1000mlpH7. 0~7. 2113℃灭菌20min。八、半固体肉膏蛋白陈培养基肉膏蛋白陈液体培养基100ml琼脂0.35~0. 4gpH7.6121℃灭菌20min九、合成培养基(NH) 2PO41gKC10.2gMgS047H00. 2g豆芽汁10ml琼脂20g蒸馏水1000mlpH7. 0加12m10.04%的溴甲酚紫（pH5.2~6.8，颜色由黄色变紫色，作指示剂）。121℃灭菌20min。十、豆芽汁蔗糖（或葡萄糖）培养基黄豆芽100g煎糖(或葡萄糖)50g水1000mlpH自然称新鲜豆芽100g，放入烧杯中，加水1000ml，煮沸约30min，用纱布过滤。用水补足原量，再加入煎糖（或葡萄糖）50g，煮沸溶化。121℃灭菌20min。147
147 甘露糖（或葡萄糖） 10g KH2PO4 0.2g MgSO4·7H2O 0.2g NaCl 0.2g CaSO4·2 H2O 0.2g CaCO3 5g 蒸馏水 1000ml pH 7.0~7.2 113℃灭菌 20min。 八、半固体肉膏蛋白胨培养基 肉膏蛋白胨液体培养基 100ml 琼脂 0.35~0.4g pH 7.6 121℃灭菌 20min。 九、合成培养基 (NH4)2PO4 1g KCl 0.2g MgSO4·7H2O 0.2g 豆芽汁 10ml 琼脂 20g 蒸馏水 1000ml pH 7.0 加 12ml0.04%的溴甲酚紫(pH5.2~6.8，颜色由黄色变紫色，作指示剂)。121℃灭菌 20min。 十、豆芽汁蔗糖(或葡萄糖)培养基 黄豆芽 100g 蔗糖(或葡萄糖) 50g 水 1000ml pH 自然 称新鲜豆芽 100g，放入烧杯中，加水 1000ml，煮沸约 30min，用纱布过滤。用水补足原量， 再加入蔗糖(或葡萄糖)50g，煮沸溶化。121℃灭菌 20min
十一、油脂培养基蛋白陈10g牛肉膏5g5gNaC1香油或花生油10g1ml1.6%中性红水溶液琼脂15~20g蒸馏水1000mlpH7. 2121℃灭菌20min。注：1.不能使用变质油。2.油和琼脂及水先加热。3．调好pH后，再加入中性红。4，分装时，需不断搅拌，使油均匀分布于培养基中。十二、淀粉培养基蛋白陈10gNaC15g牛肉膏5g2g可溶性淀粉蒸馏水1000ml琼脂15~20g121℃灭菌20min。十三、明胶培养基牛肉膏蛋白陈液100ml明胶12~18gpH7.2~7.4在水浴锅中将上述成分溶化，不断搅拌。溶化后调pH7.2~7.4。121℃灭菌30min。十四、蛋白水培养基蛋白陈10g148
148 十一、油脂培养基 蛋白胨 10g 牛肉膏 5g NaCl 5g 香油或花生油 10g 1.6%中性红水溶液 1ml 琼脂 15~20g 蒸馏水 1000ml pH 7.2 121℃灭菌 20min。 注：1．不能使用变质油。 2．油和琼脂及水先加热。 3．调好 pH 后，再加入中性红。 4．分装时，需不断搅拌，使油均匀分布于培养基中。 十二、淀粉培养基 蛋白胨 10g NaCl 5g 牛肉膏 5g 可溶性淀粉 2g 蒸馏水 1000ml 琼脂 15~20g 121℃灭菌 20min。 十三、明胶培养基 牛肉膏蛋白胨液 100ml 明胶 12~18g pH 7.2~7.4 在水浴锅中将上述成分溶化，不断搅拌。溶化后调 pH7.2~7.4。 121℃灭菌 30min。 十四、蛋白胨水培养基 蛋白胨 10g
NaC15g水1000mlpH7.6121℃灭菌20min十五、糖发酵培养基1000ml蛋白陈水培养基1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1~2mlpH7. 6另配20%糖溶液（葡萄糖、乳糖、蔗糖等）各10ml。制法：1.将上述含指示剂的蛋白陈水培养基（pH7.6)分装于试管中，在每管内放一倒置的小玻璃管（Durhamtube），使充满培养液。2.将已分装好的蛋白陈水和20%的各种糖溶液分别灭菌，蛋白陈水121℃灭菌20min；糖溶液112℃灭菌30min。3.灭菌后，每管以无菌操作分别加入20%的无菌糖溶液0.5m1（按每10ml培养基中加入20%的糖液0.5ml，则成1%的浓度）。配制用的试管必须洗干净，避免结果混乱。十六、葡萄糖蛋白陈水培养基蛋白陈5g葡萄糖5gKzHPO42g蒸馏水1000ml将上述各成分溶于1000ml水中，调pH7.0~7.2，过滤。分装试管，每管10ml，112℃灭菌30min。十七、麦氏（Meclary）琼脂（酵母菌）葡萄糖1gKC11. 8g2. 5g酵母浸膏醋酸钠8.2g琼脂15~20g149
149 NaCl 5g 水 1000ml pH 7.6 121℃灭菌 20min。 十五、糖发酵培养基 蛋白胨水培养基 1000ml 1.6%溴甲酚紫乙醇溶液 1~2ml pH 7.6 另配 20%糖溶液(葡萄糖、乳糖、蔗糖等)各 10ml。 制法： 1．将上述含指示剂的蛋白胨水培养基(pH7.6)分装于试管中，在每管内放一倒置的小玻璃管 （Durham tube），使充满培养液。 2．将已分装好的蛋白胨水和 20%的各种糖溶液分别灭菌，蛋白胨水 121℃灭菌 20min；糖溶 液 112℃灭菌 30min。 3．灭菌后，每管以无菌操作分别加入 20%的无菌糖溶液 0.5ml(按每 10ml 培养基中加入 20% 的糖液 0.5ml，则成 1%的浓度)。 配制用的试管必须洗干净，避免结果混乱。 十六、葡萄糖蛋白胨水培养基 蛋白胨 5g 葡萄糖 5g K2HPO4 2g 蒸馏水 1000ml 将上述各成分溶于 1000ml 水中，调 pH7.0~7.2，过滤。分装试管，每管 10ml， 112℃灭菌 30min。 十七、麦氏（Meclary）琼脂（酵母菌） 葡萄糖 1g KCl 1.8g 酵母浸膏 2.5g 醋酸钠 8.2g 琼脂 15~20g