第二节淋巴细胞的检测技术一.淋巴细胞的分离(一)外周血单个核细胞(淋巴细胞》90%)的分离密度梯度离心法稀释的去纤维全血稀释的血浆淋巴细胞00聚蔗糖离心(2000rpm,15min)泛影葡胺红细胞聚燕糖粒细胞泛影葡胺血小板(密度为1.077)
第二节 淋巴细胞的检测技术 一.淋巴细胞的分离 (一)外周血单个核细胞(淋巴细胞 > 90%)的分 离 密度梯度离心法 (密度为1.077) (2000rpm,15min)
二）淋巴细胞亚群的分离及鉴定1.E花环分离法：人T细胞（表达CD2,即E受体）十绵羊红细胞（SRBC)形成E花环密度梯度离心，花环细胞沉降于管底裂解SRBC获纯化T细胞
(二）淋巴细胞亚群的分离及鉴定 1.E花环分离法： 人T细胞(表达CD2，即E受体）＋绵羊红细 胞(SRBC) 形成E花环 密度梯度离 心，花环细胞沉降于管底 裂解SRBC 获纯化T细胞
T细胞亚群分离一花环试验EEEE人TE福E细胞EEE
T细胞亚群分离－花环试验
2.尼龙纤维分离法：单个核细胞通过尼龙纤维柱B细胞和单核细胞（粘附特性）T细胞（非粘附性）3.免疫荧光法：单个核细胞+抗CD3（或CD4，CD8)McAb+荧光素标记第二抗体荧光显微镜下鉴定CD3+T细胞、CD4+T细胞和CD8+T细胞
2.尼龙纤维分离法： 单个核细胞 通过尼龙纤维柱 B细胞和单核细胞(粘附特性) T细胞(非粘附性) 3.免疫荧光法： 单个核细胞 + 抗CD3(或CD4，CD8)McAb +荧光素标记第二抗体 荧光显微镜下鉴定 CD3+T细胞、CD4+T细胞和CD8+T细胞
fluoresceinantibodyCD3labelledanti-antibody