（6）0.01000mol/L碘酸钾标准储备液：精密称取干燥的碘酸钾（GR或AR级）0.214克，用蒸馏水溶解于100ml容量瓶中并定容至刻度。（7)0.0010mol/L碘酸钾标准应用液：取碘酸钾标准储备液10ml稀释至100ml。此液1.0ml相当于抗坏血酸0.088mg。(8））1%淀粉溶液：称取可溶性淀粉0.5g，加水1滴，搅拌成糊状以后倒入50ml沸水中，混匀，冷藏待用。（9）6%碘化钾溶液：称取碘化钾0.6g溶解于10ml蒸馏水中。临用前配置。（10）抗坏血酸溶液：称取纯抗坏血酸粉末20mg,用1%草酸溶解于100ml容量瓶中并稀释至刻度，摇匀。冷冷藏保存。（11）碳酸氢钠溶液：称取碳酸氢钠40.2mg，溶解在200ml沸水中。（12）2,6一二氯酚靛酚：称取2,6一二氯酚靛酚50mg溶解在上述碳酸氢钠热溶液中，冷后放冰箱中，过夜，次日过滤在250ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至至刻度，摇匀。贮于棕色瓶中，冷藏保存。（三）实验内容1、实验原理还原型抗坏血酸可将染料2,6一二氯酚靛酚还原。用标准碘酸钾溶液标定抗坏血酸溶液，然后以标定的抗坏血酸溶液标定2,6一二氯酚靛酚染料溶液，再用此染料滴定样品中的抗坏血酸。2,6一二氯酚靛酚在酸性溶液中呈红色，被还原后红色褪去。当被测溶液过量1滴染料时即显红色，以示终点。在无杂质干扰时，被测溶液还原染料的量与其中所含抗坏血酸浓度成正比。2、主要操作步骤（1）2,6一二氯酚靛酚溶液的标定1）抗坏血酸标准溶液的标定：吸取抗坏血酸溶液2ml于锥形瓶中，再加入1%草酸5ml、6%碘化钾溶液0.5ml、1%淀粉溶液2滴，再以0.0010mol/L碘酸钾标准液滴定至终点为淡蓝色。计算方法：抗坏血酸浓度（mg/ml)=消耗0.0010mol/L碘酸钾溶液ml数*0.088/所取抗坏血酸ml数2）2,6一二氯酚靛酚溶液的标定：吸取已标定过的抗坏血酸溶液5ml及1%草酸溶液5ml于锥形瓶中，以待标定的2,6一二氯酚靛酚溶液滴定至溶液呈淡红色，在15s内不褪色为止。1ml染料相当于抗坏血酸的mg数=抗坏血酸浓度（mg/ml）*抗坏血酸溶液的ml数/滴定消耗染料的ml数（2）样品测定（西红柿）1）取样品100g稍加切碎后置捣碎机中，加入等量的2%草酸溶液，制成匀浆。2）称取10g匀浆于小烧杯中，小心地以1%草酸将样品洗入100ml量筒内，稀释至刻度，摇匀，静止。3）取上层液滤过。吸取滤液5ml于锥形瓶中，以标定过的2,6一二氯酚靛酚溶液滴定至溶液呈淡红色，15s内不褪色为止。4）用蒸馏水作空白滴定，如染料浓度过高，应适当稀释。3、结果计算还原型抗坏血酸（mg/100g）=（V1一V2）*T*100W式中：
（6） 0.01000mol/L 碘酸钾标准储备液：精密称取干燥的碘酸钾（GR 或 AR 级） 0.214 克，用蒸馏水溶解于 100ml 容量瓶中并定容至刻度。 （7） 0.0010mol/L 碘酸钾标准应用液：取碘酸钾标准储备液 10ml稀释至 100ml。 此液 1.0ml 相当于抗坏血酸 0.088mg。 （8） 1％淀粉溶液：称取可溶性淀粉 0.5g，加水 1 滴，搅拌成糊状以后倒入 50ml 沸水中，混匀，冷藏待用。 （9） 6％碘化钾溶液：称取碘化钾 0.6g 溶解于 10ml 蒸馏水中。临用前配置。 （10）抗坏血酸溶液：称取纯抗坏血酸粉末 20mg,用 1％草酸溶解于 100ml 容量 瓶中并稀释至刻度，摇匀。冷冷藏保存。 （11）碳酸氢钠溶液：称取碳酸氢钠 40.2mg，溶解在 200ml 沸水中。 （12）2,6—二氯酚靛酚：称取 2,6—二氯酚靛酚 50mg 溶解在上述碳酸氢钠热溶 液中，冷后放冰箱中，过夜，次日过滤在 250ml 容量瓶中，用蒸馏水稀释 至至刻度，摇匀。贮于棕色瓶中，冷藏保存。 （三）实验内容 1、实验原理 还原型抗坏血酸可将染料 2,6—二氯酚靛酚还原。用标准碘酸钾溶液标定抗 坏血酸溶液，然后以标定的抗坏血酸溶液标定 2,6—二氯酚靛酚染料溶液，再用 此染料滴定样品中的抗坏血酸。2,6—二氯酚靛酚在酸性溶液中呈红色，被还原 后红色褪去。当被测溶液过量 1 滴染料时即显红色，以示终点。在无杂质干扰时， 被测溶液还原染料的量与其中所含抗坏血酸浓度成正比。 2、主要操作步骤 （1）2,6—二氯酚靛酚溶液的标定 1）抗坏血酸标准溶液的标定：吸取抗坏血酸溶液 2ml 于锥形瓶中，再加 入 1％草酸 5ml、6％碘化钾溶液 0.5ml、1％淀粉溶液 2 滴，再以 0.0010mol/L 碘 酸钾标准液滴定至终点为淡蓝色。 计算方法：抗坏血酸浓度（mg/ml）=消耗 0.0010mol/L 碘酸钾溶液 ml数*0.088/ 所取抗坏血酸 ml 数 2）2,6—二氯酚靛酚溶液的标定：吸取已标定过的抗坏血酸溶液 5ml 及 1％ 草酸溶液 5ml 于锥形瓶中，以待标定的 2,6—二氯酚靛酚溶液滴定至溶液呈淡红 色，在 15s 内不褪色为止。 1ml 染料相当于抗坏血酸的 mg 数=抗坏血酸浓度（mg/ml）*抗坏血酸溶液的 ml 数∕滴定消耗染料的 ml 数 （2）样品测定（西红柿） 1）取样品 100g 稍加切碎后置捣碎机中，加入等量的 2％草酸溶液，制成 匀浆。 2）称取 10g 匀浆于小烧杯中，小心地以 1％草酸将样品洗入 100ml 量筒内， 稀释至刻度，摇匀，静止。 3）取上层液滤过。吸取滤液 5ml 于锥形瓶中，以标定过的 2,6—二氯酚靛 酚溶液滴定至溶液呈淡红色，15s 内不褪色为止。 4）用蒸馏水作空白滴定，如染料浓度过高，应适当稀释。 3、结果计算 还原型抗坏血酸（mg/100g）=（V1—V2）*T*100∕W 式中：
V1一样品滴定时所用染料量，mlV2一空白滴定时所用的染料量，mlW一滴定时所用样品稀释液中含样品的量，gT1ml染料相当于抗坏血酸mg数名称WViV2还原型抗坏血酸含量次数12均值结果与分析：4、注意事项（1）操作过程要迅速，因还原型抗坏血酸易被氧化，一般一般不超过2min。（2）生食物匀浆在量筒内振摇可能会产生泡沫，加数滴异戊醇可除去。（3）如样品有色应把样品上层液20ml导入锥形瓶中，加入一勺白陶土，振摇数次，使充分脱色。静止后在取上层液测定。同时，取一锥形瓶，加入1%草酸20ml，加入一勺白陶土，振摇数次，作为空白。（4）应选择脱色力强、不吸附抗坏血酸的白陶土，每批新的白陶土要测定回收率。（5）样品如不宜过滤，可离心取上清液测定。（6）样品可能有其它杂质也能还原2.6一二氯酚靛酚的，但还原染料的速度较抗坏血酸慢，所以滴定时以15s粉红色不褪去为止。实验项目七、叶绿素的测定4学时（一）实验目的要求1、通过实验掌握掌握静置法测定叶绿素含量的方法及原理。2、通过实验学习叶绿素含量测定的实验设计、数据测定与处理、结果分析、试验报告撰写（二）实验材料和仪器设备芹菜叶片或其他植物叶片，95%乙醇、石英砂、碳酸钙粉，电子分析天平、分光光度计、漏斗、25mL容量瓶，剪刀、滤纸，玻璃棒等（三）实验内容1、实验原理叶绿素与其他显色物质一样，在溶液中如液层厚度不变其吸光度与它的浓度呈一定的比例关系。已知叶绿素a、b在652nm波长处有相同的比吸收系数（均为34.5）。因此在此波长下测定溶液的吸光度，即可计算出叶绿素a、b的总量。2、实验步骤（1）叶绿素的提取称取植物鲜叶0.20g（可视叶片叶绿素含量增减用量），剪碎放入研钵中，加少量碳酸钙粉和石英砂及3~5mL95%乙醇研成匀浆，再加约10mL95%乙醇稀释研磨后，用滤纸过滤入25mL容量瓶中，然后用95%乙醇滴洗研磨及滤纸至无绿色为止，最后定容至刻度，摇匀既得叶绿素提取液。（2）测定把叶绿体色素提取液倒入1cm比色杯中，以95%乙醇为空白，在波长
V1—样品滴定时所用染料量，ml V2—空白滴定时所用的染料量，ml W—滴定时所用样品稀释液中含样品的量，g T—1ml 染料相当于抗坏血酸 mg 数 名称 次数 W V1 V2 还原型抗坏血酸含量 1 2 均值 结果与分析： 4、注意事项 （1）操作过程要迅速，因还原型抗坏血酸易被氧化，一般一般不超过 2min。 （2）生食物匀浆在量筒内振摇可能会产生泡沫，加数滴异戊醇可除去。 （3）如样品有色应把样品上层液 20ml 导入锥形瓶中，加入一勺白陶土，振摇 数次，使充分脱色。静止后在取上层液测定。同时，取一锥形瓶，加入 1％草酸 20ml，加入一勺白陶土，振摇数次，作为空白。 （4）应选择脱色力强、不吸附抗坏血酸的白陶土，每批新的白陶土要测定回 收率。 （5）样品如不宜过滤，可离心取上清液测定。 （6）样品可能有其它杂质也能还原 2,6—二氯酚靛酚的，但还原染料的速度较 抗坏血酸慢，所以滴定时以 15s 粉红色不褪去为止。 实验项目七、叶绿素的测定 4 学时 （一）实验目的要求 1、通过实验掌握掌握静置法测定叶绿素含量的方法及原理。 2、通过实验学习叶绿素含量测定的实验设计、数据测定与处理、结果分析、 试验报告撰写 （二）实验材料和仪器设备 芹菜叶片或其他植物叶片，95%乙醇、石英砂、碳酸钙粉，电子分析天平、 分光光度计、漏斗、25mL 容量瓶，剪刀、滤纸，玻璃棒等 （三）实验内容 1、实验原理 叶绿素与其他显色物质一样，在溶液中如液层厚度不变其吸光度与它的浓 度呈一定的比例关系。已知叶绿素 a、b 在 652nm 波长处有相同的比吸收系数（均 为 34.5）。因此在此波长下测定溶液的吸光度，即可计算出叶绿素 a、b 的总量。 2、实验步骤 （1）叶绿素的提取 称取植物鲜叶 0.20g（可视叶片叶绿素含量增减用量），剪碎放入研钵中， 加少量碳酸钙粉和石英砂及 3~5mL95%乙醇研成匀浆，再加约 10mL95%乙醇稀 释研磨后，用滤纸过滤入 25mL 容量瓶中，然后用 95%乙醇滴洗研磨及滤纸至无 绿色为止，最后定容至刻度，摇匀既得叶绿素提取液。 （2）测定 把叶绿体色素提取液倒入 1cm 比色杯中，以 95%乙醇 为空白，在波长