一定的色谱条件下，待测组分质量或在流动相中的浓度与检测器响应信号（峰面积或峰高）成正比，所以用峰面积定量。1，外标法用组分的标准品做出检测器响应值峰面积，和已知浓度的标准曲线进行定量分析。2.内标法当需要很高的准确度或精密度的分析结果时，应该选择内标法。准确称取mi被测组分标准品，加入某纯物质ms作为内标物，根据被测组分和内标物的质量比mjm及相应的色谱峰面积（或峰高）之比：兰=x4，式中m,f,×A,f、为组分和内标物的校正因子，可由标准溶液求得：=4=(")srx(A)s(14.10)f.m.A再准确称取m被测试样，加入ms的同样内标物，基于下式可求出组分i百分含量Ci%应为：Ci%==×10%=f×4*×100%(14.11)mA,xm3.归一化法如果试样中所有组分均能流出色谱柱并显示色谱峰，可用用峰面积归一化进行计算组分的百分含量。难题解析例14-1用标准加入法测定血清中锂的含量。锂标准溶液配制：称取1.5988g光谱纯硫酸锂(Li2SO4·H2O)移入500mL容量瓶中，稀释至刻度，摇匀。取4份0.100mL血清试样分别加入锂标准溶液0.0，10.0，20.0，30.0uL，然后用蒸馏水分别定容到5.00mL。锂原子吸收波长为670.8nm，用锂元素的空心阴极灯，灯电流5mA，缝宽0.5nm，空气-乙炔贫燃火焰测得的吸光度依次为0.201，0.414，0.622，0.835。计算此血清中锂的含量。M(Li2SO4·H2O)为127.9g·mol-1.5988g解（1）锂标准溶液浓度cs=-×2=0.05000mol-L-l127.9gmol-×0.500L（2）当加入10.0μL锂标准溶液到5.00mL水中（其中含有0.100mL的血清试样），加入的锂浓度为000ml00101 010- mL5.00×10^L
一定的色谱条件下，待测组分质量或在流动相中的浓度与检测器响应信号 （峰面积或峰高）成正比，所以用峰面积定量。 1．外标法 用组分的标准品做出检测器响应值峰面积，和已知浓度的标准曲 线进行定量分析。 2．内标法 当需要很高的准确度或精密度的分析结果时，应该选择内标法。 准确称取 mi 被测组分标准品，加入某纯物质 ms 作为内标物，根据被测组分和内 标物的质量比 ms/mi 及相应的色谱峰面积（或峰高）之比 ： s s i i s i f A f A m m = ，式中 fi、fs 为组分和内标物的校正因子，可由标准溶液求得： = = s i f f f ST i s ST s i ( ) ( ) A A m m （14.10） 再准确称取 m 被测试样，加入 ms 的同样内标物，基于下式可求出组分 i 百 分含量 Ci%应为： Ci% = A m A m f m m s = s i i 100% ×100% （14.11） 3．归一化法 如果试样中所有组分均能流出色谱柱并显示色谱峰，可用用峰 面积归一化进行计算组分的百分含量。 难题解析 例 14-1 用标准加入法测定血清中锂的含量。锂标准溶液配制：称取 1.5988g 光谱纯硫酸锂(Li2SO4H2O)移入 500mL 容量瓶中，稀释至刻度，摇匀。取 4 份 0.100mL 血清试样分别加入锂标准溶液 0.0，10.0，20.0，30.0μL, 然后用蒸馏水 分别定容到 5.00mL。锂原子吸收波长为 670.8nm，用锂元素的空心阴极灯，灯 电流 5mA，缝宽 0.5nm，空气-乙炔贫燃火焰测得的吸光度依次为 0.201，0.414， 0.622，0.835。计算此血清中锂的含量。M(Li2SO4H2O) 为 127.9gmol-1 解 （1）锂标准溶液浓度 cs= 2 127.9g mol 0.500L 1.5988g 1 − =0.05000molL -1 （2）当加入 10.0μL 锂标准溶液到 5.00mL 水中（其中含有 0.100mL 的血清 试样），加入的锂浓度为 cs1= 5.00 10 L 0.05000mol L 10.0 10 L -3 1 -6 − =1.00×10-4 molL -1
同理计算加入20.0；30.0uL浓度分别为2.00×10-4molL-l；3.00×10-4molL-1（3）利用实验获得的数据绘出标准加入法测定血清中锂含量的工作曲线（图14-2）。外延曲线与横坐标轴相交，交点至原点的距离为锂的浓度Cx=1.00×10-4mol-L-l。(4)）血清中锂的含量=100×10~mol:L×5.00ml=5.00×10-molL-10.100ml1. 00X0. 800. 60被测样品中加入锂标准溶液0.40被测样品中锂的浓度被测祥品中未加入锂标准溶液:060.2000.1000.0000.1000.2000.3000.400锂的浓度（mmol/L）图14-2标准加入法例14-2用荧光法测定复方炔诺酮片中炔雌醇（一种合成雌激素）的含量，取供试品20片，研细后溶于无水乙醇中并稀释至250.0mL，过滤，取滤液5.00mL，稀释至10.00mL，在激发波长185nm和发射波长307nm处测定荧光强度为61。如果炔雌醇标准品的乙醇溶液质量浓度为1.4μg·mL-1在相同测定条件下荧光强度为65，计算出每片药中炔雌醇的含量。G=5x解比例法计算公式：Fs61×1.4/g-ml =1.3μg-mL-l将已知代入上式：Cx=65每片 药中块雌醇的含量-=13/gm-l10g 200l-.00l=32g20例14-3组份A和B在一根30cm柱上分离，其保留时间分别为16.40和17.63min；峰低宽分别为1.11和1.21min。试计算：分离度R；柱子的平均塔板数N：板高H。解将已知数据代入（14.9），（14.8），（14.7）式：
同理计算加入 20.0；30.0μL 浓度分别为 2.00×10-4 molL -1 ；3.00×10-4 molL -1 （3）利用实验获得的数据绘出标准加入法测定血清中锂含量的工作曲线（图 14-2）。外延曲线与横坐标轴相交，交点至原点的距离为锂的浓度 cx=1.00×10-4 molL -1。 （4）血清中锂的含量 = 0.100ml 1.00 10 mol L 5.00ml 4 1 − − =5.00×10-3molL -1 图 14-2 标准加入法 例 14-2 用荧光法测定复方炔诺酮片中炔雌醇（一种合成雌激素）的含量， 取供试品 20 片，研细后溶于无水乙醇中并稀释至 250.0mL，过滤，取滤液 5.00mL， 稀释至 10.00mL，在激发波长 185nm 和发射波长 307nm 处测定荧光强度为 61。 如果炔雌醇标准品的乙醇溶液质量浓度为 1.4μgmL-1 在相同测定条件下荧光强 度为 65，计算出每片药中炔雌醇的含量。 解 比例法计算公式： cx= s x s F F c 将已知代入上式： cx= 65 61 1.4 g ml −1 =1.3μgmL-1 每片药中炔雌醇的含量= 20 10.00ml 250.0ml 5.00ml ml 1 1.3 g − =32μg 例 14-3 组份 A 和 B 在一根 30cm 柱上分离，其保留时间分别为 16.40 和 17.63min；峰低宽分别为 1.11 和 1.21min。试计算：分离度 R；柱子的平均塔板 数 N；板高 H。 解 将已知数据代入（14.9），（14.8），（14.7）式：