◼ 理论板,理论板当量高度(HETP),理论塔板 数(N)、 反应不同时刻溶质在色谱柱中的分布以及分离度 与柱高之间的关系。 理论板:将溶质达到一次分配平衡的色谱柱段。 理论板当量高度:该段色谱柱的高度
◼ 理论板,理论板当量高度(HETP),理论塔板 数(N)、 反应不同时刻溶质在色谱柱中的分布以及分离度 与柱高之间的关系。 理论板:将溶质达到一次分配平衡的色谱柱段。 理论板当量高度:该段色谱柱的高度
◼ 理论板数的计算方法 2 1/ 2 5.54( ) W t N R = 2 16( ) b R W t N = N-理论塔板数 tR-保留时间 W1/2-半峰宽 Wb-峰底宽度 ◼理论塔板高度: N L H = L-柱长
◼ 理论板数的计算方法 2 1/ 2 5.54( ) W t N R = 2 16( ) b R W t N = N-理论塔板数 tR-保留时间 W1/2-半峰宽 Wb-峰底宽度 ◼理论塔板高度: N L H = L-柱长
22.2 色谱分离方法的分类 色谱分离方法很多,种类有四、五十种 但常用于生物大分子分离的色谱方法,按机 理分,有以下几种:
22.2 色谱分离方法的分类 色谱分离方法很多,种类有四、五十种 但常用于生物大分子分离的色谱方法,按机 理分,有以下几种:
按层析原理分类 名称 分离原理 吸附层析法 粗份在吸附剂表面吸附固定相是固体吸附剂, 格能力不同 分配层浙法 各组份在流动相和静止液相(固相)中的分配 系教不同 离子交换层析法 固腚相是离子交换剂,各组份与离子交换剂亲 助不同 凝胶层析法 固腚相是多孔凝胶,各组份的分子大小不同, 因而在凝胶上受阻滞的程度不同 亲和层折法 固定相职能与一种待分离纽份专一结合,以此 和无亲和力的其它组份分离
◼ 按操作形式不同分类: 柱色谱:将固定相装于柱内,使样品沿一个方向移动 而达到分离。 纸色谱:用滤纸做液体的载体,点样后,用流动相展 开,以达到分离鉴定的目的。 薄层色谱:将适当粒度的吸附剂铺成薄层,以纸色谱 类似的方法进行物质的分离和鉴定。 纸色谱和薄层色谱主要适用于小分子物质的快速检 测分析和少量分离制备,通常为一次性使用,而柱 色谱是常用的色谱形式,适用于样品分析、分离。 生物化学中常用的凝胶色谱、离子交换色谱、亲和 色谱、高效液相色谱等都通常采用柱色谱形式
◼ 按操作形式不同分类: 柱色谱:将固定相装于柱内,使样品沿一个方向移动 而达到分离。 纸色谱:用滤纸做液体的载体,点样后,用流动相展 开,以达到分离鉴定的目的。 薄层色谱:将适当粒度的吸附剂铺成薄层,以纸色谱 类似的方法进行物质的分离和鉴定。 纸色谱和薄层色谱主要适用于小分子物质的快速检 测分析和少量分离制备,通常为一次性使用,而柱 色谱是常用的色谱形式,适用于样品分析、分离。 生物化学中常用的凝胶色谱、离子交换色谱、亲和 色谱、高效液相色谱等都通常采用柱色谱形式