肉得新装费支腰房潮果者不同冰动防方向和速度不同.可分出备自的区。采 正常结果和考及临床意义 、pH8.5TEB缓冲液醋酸纤维膜电泳：各种Hb均泳向阳极 常泰德A213%F1-2% 2、pH6.5磷酸盐缓冲液醋酸纤维膜电泳：HbH泳向阳极，HbBart's在点样线上，其余各种Hb泳向阴极 pyn中带有 中告 于纤维素上，加用不同的洗脱液可分别洗脱不同的b,并进行定量分析 ,可与层析柱内的阴离子交换树脂纤维素上的阴离子交换而吸 【正常参考值】同电泳法 【临床意义】本法用于HbA与HbF,HbH与Hbl,HbC与HbE,HbA2与HbC的分离和鉴定。本法亦可用于将某-Hb纯化， 蛋白测定 【原理】抗碱血红蛋白即HbF与其他Hb不同，具有抗碱变性的能力.Hb液加碱，观察由粉红色(Hb)变为棕黄色（变性 Hb)的时间作定性试验。Hb液加定量碱，作用一定时间，加硫酸铵以终止反应，将沉淀的变性Hb滤除，以540m此色测定 汽的作定量试验 定性：出生4个月后(HbF不增高者) 定量：新生儿31-96%，2周岁以后<2.2% 【临床意义】HbF增高见于地中海贫血、某些异常Hb病(Hb Bar叶s、HbH);亦可见于再生障碍性贫血、PNH、铁粒幼 病性贫血、真性红细胞增多症、白血病及正常孕妇 【原理】在红细胞悬液中加入还原剂（偏重亚硫酸钠或硫酸氢钠）使各种Hb转变为还原状态。Hb$在还原状态下溶解度明 减低， 长管状凝胶（多聚体），使红细胞变为镰形红细胞 贫血(HbS病)纯合子型镰性红细胞可达100%：杂合子型可达50%：其他异常Hb病（如H比 Bart's、.Hbl病)亦可查出少量镰变细胞 ⑤异丙醇试验 ©pa是丰提性流。能分子内结合化不稳定在7的7两缓环中， 【正常结果】阴性(40min内不出现浑浊或沉淀) 】阳性见于不稳定Hb病，其他有些异常Hb(HbH、HbE、HbF)亦可为阳性 Qb证单的结合易因受热改变.在话宜的缓冲液50C环境放置一定时间，不稳定Hb此正常Hb更易发生混 【正常参考值】<5% 床意】同异丙醇试验 原理】不稳定 nHb在细胞内可发生沉淀，形成变性珠蛋白小体(Heinz bodie 此句深物可用结品 ，甲紫或煌焦油蓝等染色，在光镜下看到。 脾对含有珠蛋白小体红细胞的清除作用，血标本中珠蛋白小体阳性率 低。将血液与乙酰苯肼混合，放37PC孵育一定时间以加速Hb氧化和糖代谢，可促使珠蛋白小体形成而易于检出，亦称珠蛋 生成法：含5个以 珠蛋白小体 ,通过电泳使肽链纷开，根据异常肽链在电泳图上的部分，与正常人 对照、分析 (氨基酸组成和排列) 核磁共振法 X射线衍射分析法 发展方向 检测
内，浸在特定的缓冲液中的支持介质上，经一定电压和时间电泳。不同Hb的泳动方向和速度不同，可分出各自的区带。采 用不同的缓冲液、支持介质和电泳仪器的各种方法其分辨力不同 【正常结果和参考值及临床意义】 1、pH8.5TEB缓冲液醋酸纤维膜电泳：各种Hb均泳向阳极 正常参考值： A1 96-98% A2 1-3% F 1-2% 2、pH6.5磷酸盐缓冲液醋酸纤维膜电泳：HbH泳向阳极，HbBartˊs在点样线上，其余各种Hb泳向阴极 ②血红蛋白层析（hemoglolin chromatography） 【原理】各种Hb等电点不同，在碱性缓冲液Hb中带有正电荷，可与层析柱内的阴离子交换树脂纤维素上的阴离子交换而吸 附于纤维素上，加用不同pH的洗脱液可分别洗脱不同的Hb，并进行定量分析 【正常参考值】同电泳法 【临床意义】本法用于HbA与HbF，HbH与HbI，HbC与HbE，HbA2与HbC的分离和鉴定。本法亦可用于将某一Hb纯化， 供进一步分析 ③抗碱血红蛋白测定 【原理】抗碱血红蛋白即HbF与其他Hb不同，具有抗碱变性的能力。Hb液加碱，观察由粉红色（Hb）变为棕黄色（变性 Hb）的时间作定性试验。Hb液加定量碱，作用一定时间，加硫酸铵以终止反应，将沉淀的变性Hb滤除，以540nm比色测定 滤液中的HbF作定量试验 【正常参考值】 定性：出生4个月后（HbF不增高者） 定量：新生儿31-96%，2周岁以后<2.2% 【临床意义】HbF增高见于β地中海贫血、某些异常Hb病（Hb Bartˊs、HbH）；亦可见于再生障碍性贫血、PNH、铁粒幼 红细胞贫血、骨髓病性贫血、真性红细胞增多症、白血病及正常孕妇 ④红细胞镰变试验 （sickling test） 【原理】在红细胞悬液中加入还原剂（偏重亚硫酸钠或硫酸氢钠）使各种Hb转变为还原状态。HbS在还原状态下溶解度明 显减低，聚合成长管状凝胶（多聚体），使红细胞变为镰形红细胞 【正常结果】阴性（无镰形红细胞） 【临床意义】阳性见于镰状红细胞贫血（HbS病）;纯合子型镰性红细胞可达100%;杂合子型可达50%;其他异常Hb病（如Hb Bartˊs、HbI病）亦可查出少量镰变细胞 ⑤异丙醇试验 （isopropanol test） 【原理】异丙醇（isopropanl）是非极性溶液，能使分子内部结合弱化。不稳定Hb在37℃的17%异丙醇缓冲液环境中，比正 常Hb容易变性而沉淀。 【正常结果】阴性（40min内不出现浑浊或沉淀） （isopropanol test） 【临床意义】阳性见于不稳定Hb病，其他有些异常Hb（HbH、HbE、HbF）亦可为阳性 ⑥热变性试验（heat denaturation test） 【原理】Hb亚单位的结合,易因受热而改变。在适宜的缓冲液、50℃环境放置一定时间，不稳定Hb比正常Hb更易发生混 浊、沉淀 【正常参考值】 <5% 【临床意义】同异丙醇试验 ⑦变性珠蛋白小体（Heinz body）生成试验 【原理】不稳定Hb、HbH等异常Hb在红细胞内可发生沉淀，形成变性珠蛋白小体（Heinz bodies）。此包涵物可用结晶 紫、甲紫或煌焦油蓝等染色，在光镜下看到。由于脾对含有珠蛋白小体红细胞的清除作用，血标本中珠蛋白小体阳性率极 低。将血液与乙酰苯肼混合，放37℃孵育一定时间以加速Hb氧化和糖代谢，可促使珠蛋白小体形成而易于检出，亦称珠蛋 白小体生成试验 【正常结果和参考值】 普通法：阴性 生成法：含5个以上珠蛋白小体的红细胞<30% ⑧异常肽链分析（亚单位） 用尿素或对氯苯汞甲酸（PCMB）使肽链解离出来，通过电泳使肽链分开，根据异常肽链在电泳图上的部分，与正常人 对照、分析 ⑨肽链结构分析（氨基酸组成和排列） 氨基酸顺序分析仪 质谱仪 核磁共振法 X射线衍射分析法 ⑩基因水平检测 发展方向
(四)免疫性溶血 生积关热矣密器水数的虹细水价质中不发 间接试验 间接试验 测血清中存在的游离不完全抗体 【临床意义】 直接 阳性明 细胞 有不完全抗 阳性见于自身免疫性溶血性贫血，药物免疫性溶血性贫血及同种免疫性溶血性贫血 Donath-aderstain T细胞牢固结合发生作用 血：当温度上升到37时补体按顺序完成激活，发生溶血 【正常结果】阴性 【临床意义】阳性见于 阵发性寒冷性血红蛋白尿 第五讲尿液检验 尿标本的收集与保存 (1) 清晨随意 防腐剂参考：①甲醛②甲苯盐酸 股性状检查 尿量 3.气味 4.酸碱反应(pH) 5.比通 :1000-2000ml/24h 少尿、无尿、多尿 2.颜色： 正常尿淡黄色 尿颜色主要与尿色素关系最大 淡灰白色的酸和碳酸盐沉淀 颜色病理性改变： ()血尿(hematuria) 究尿Pa (5)胆红素尿(bilirubinuria) 其他检性状 碱反应(pH PH的6.5，波动在4.5一8.0之间。 5.比重 正带记0的1025之间，晨尿的约1020左右，婴幼儿尿比重偏低 1.尿蛋白 teinuria) 3.酮体(ketone body) 4.尿胆红索(urie bilirubin)
（四）免疫性溶血 ①抗人球蛋白试验（Coomb’s test） 直接试验——测红细胞表面的不完全抗体 方法：表面附有相应抗原的红细胞与不完全抗体结合后称为致敏红细胞。经盐水洗涤过的致敏红细胞在盐水介质中不发 生凝集，加入抗人球蛋白血清后则出现凝集，此即抗人球蛋白直接试验阳性 间接试验——测血清中存在的游离不完全抗体 方法：先用正常人Rh（D）阳性 O型（或与被检者ABO同型）的红细胞吸附患者血清中存在的游离不完全抗体（亦称致 敏），致敏红细胞经盐水洗涤后加入抗人球蛋白血清，如出现凝集即为抗人球蛋白间接试验阳性 间接试验——测血清中存在的游离不完全抗体 【临床意义】 直接试验阳性证明红细胞上有不完全抗体 间接试验阳性证明血清中存在不完全抗体 阳性见于自身免疫性溶血性贫血，药物免疫性溶血性贫血及同种免疫性溶血性贫血 ②冷溶血试验（Cold hemolysis test or Donath Landsteiner test） 【原理】阵发性寒冷性血红蛋白尿患者血清中存在一种冷反应性抗体（Donath-Laderstainer，D-L抗体），属IgG。在37℃ 时不能与红细胞牢固结合发生作用，当温度降至20℃以下并有补体存在的条件下，此抗体结合于红细胞表面，但不发生溶 血；当温度上升到37℃时补体按顺序完成激活，发生溶血 【正常结果】阴性 【临床意义】阳性见于 阵发性寒冷性血红蛋白尿 第五讲尿液检验 概述：尿液检验内容、尿液的形成、临床应用 （1）泌尿系统疾病（2）其他系统疾病（3）用药监护 一、尿标本的收集与保存 (1) 清晨随意尿： (2) 餐后随意尿： (3) 24小时尿：防腐剂参考：①甲醛 ②甲苯③盐酸 （4） 清洁中段尿： 二、一般性状检查 1．尿量 2．颜色： 3．气味 4．酸碱反应（pH） 5．比重 1．尿量 正常尿量；1000～2000ml／24h 少尿、无尿、多尿 2．颜色： 正常尿淡黄色。尿颜色主要与尿色素关系最大 淡红色的尿酸盐结晶 淡灰白色的磷酸盐和碳酸盐沉淀 颜色病理性改变： （l）血尿（hematuria ） （2）血红蛋白尿 （3）脓尿（pyuria） （4）乳磨尿（chyluria） （5）胆红素尿（bilirubinuria） 其他一般性状 3．气味 4．酸碱反应（pH） PH约6.5，波动在 4.5～8.0之间。 5．比重 正常为1.015～1.025之间，晨尿约1.020左右，婴幼儿尿比重偏低。 三、化学检查 1．尿蛋白(proteinuria) 2．尿糖 (glucosuria) 3．酮体 (ketone body) 4．尿胆红素(urie bilirubin)
7尿隐血ec NIT BLD) 8.尿白细胞(Leukocytes,LEU 9.尿淀粉酶(urine amylase) 尿向 -130mg/24h, 成人上限是150~200mg24h 2)定性及定量的相关性， 土~十约为0.2~1g/24h +~十十常为1 g/24h 十常>3g/24h (3)蛋白尿的分 肾小球性蛋白尿 肾小管性蛋白尿 性深 :凝溶蛋白血、血红蛋白尿。 组织性蛋白尿 [产生原理】 ①血糖升高超过肾糖锅所致 ②血 荐法灵萄脑(GLU 性糖尿】 床意义】 (1)血糖增高性糖尿 (血糖正常性糖尿) (5)假性糖尿 3.酮体 【原理】 【临床意义】①糖尿病性酮尿 ②]非塘尿病性酮尿 容 细胞、管型及结晶体 检音方法 (1)红细胞（血尿） 原理 成表面带刺、颜色较深的球形 低卷尿中 红细胞吸水胀大，呈红细胞淡影 肾小球源性血 畸形，呈多形型 非肾小球源性血尿 一似以外周血中的红细胞，呈双四圆盘的均一型， 红细胞（血尿） 【参考值】 原性血尿（多形型） 非肾小球源性血尿（ 型 红细胞（血尿）临床意义 ①肾小球源性血尿常见于急性肾小球肾炎 非特小球源性只 肾盂肾 多囊肾、急性膀肌炎、 结核或血友病 外形多不 洁构模糊
5.尿胆原(urobilinogen) 6．尿亚硝酸盐（nitrite，NIT ) 7.尿隐血（urine occult blood，BLD） 8.尿白细胞（Leukocytes，LEU） 9.尿淀粉酶（urine amylase） 1．尿蛋白(proteinuria) （1）正常人尿蛋白20～130mg/24h，成人上限是 150～200 mg/24h。 （2）定性及定量的相关性： 土～十约为0.2～lg/24h； ＋～十十常为1～2g/24h； 十十十～十十十十常＞3g/24h， 多者可超过10 g/24h。 （3）蛋白尿的分类 肾小球性蛋白尿 肾小管性蛋白尿 混合性蛋白尿 溢出性蛋白尿：凝溶蛋白血、血红蛋白尿。 组织性蛋白尿 偶然性蛋白尿 功能性蛋白尿 体位性蛋白尿 2．尿糖 【产生原理】 ①血糖升高超过肾糖阈所致； ②血糖正常，肾糖阈降低所致肾性糖尿。 ③ 尿试纸条法测葡萄糖（GLU）。 【临床意义】 （1） 血糖增高性糖尿 （2） 肾性糖尿（血糖正常性糖尿） （3） 暂时性糖尿 （4） 其他糖尿 （5）假性糖尿 3．酮体 【原理】 【临床意义】①糖尿病性酮尿 ②非糖尿病性酮尿 四、显微镜检查 主要内容：细胞、管型及结晶体 检查方法： （1）红细胞（血尿） 原理 等渗尿------红细胞为浅黄色双四圆盘形 浓缩尿中------红细胞常皱缩成表面带刺、颜色较深的球形 低渗尿中--------红细胞吸水胀大，呈红细胞淡影 肾小球源性血尿-------------形态变形、畸形，呈多形型 非肾小球源性血尿---------似外周血中的红细胞，呈双凹圆盘的均一型。 红细胞（血尿） 【参考值】 镜下血尿 肾小球源性血尿（多形型） 非肾小球源性血尿（均一型） 红细胞（血尿）-临床意义： ①肾小球源性血尿常见于急性肾小球肾炎、 急进性肾炎、慢性肾炎、紫癜性肾炎、狼疮性肾炎等 ②非肾小球源性血尿见于肾结石、泌尿系肿瘤、肾盂肾 炎、多囊肾、急性膀肌炎、肾结核或血友病等。 白细胞和脓细胞-形态特点 白细胞：外形完整，颗粒清晰。 脓细胞：外形多不规则，结构模糊