讲稿 实验诊断学 第七版
0 讲稿 实验诊断学 第七版
第一章概论 一、基本概念 实验诊新以主要是运用物理学、化学和生物学等的实验室技术和方法，通过感官、试剂 反应、仪器分析和动物试验等手段，对病人的血液、体液、分泌液、排泄物以及组织细胞等 标本进行检验，以获得反映机体功能状态、病理变化或病因等的客观资料。试验结果与临床 综合分析，协助临床对疾病的诊断、病情观察、治疗、预后有重要意义，同时也为医学研究 提供一些数据，实验诊断是诊断血的重要组成部分。 (一)临床检验的进展和现状 1.设备： 显微镜一手工操作一半自动一全自动 电子显微镜 扫描电子显微镜 2.化学检验的发加 手工（化学反应：颜色）一半自动一全自动 速度：100Test/h-1600Test/h→2400Test/h 3.临床血液常规检验的发展 细胞计数（手工操作·半自动·全自动】 E、L、M(阻抗一体积大小) 五分类：E、L 、M0、 B队（阻抗，高频传导，激光散射-一物理） 六分类：化学（过氧化物酶） 物理（阻抗，高频传导，激光散射） 4.临床免疫检验的发展 抗原抗体反应：血凝（间接、反向）方法一酶联一荧光免疫一同位素标记一特殊发光物质 的标记一电子发光。设备：手工一半自动一全自动 5.临床微生物检验的发展 细菌鉴定手工一半自动一全自动 6.现状 a、依赖性 b、标准化 c、技术水平 d、满足临床科研与教学 （二)实验诊断学与检验医学 实验诊断学：①应用为主②教学③诊断理论和诊断方法 检验医学：①检验方法原理②技术改进③检验结果质量控制 (三)实验诊断学的主要内容 1.临床血液学检验。血液常规检查232 2.体液的检验 3.临床生物化学检验肝、肾、血脂等 4。临床免疫学检验 病毒标记物 临床病原体检查 微生物、HIV、 6.特检室、分子生物室
1 第一章 概 论 一、基本概念 实验诊断以主要是运用物理学、化学和生物学等的实验室技术和方法，通过感官、试剂 反应、仪器分析和动物试验等手段，对病人的血液、体液、分泌液、排泄物以及组织细胞等 标本进行检验，以获得反映机体功能状态、病理变化或病因等的客观资料。试验结果与临床 综合分析，协助临床对疾病的诊断、病情观察、治疗、预后有重要意义，同时也为医学研究 提供一些数据，实验诊断是诊断血的重要组成部分。 （－）临床检验的进展和现状 1. 设备： 显微镜→手工操作→半自动→全自动 ↓ 电子显微镜 ↓ 扫描电子显微镜 2．化学检验的发展 手工（化学反应：颜色）→半自动→全自动 速度：100 Test／h→1600Test/h→2400Test／h 3．临床血液常规检验的发展 细胞计数（手工操作→半自动→全自动） 三分类： NE、L、M（阻抗→体积大小） 五分类： NE、L、MO、EO BA（阻抗，高频传导，激光散射---物理） 六分类： 化学（过氧化物酶） 物理（阻抗，高频传导，激光散射） 4．临床免疫检验的发展 抗原抗体反应：血凝（间接、反向）方法→酶联→荧光免疫→同位素标记→特殊发光物质 的标记→电子发光。设备：手工→半自动→全自动 5．临床微生物检验的发展 细菌鉴定手工→半自动→全自动 6．现状 a、依赖性 b、标准化 c、技术水平 d、满足临床科研与教学 （二）实验诊断学与检验医学 实验诊断学：①应用为主②教学③诊断理论和诊断方法 检验医学：①检验方法原理②技术改进③检验结果质量控制 （三）实验诊断学的主要内容 l．临床血液学检验 。血液常规检查 232 2．体液的检验 3．临床生物化学检验 肝、肾、血脂等 4．临床免疫学检验 病毒标记物 5．临床病原体检查 微生物、HIV、 6．特检室、分子生物室
（四)实验诊断学的应用范围 1。为临床服条 . 预防疾病 进行社会普查 4,开展健康咨询 (五)学习的方法和要求 了解实验诊断在临床上的应用价值 23 掌握各项检验的适应症 了解检验原理 方法、重点 4.学握参考值与临床意义。 二、标本的采集和处理正确与否与检验结果密切相关 1.血液标本的种类全血（抗凝）、血浆和血清。全血用于血细胞成分的检查：血清用 于大部分临床生化检查和免疫学检查：血浆也适用于部分临床生化检查，此外，凝血因 游离血红蛋白测定等必须采用血浆标本】 2. 采血部位 (1)毛细血管采血：（微量法）采血部位：指端、拇趾或足跟、烧伤者选择无炎症或水肿 部位。采血深度适当，切忌用力挤压。 (2)静脉采血：需血量拉多时采用。多用 (3)动脉采血：用于血气分析时。股动脉或挠动采血。采得的血标本必须与空气隔离，立即 送检 3.采血时间 (1)空腹采血：是指在禁食8小时后空腹采取的标本，一般是在晨起早餐前采血，常用于 临床生化检查。其优点是可游免饮食成分和白天生理活动对检验结果的影响，同时因每次均 在固定时间来血也便干对照出较 (2)特定时间采血：激素 ,葡萄糖等的测定。检查微丝蚴需在半夜唤醒后来血。此外， 油三酯、维生素D等还可有季节性变化。进行治疗药物监测时，更需注意采血时药物浓度的 峰值和低谷。血培养 (3)急诊采血：不受时间限制。检验单上应标明采血时间 4。标本采集后的处理 (1)抗凝剂：采用全血或血浆标本时，充分混匀。常用的抗凝剂有 1)草酸盐： 与血液中的钙离子形成不溶性的草酸钙达到抗凝目的： 2)枸檬酸钠：抗凝力较弱。 3)肝素：抑制凝血酶原转化为凝血酶，常用。 4)DTA:与钙离子络合而抗凝。 (2)及时送检和检测：血糖分解、血细胞破坏、C02改变、溶血 (3)微生物血标 温度、环境 (二)骨萄标本的采集和处理 骨髓标本由骨髓穿刺而获得，如用作骨髓细胞形态学检查，应立即将其制成涂片。如进行 细菌培养，接种在特定的培养基中。标木均需及时送检。 (三)排泄物、体液标本的采集和处理 尿液、粪便、浆膜腔穿刺液等标本采集后均应随时尽快送检 三、实验诊断的临床应用和评价 (一)正确选择实验室检查项目 实验分类：①按诊断价值分为：确定诊断项目（乙肝病毒、白血病）、辅助诊断项目（血 2
2 ( 四）实验诊断学的应用范围 1．为临床服务 2．预防疾病 3．进行社会普查 4．开展健康咨询 （五）学习的方法和要求 1. 了解实验诊断在临床上的应用价值 2. 掌握各项检验的适应症 3. 了解检验原理、方法、重点 4. 掌握参考值与临床意义。 二、标本的采集和处理 正确与否与检验结果密切相关 1．血液标本的种类 全血（抗凝）、血浆和血清。全血用于血细胞成分的检查；血清用 于大部分临床生化检查和免疫学检查；血浆也适用于部分临床生化检查，此外，凝血因 子测定、游离血红蛋白测定等必须采用血浆标本。 2．采血部位 （l）毛细血管采血：（微量法）采血部位：指端、拇趾或足跟、烧伤者选择无炎症或水肿 部位。采血深度适当，切忌用力挤压。 （2）静脉采血：需血量较多时采用。多用 （3）动脉采血：用于血气分析时。股动脉或挠动采血。采得的血标本必须与空气隔离,立即 送检。 3．采血时间 （1）空腹采血：是指在禁食 8 小时后空腹采取的标本，一般是在晨起早餐前采血，常用于 临床生化检查。其优点是可避免饮食成分和白天生理活动对检验结果的影响，同时因每次均 在固定时间来血也便于对照比较。 （2）特定时间采血：激素、葡萄糖等的测定。检查微丝蚴需在半夜唤醒后来血。此外，甘 油三酯、维生素 D 等还可有季节性变化。进行治疗药物监测时，更需注意采血时药物浓度的 峰值和低谷。血培养 （3）急诊采血：不受时间限制。检验单上应标明采血时间。 4．标本采集后的处理 （l）抗凝剂：采用全血或血浆标本时，充分混匀。常用的抗凝剂有： 1）草酸盐： 与血液中的钙离子形成不溶性的草酸钙达到抗凝目的。 2）枸檬酸钠：抗凝力较弱。 3）肝素：抑制凝血酶原转化为凝血酶，常用。 4）EDTA：与钙离子络合而抗凝。 （2）及时送检和检测： 血糖分解、血细胞破坏、CO2 改变、溶血。 （3）微生物血标本 温度、环境 （二）骨髓标本的采集和处理 骨髓标本由骨髓穿刺而获得 ，如用作骨髓细胞形态学检查，应立即将其制成涂片。如进行 细菌培养，接种在特定的培养基中。标本均需及时送检。 （三）排泄物、体液标本的采集和处理 尿液、粪便、浆膜腔穿刺液等标本采集后均应随时尽快送检。 三、实验诊断的临床应用和评价 （－）正确选择实验室检查项目 实验分类：①按诊断价值分为：确定诊断项目（乙肝病毒、白血病）、辅助诊断项目（血
脂、莞心病、和鉴别诊断项目（病毒、细菌）②按报告方式分为：定性试验、定量试验 和半定量试验实验 (二)参考值 1.参考值与正常值的差别书263正常人测得值，参考值是应用统计学方法产生。 2,参考值的产生及意义书264 (三)检验质量的保证 1分析前质挖：选择检验项目、病人准备、正确地采集标本、及时送检、和正确地填写 申请单 床医生 2.分析中质控：检验人员素质（上岗证）、实验室条件、检测方法和分析仪器、试剂 室内或室间质量控制。 3.分析后质控：及时报告检验结果：医生综合分析，对检验结果的正确的解释。 (四)影响检验结果的常见因素 操作因素 技术误差和人为误差 个体差异 人种 、民族、性别、年龄、采血时间 3. 检验标本的采集和处理的影响。 药物的影响 (五)检验结果解释 检验结果诊断的局限性 个体差异 2 结合临床资料综合分析的重要性 结合临床，具体分析具体评价。 (六)医学决定水可 第二章、临床血液学检验 一红细胞和血红蛋白的检验 11 来源：造血干细啊 2)红细胞的主要生理功能 作为呼吸载体从肺部携带氧输送至全身各组织，并将组织中的二氧化碳运送到肺 而呼出体外，（这一功能主要是通过其内所含的血红蛋白来完成的.） 【血红蛋白和红细胞数参考值】 人群 血红蛋白 红细胞数 成年男性 120160g/1 (4.05.5)×102/1 成年女性 110-150g/ (3.55.0)×101 新生儿 170-200g/L (6.0~7.0)×102/九 【临床意义】 红细胞和血红蛋白量增彩 1)相对性红细胞增多 与血浆中水分的丢失有关，血液浓缩，使红细胞容量相对增加。见于严重呕吐 腹泻、大量出汗、大面积烧伤、慢性肾上腺皮质功能减退、尿崩症、甲状腺功 能亢进症危象、糖尿病酮症酸中毒。 2)绝对性红细胞增多 (1)继发性红细胞增多症：非造血系统疾病，发病的主要环节是血中红细胞生成素增多 ①红细胞生成素代偿性增加：因血氧饱和度减低 组织缺氧引起 生理性红细胞生成 素代偿性增加见于新生儿，高原地区居民：病理性红细胞生成素代偿性增加见于肺 气肿、先心病等. ②红细胞生成素非代偿性增加：红细胞生成素增加是于某些肿瘤或肾脏疾病有关，如肾 癌等 3
3 脂、莞心病、和鉴别诊断项目（病毒、细菌）②按报告方式分为：定性试验、定量试验 和半定量试验实验 （二）参考值 １．参考值与正常值的差别 书 263 正常人测得值，参考值是应用统计学方法产生。 ２．参考值的产生及意义 书 264 （三）检验质量的保证 1．分析前质控：选择检验项目、病人准备、正确地采集标本、及时送检、和正确地填写 检验申请单。临床医生 2．分析中质控：检验人员素质（上岗证）、实验室条件、检测方法和分析仪器、试剂， 室内或室间质量控制。 3．分析后质控：及时报告检验结果；医生综合分析，对检验结果的正确的解释。 （四）影响检验结果的常见因素 1． 操作因素 技术误差和人为误差。 2． 个体差异 人种、民族、性别、年龄、采血时间。 3． 检验标本的采集和处理的影响。 4． 药物的影响 （五）检验结果解释 1. 检验结果诊断的局限性 个体差异 2. 结合临床资料综合分析的重要性 结合临床，具体分析具体评价。 （六）医学决定水平 第二章 、临床血液学检验 一 红细胞和血红蛋白的检验 1) 来源：造血干细胞 2) 红细胞的主要生理功能： 作为呼吸载体从肺部携带氧输送至全身各组织，并将组织中的二氧化碳运送到肺 而呼出体外．（这一功能主要是通过其内所含的血红蛋白来完成的．） 【血红蛋白和红细胞数参考值】 人群 血红蛋白 红细胞数 成年男性 120～160g/L (4.0～5.5)×1012/ L 成年女性 110～150g/L (3.5～5.0)× 1012 /L 新生儿 170～200g/L (6.0～7.0)× 1012/L 【临床意义】 一 红细胞和血红蛋白量增多 １）相对性红细胞增多 与血浆中水分的丢失有关，血液浓缩，使红细胞容量相对增加．见于严重呕吐、 腹泻、大量出汗、大面积烧伤、慢性肾上腺皮质功能减退、尿崩症、甲状腺功 能亢进症危象、糖尿病酮症酸中毒。 ２）绝对性红细胞增多 （１）继发性红细胞增多症：非造血系统疾病，发病的主要环节是血中红细胞生成素增多 ①红细胞生成素代偿性增加：因血氧饱和度减低，组织缺氧引起．生理性红细胞生成 素代偿性增加见于新生儿，高原地区居民；病理性红细胞生成素代偿性增加见于肺 气肿、先心病等． ②红细胞生成素非代偿性增加：红细胞生成素增加是于某些肿瘤或肾脏疾病有关，如肾 癌等．
(2)直性红细胸增多岸 是一种原因未明的以红细胞增多为主的骨髓增殖性疾病，目前认为是多能造 血干细胞受累所到 红细胞和血红蛋白量诚 贫血：单位容积循环血液中红细胞数血红蛋白量及血细胞比容(Hct)低于参考 值低限。 以血红蛋白为标准，成年男性血红蛋白<120/1，成年女性<110g/1, 即可认为有贫血 1· 生理性减 儿童因身体生长发有迅速而红细胞生成相对不足.妊娠中后期的孕妇血浆 容量增加，使血液稀释.老年人造血功能减低，可导致红细胞及血红蛋白减少， 统称为生理性贫血 2.病理性贫血 红细胞生成不足 红细胞破坏过多 失加 【红细胞形态学改变】 正常红细胞呈双凹圆盘形，在血涂片中见到为圆形，大小较一致，直径6一9m, 平均75m 红细胞大小异常 1)小红细胞(microcyte)红细胞直径小于6um。见于低色素性贫血，主要为缺铁 性贫血。 2)大红细胸(macr0Cvte):径大10m。见干溶血性含血 3)巨红细胞(m阳 cyte):直径大于15um 。见于巨幼细胞贫血 4)红细胞大小不均 (anisocytosis)?红细胞大小直径可相差 一倍以上。见于病理 性造血 红细胞形态异常： 1.球形细胞(spherocyte):细胞体积小，圆球形，着色深，中央淡染区消失.见于 遗传性球形红细胞增多定 2,椭圆形细胞(elliptocyte)红细胞呈卵圆形，或两端钝圆的长柱状.见于遗传性 椭圆形细胞增多症 3.口形细胞(stomatocyte)红细胞中央淡染区呈扁平裂缝状.见于遗传性口形红细 胞增多症 4.靶形细胞(target cel1)中央淡染区扩大，中心部位状似射击之靶标.见于珠蛋 白生成障碍性贫血 5.镰形细胞(sick1 e cell)形如刀状，见于镶形细胞性贫血 红细胞形态异常： 6.泪滴形细胞(dacryocyte)细胞呈泪滴状或手镜状.见于骨髓纤维化. 7.棘细胞(acanthocyte)及刺细胞(spur cel1)棘细胞外周呈锯齿状突起，刺细 胞外周呈不规则突起.见于棘形细胞增多症， 8.裂细胞 ocyte)红细胞可呈梨形、泪滴形、新月形、长圆形等 9.红细胞缗钱状形成(rouleaux formation)红细胞呈串状.见于多发性骨髓瘤. 染色反应异常： 1.低色素性(hypochromic):红细胞染色过浅，见于缺铁性贫血等】
4 （２）真性红细胞增多症 是一种原因未明的以红细胞增多为主的骨髓增殖性疾病，目前认为是多能造 血干细胞受累所致． 二 红细胞和血红蛋白量减少 贫血：单位容积循环血液中红细胞数血红蛋白量及血细胞比容（Ｈct）低于参考 值低限。 以血红蛋白为标准，成年男性血红蛋白＜１２０g/l，成年女性＜１１０ g/l， 即可认为有贫血． １．生理性减少 儿童因身体生长发育迅速而红细胞生成相对不足．妊娠中后期的孕妇血浆 容量增加，使血液稀释．老年人造血功能减低，可导致红细胞及血红蛋白减少， 统称为生理性贫血． ２.病理性贫血 一． 红细胞生成不足 二． 红细胞破坏过多 三． 失血 【红细胞形态学改变】 正常红细胞呈双凹圆盘形，在血涂片中见到为圆形，大小较一致，直径 6～9um， 平均 7．5um。 红细胞大小异常： １）小红细胞（ microcyte)红细胞直径小于 6um 。见于低色素性贫血，主要为缺铁 性贫血。 ２）大红细胞(macrocyte )：直径大于 10um 。见于溶血性贫血。 ３）巨红细胞（ megalocyte ）：直径大于 15um 。见于巨幼细胞贫血。 ４）红细胞大小不均（ anisocytosis）红细胞大小直径可相差一倍以上。见于病理 性造血。 红细胞形态异常： １.球形细胞（spherocyte）:细胞体积小，圆球形，着色深，中央淡染区消失．见于 遗传性球形红细胞增多症． ２.椭圆形细胞（elliptocyte）红细胞呈卵圆形，或两端钝圆的长柱状．见于遗传性 椭圆形细胞增多症． ３.口形细胞（stomatocyte）红细胞中央淡染区呈扁平裂缝状．见于遗传性口形红细 胞增多症． ４.靶形细胞（target cell）中央淡染区扩大，中心部位状似射击之靶标．见于珠蛋 白生成障碍性贫血． ５.镰形细胞（sickle cell）形如镰刀状，见于镰形细胞性贫血． 红细胞形态异常： ６.泪滴形细胞（dacryocyte）细胞呈泪滴状或手镜状．见于骨髓纤维化． ７.棘细胞（acanthocyte）及刺细胞（spur cell）棘细胞外周呈锯齿状突起，刺细 胞外周呈不规则突起．见于棘形细胞增多症． ８.裂细胞（schistocyte）红细胞可呈梨形、泪滴形、新月形、长圆形等． ９.红细胞缗钱状形成（rouleaux formation）红细胞呈串状．见于多发性骨髓瘤． 染色反应异常： １.低色素性（hypochromic）：红细胞染色过浅，见于缺铁性贫血等．