③血液系统疾病 急性淋巴跑白病2.L3 慢性淋巴细跑白血病 (CLL) 淋巴瘤 72淋巴细跑减妙 ①肾上腺皮质激素 ②烷化剂 ®抗淋巴细跑球蛋白 中手 该细胞，进入组织转变为巨噬细胞，在功能上才完全趋于成熟。具有吞噬功能和调理作用等 S1香生中病（亚合性感染性0内膜炎黑热病伤寒疾） (2)血液系统疾病 6)其它（结节病、药物反映） ,类白血病反应(Leukemoid reaction) 白血病反应是指机体对某些疾病或外界因素有时所产生的类似白血病的血象反应，即白细胞常显若增多，同时可 2类白血病反应类型 2.1中性粒细跑型：最常见，多因感染，恶性肿瘤骨髓转移 过敏症、何杰金氏病 细 见于病病 染、如传单等 3LR与血液鉴别及诊断 四、名词解释 辽细减少 中性粒细胞核左移 退行性核左移 异形淋 跑 粒细胞缺乏症 中性粒细胞核左移 第三讲网织红细胞计数、红细胞参数和血沉 一、网织红细胞 定义】网 红细胞(reticu1 ocyte)是晚幼红细胞到成熟红细胞之间的未完全成熟的红细胞，胞浆小尚残存多少不等的 反映骨酷的造血功能 网织红细胞增多：表示骨髓红细胞系增生旺盛 轻度1：缺铁性贫血，巨幼细胞性贫血 如T 再障的诊断标准>表示骨 造血功能 ,见于再障 <0.005或0，绝对值<15X109/L, 为和会前的叶酸治行扶法性贫血，巨幼细性贫血病人3一5天后，网织红细商开始上开，710天达有 峰，0.06-0.10,2周后网织红细胞逐渐下降，而RBC和HB则逐渐增高 2。病情观察的指标：在治疗溶贫和失血性贫血时连续网织红细胞记数，可以判断病情的变化趋式
③血液系统疾病 急性淋巴细胞白血病 ALL（L1、L2、L3） 慢性淋巴细胞白血病 （CLL） 淋巴瘤 重链病 §7.2 淋巴细胞减少 ①肾上腺皮质激素 ②烷化剂 ③抗淋巴细胞球蛋白 ④接触放射线 ⑤免疫缺陷疾病 ⑥丙种球蛋白缺乏症 §8 单核细胞 来源于粒-单核细胞系祖细胞 血液中单核细胞，进入组织转变为巨噬细胞，在功能上才完全趋于成熟。具有吞噬功能和调理作用等 §8.1 单核细胞增多 （1）感染和寄生虫病（亚急性感染性心 内膜炎、黑热病、伤寒、疟疾 ） （2）血液系统疾病 （3）恶性肿瘤 （4）胶原血管疾病 （5）慢性消化道疾病 （6）其它（结节病、药物反映） 三、类白血病反应（Leukemoid reaction） 1 定义：类白血病反应是指机体对某些疾病或外界因素有时所产生的类似白血病的血象反应，即白细胞常显著增多，同时可 出现幼稚细胞。 2 类白血病反应类型 2.1 中性粒细胞型：最常见，多因感染，恶性肿瘤骨髓转移 2.2 嗜酸性粒细胞型：常见于寄生虫病、过敏症、何杰金氏病 2.3 淋巴细胞型：常见于病毒性感染、如传单等 2.4 单核细胞型：常见于结核病 3 LR与血液鉴别及诊断 四、名词解释 粒细胞减少症 粒细胞缺乏症 中性粒细胞核右移 中性粒细胞核左移 退行性核左移 中毒性颗粒 Auer小体 异形淋巴细胞 粒细胞缺乏症 中性粒细胞核左移 第三讲 网织红细胞计数、红细胞参数和血沉 一、网织红细胞计数 【 定义】 网织红细胞（reticu1ocyte）是晚幼红细胞到成熟红细胞之间的未完全成熟的红细胞，胞浆小尚残存多少不等的 核糖核酸等嗜碱性物质 反映骨髓的造血功能 网织红细胞增多：表示骨髓红细胞系增生旺盛 轻度↑：缺铁性贫血，巨幼细胞性贫血 重度↑：溶血性贫血，急性失血性贫血 网织红细胞减少：表示骨髓造血功能减低，见于再障 再障的诊断标准之一： ＜ 0．005 或 0 ，绝对值 ＜ 15 X 109／L， 1． 为疗效观察和治疗的指标 网织红细胞反应：在用铁剂或叶酸治疗缺铁性贫血，巨幼细胞性贫血病人3—5天后，网织红细胞开始上升，至7～10天达高 峰，0.06-0.10，2 周后网织红细胞逐渐下降，而RBC和HB则逐渐增高 2．病情观察的指标：在治疗溶贫和失血性贫血时连续网织红细胞记数，可以判断病情的变化趋式
3红细的生成指数 (Reticu1ocyte production index,RPI) 网织红细胞的生成相当于正常人的多少倍 病人网织红细胞(%) 病人红细胞比积 RP1= 2 正常人红细胞比积 RPI参考值：正常人RP1为2 之，cmT在直法中所杏有比 与红细跑的数量及其大小有关，也与血 2。考值 988化：86州 3。反映红细胞的增多或减少 红细高常用于水 红细的 种结血 程庄 玛减低 4.红细胞平均值的计算 将测得的红细胞数，血红蛋白量和红细胞比值三项数据，按以下公式可以计算出红细胞的平均值。据此可作为贫血的形态学 分类 (1)平均红细胞容积 指每个红细胞内所含血红蛋白的平均量，以皮克(g)为单位 [蛋白浓店 升血液中平均所含 参考值：320-3609/儿 5盘血的形本学合 、:小细低血色 MCV正常：正细胞正血色索 MCV偏大：大细胞高血色素 裂的表。，是于些原生虹金短，过多，超了储代力所起 ,溶血性贫血的分类 (三)按溶血发生。 二红细跑内在缺略所致 (1)遗传性 烟传 形红细胞 脱氢酶(G-6-PD) 血红蛋白中珠蛋白肽链的合成数量或结构异常 异常血红蛋白病(hemoglobinopoctosis) 海洋性贫山
3． 红细胞生成指数 （Reticu1ocyte production index，RPI）： 网织红细胞的生成相当于正常人的多少倍 病人网织红细胞（％） 病人红细胞比积 RP1＝—————————— ×————————— 2 正常人红细胞比积 RPI参考值：正常人RPI 为 2 网织红细胞生成指数＞3: 溶贫，急性失血性贫血 ＞2: 骨髓增生低下或红细胞系成熟障碍所至的贫血 二、红细胞比积测定 1．定义：红细胞比积（Hematocrit，HCT）是指红细胞在血液中所占容积的比值，与红细胞的数量及其大小有关，也与血 浆容量有关 2． 考值： 男性: 0.40～0.50 L／L，平均 0.45 L／L 女性: 0.37～0.48 L／L，平均 0.40 L／L 3． 反映红细胞的增多或减少 红细胞比积增高：常用于测定脱水病 人的红细胞比积，了解血液浓缩程度 红细胞比积减低：见于各种贫血。 4．红细胞平均值的计算 将测得的红细胞数，血红蛋白量和红细胞比值三项数据，按以下公式可以计算出红细胞的平均值。据此可作为贫血的形态学 分类 （1）平均红细胞容积 （Mean corpuscu1ar vo1ume, MCV ） 指每个红细胞的平均体积，以飞升( fl )为单位。 参考值： 82～95 fl （2）平均红细胞血红蛋白量（Mean corpuscu1ar hemog1obin, MCH） 指每个红细胞内所含血红蛋白的平均量，以皮克(pg)为单位 参考值： 27～31 pg （3）平均红细胞血红蛋白浓度Mean corpuscu1ar hemoglobin concentration，MCHC 指每升血液中平均所含血红蛋白浓度（克数），以 g／L 表示 参考值： 320～360 g／L 5．贫血的形态学分类 MCV偏小：小细胞低血色素 MCV正常：正细胞正血色素 MCV偏大：大细胞高血色素 第四讲 溶血性贫血的实验室检验 定义：溶血性贫血（hemotytic anemia，HA）是由于某些原因使红细胞寿命缩短，破坏过多，超过了骨髓代偿能力所引起 的一类贫血 贫血定义： 一、溶血性贫血的分类 （一）红细胞内在缺陷所致 （二）红细胞外来因素所致 （三）按溶血发生的部位分类 （一）红细胞内在缺陷所致 （1）遗传性： 红细胞膜缺陷——遗传性球形红细胞 增多症 与红细胞能量代谢有关的酶——葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G-6-PD） 血红蛋白中珠蛋白肽链的合成数量或 结构异常—— 异常血红蛋白病（hemoglobinopoctosis） 海洋性贫血（thalassemia） （一）红细胞内在缺陷所致
(2)获得性的红细胞内在缺陷 溶血可因免疫反应、化学、物理及其他生物学因素作用于红细胞而发生，如： 自身免疫性溶血性贫血(AUTO-mmune Hemotytic Anemia,.AIHA) 化学物或药物 心性贫血 脾功能亢进等 (三)按溶血发生的部位分类 内：红细脆 蛋 分解（遗传性的HA) 3血管内外 AIHA 溶血性贫血确诊的实验室检验 (一)增生性贫血 月溶棉多的特征 ①血象：网织红细胞明显增高>0.015常是0.05-0.25，细胞形态改变（如可见红细胞大小不均、嗜多色性红细胞、点彩红细 胞、Howell-Joly's Bodies、.Cabot's ring Bodies、.有核红细胞及异形红细胞) ②骨家：骨明显或活跃.以红系为主>0,30（正常参考值020），中、晚红细跑比明显增多一 ①红细胞生存时间的缩短：用同位素51C测定红细胞生存时间的缩短，是诊断溶血性贫血最直接的证据 正常人的半哀期(T12): 25 35 day 送增 的特5day O血浆乳酸脱复酶：红细胞破坏后，LDH1、DH2释放如血浆. 不过，这种检测特异性不高 意义 (参考值：<50mgL) 血管内溶血时血浆游离血红蛋白增洁 血管外溶血时血浆游离血红蛋白正常 参考值：0.71.5gL 临床意义： 血管内、外溶血，血清结合珠蛋白均降低或消失 类固醇治疗时其浓度可以增高 味：阳性表示为严重血管内溶血 二)溶血增多的特 ⑥血红蛋白尿检验：将尿液离心后，取上清液作尿液分析。若尿液中含有红细胞，会干扰结果。 者血中游离血红蛋白浓度超过肾值时，可通过肾脏排出，尿液血红蛋白检验为阳性(+~++， 一家血增多的元 ⑦含铁血黄素尿试验(Rous test):血红蛋白在肾小管中可发生分解，被释放出来铁以含铁血黄素的形式，贮存于肾小管细 含铁 血黄素可随同细胞从尿中排出，称为含铁血黄素尿。尿沉渣经过酸性亚铁氰化钾染色后， 阳性结果的临床意义：常见于慢性血管内溶血，特别是PNH患者 (二)溶血增多的特征 ⑧生 结合红素升高 尿胆原阳性 ,溶血原因的检验及常用的实验室检验 (一）红细跑膜缺陌
（2）获得性的红细胞内在缺陷—— 阵发性睡眠血红蛋白尿 Paroxysmal Noctumal Hemoglolinuria，PNH （二）红细胞外来因素所致 溶血可因免疫反应、化学、物理及其他生物学因素作用于红细胞而发生，如： 自身免疫性溶血性贫血（AUTO-Immune Hemotytic Anemia，AIHA） 化学毒物或药物 心脏瓣膜置换术后 感染所致的溶血性贫血 脾功能亢进等 （三）按溶血发生的部位分类 （1）血管内：红细胞 高血红蛋白症（获得性的HA） （2）血管外： （主要在脾脏）红细胞 血红蛋白 分解（遗传性的HA） （3）血管内、外：AIHA 二、溶血性贫血确诊的实验室检验 （一）增生性贫血 （二）溶血增多的特征 （一）增生性贫血 ①血象：网织红细胞明显增高>0.015常是0.05-0.25，细胞形态改变（如可见红细胞大小不均、嗜多色性红细胞、点彩红细 胞、Howell-Jolly´s Bodies、Cabot´s ring Bodies、有核红细胞及异形红细胞） ②骨髓象：骨髓增生明显或活跃，以红系为主>0.30（正常参考值0.20），中、晚红细胞比例明显增多 （二）溶血增多的特征 ①红细胞生存时间的缩短：用同位素51Cr测定红细胞生存时间的缩短，是诊断溶血性贫血最直接的证据 正常人的半衰期（T1/2）：25 ～ 35 day HA患者的半衰期：<15 day （二）溶血增多的特征 ②血浆乳酸脱氢酶：红细胞破坏后，LDH1、LDH2释放如血浆。 不过，这种检测特异性不高 （二）溶血增多的特征 ③血浆游离血红蛋白测定 （参考值:<50mg/L） 临床意义： 血管内溶血时血浆游离血红蛋白增高 血管外溶血时血浆游离血红蛋白正常 （二）溶血增多的特征 ④血清结合珠蛋白（Haptoglobin）测定 参考值：0.7 ～ 1.5g/L 临床意义： 血管内、外溶血，血清结合珠蛋白均 降低或消失 肝脏疾病时其浓度也减少 感染或炎症、恶性疾病、类固醇治疗时其浓度可以增高 ⑤血浆高铁血红蛋白（methemalbumin）试验 正常结果：阴性 临床意义：阳性表示为严重血管内溶血 （二）溶血增多的特征 ⑥血红蛋白尿检验：将尿液离心后，取上清液作尿液分析。若尿液中含有红细胞，会干扰结果。 正常结果：阴性 临床意义：当患者血中游离血红蛋白浓度超过肾阈值时，可通过肾脏排出，尿液血红蛋白检验为阳性（+～++++） （二）溶血增多的特征 ⑦含铁血黄素尿试验（Rous test）：血红蛋白在肾小管中可发生分解，被释放出来铁以含铁血黄素的形式,贮存于肾小管细 胞内。当肾小管细胞脱落时，含铁血黄素可随同细胞从尿中排出，称为含铁血黄素尿。尿沉渣经过酸性亚铁氰化钾染色后， 在显微镜下可见细胞内、外有普鲁士兰色圆形铁颗粒 正常结果：阴性 阳性结果的临床意义：常见于慢性血管内溶血，特别是PNH患者 （二）溶血增多的特征 ⑧生化检验： 血清非结合胆红素升高 黄疸 尿胆原阳性 三、溶血原因的检验及常用的实验室检验 （一）红细胞膜缺陷
四)免疫 )红细胞膜缺陷 @红细胞渗透脆性试脸(ertythrocyte osmotic fragitity test) test) T细略 ④酸溶血试验(acid hemolysis test or Ham test) ⑤蔗糖水溶血试验(sucrose lysis test) t he (SDS PAGE ①红细胞渗透脆性试验（ertythrocye osmotic fragitity test) 汗始溶血0.42-0.46%(4.2-4.6gL)(NaCL液) 完全溶血0.28-0.34%(2.8-3.4gL) (NacL液 L液)以上即为阳性。见于 专性球形红细胞增多症 V遗传性椭圆细胞增多症 偏身免性血件伴球形红细陶增多症 原ia 时作用后，以540m比色，绘制曲线，得出中间脆性(50%溶血度) ②湿孵育后渗透脆性 试验(incubated osmotic fragitity test) 果及参考值 中间脆性：0.465-0.590% (4.65-5.90gL)(NaCL液 (incubated osmotic fragitity test 血性贫血患者孵育后跪性亦增加 ③自身溶血试验及纠正试验(autohemotysis and correction test) 【原理】本试验原 育试 组的钙积细体积增大而易 【正常参考值】 48小时内不加纠正物的溶血度为<3.5% ATP的溶度 【临床意义】遗传性球形红细跑增多症自身溶血显若增强，萄萄糖和ATP都能明显纠正，其他溶血性疾病自身溶血阳性者 Daciei意称为先天性非球形细胞性溶血性贫血(Congenital nonspherocytic hemolytic anemia,CNHA),并分为两型； 者自身溶 试正常或轻度增加(3.6%)，加入萄精可使溶血纠正：哩者自身溶血显若增强(735%)加入南萄 ⑥里】本哈亦水am验连发性链眠性血红蛋白尿(PNH)患者的红细跑膜对补体非常敏感，在酸性（pH6465 条件下，经孵育能被正常人新鲜血清（含有补体）所溶解，不能被正常人灭活血清（无补体）溶解 草}阳胜见于PNH,确诊意义大 蔗糖溶血 【原理】本试验的原理与酸溶血试验相似。蔗糖溶液离子浓度低，经孵育加强补体与红细胞膜的结合，使补体敏感细胞溶 阴 40 【临床奇义 阳性见 FPNH。轻度阳性或溶血度1-5%亦可见于部分巨幼细胞性贫血，再生障碍性贫血、自身免疫性溶血性 贫血和遗传性球形红细胞增多症。此试验可做PNH的筛选试验，阴性可排除PNH,阳性应再做酸溶血试验证实 ⑥热落血试验(heat hemolysis test)
（二）红细胞酶缺陷 （三）珠蛋白合成异常 （四）免疫性溶血 （一）红细胞膜缺陷 ①红细胞渗透脆性试验（ertythrocyte osmotic fragitity test） ②湿孵育后渗透脆性试验（incubated osmotic fragitity test） ③自身溶血试验及纠正试验（autohemotysis and correction test） （一）红细胞膜缺陷 ④酸溶血试验（acid hemolysis test or Ham test） ⑤蔗糖水溶血试验（sucrose lysis test） ⑥热溶血试验（heat hemolysis test） ⑦红细胞膜蛋白的十二烷基碳酸钠—聚丙烯酰胺凝胺电泳（SDS——PAGE） ①红细胞渗透脆性试验（ertythrocyte osmotic fragitity test） ①红细胞渗透脆性试验（ertythrocyte osmotic fragitity test） 【正常参考值】 开始溶血0.42-0.46%（4.2-4.6g/L）（NaCL液） 完全溶血0.28-0.34%（2.8-3.4g/L）（NaCL液） ①红细胞渗透脆性试验（ertythrocyte osmotic fragitity test） 【临床意义】患者与正常对照相差（提高）0.04g/L（NaCL液）以上即为阳性。见于 u遗传性球形红细胞增多症 v遗传性椭圆细胞增多症 w自身免疫性溶血性贫血伴球形红细胞增多症 ②湿孵育后渗透脆性试验（incubated osmotic fragitity test） 【原理】Diace 法，原理与简易法相似，但所用血液标本量更少（血：试剂=1：100）以减少血液对渗透压和离子强度的影 响。经37℃24小时孵育，以消耗红细胞的ATP和能量。此后再与磷酸盐缓冲体系配成pH7.4系列低渗盐水混合，经定温、定 时作用后，以540nm比色，绘制曲线，得出中间脆性（50%溶血度） ②湿孵育后渗透脆性试验（incubated osmotic fragitity test） 【正常结果及参考值】 曲线：乙字形，上下对称 中间脆性：0.465-0.590% （4.65-5.90g/L）（NaCL液） （incubated osmotic fragitity test） 【临床意义】所得曲线在正常曲线的右侧，或中间脆性在6.0g/L（NaCL液）以上为脆性明显增加，见于遗传性球形红细胞 增多症及遗传性椭圆形红细胞增多症。本法较简易法敏感，对轻型者尤有诊断价值。此外，丙酮酸激酶缺乏症等酶缺陷性溶 血性贫血患者孵育后脆性亦增加 ③自身溶血试验及纠正试验（autohemotysis and correction test） 【原理】本试验原理与孵育试验相似，但不加低渗盐水。观察不加纠正物（以生理盐水代替）和加纠正物（葡萄糖或 ATP）的红细胞在自身血浆中溶血程度。红细胞对阳离子的运转需要能量，经孵育的红细胞消耗能量ATP储备量减少，钠离 子在细胞内储积，细胞体积增大而易于破裂 【正常参考值】 48小时内不加纠正物的溶血度为<3.5% 加葡萄糖的溶血度为<1.0% 加ATP的溶血度为< 1.0% 【临床意义】遗传性球形红细胞增多症自身溶血显著增强，葡萄糖和ATP都能明显纠正。其他溶血性疾病自身溶血阳性者 Dacie意见称为先天性非球形细胞性溶血性贫血（Congenital nonspherocytic hemolytic anemia，CNHA），并分为两型；I 型者自身溶血试验正常或轻度增加（3-6%），加入葡萄糖可使溶血纠正；II型者自身溶血显著增强（7-35%），加入葡萄糖 不能纠正，加入ATP能纠正 ④酸溶血试验（acid hemolysis test or Ham’s test） 【原理】本试验亦称Ham试验 阵发性睡眠性血红蛋白尿（PNH）患者的红细胞膜对补体非常敏感，在酸性（pH6.4-6.5） 条件下，经孵育能被正常人新鲜血清（含有补体）所溶解，不能被正常人灭活血清（无补体）溶解 【正常结果】阴性 【临床意义】阳性见于PNH，确诊意义大！ ⑤蔗糖溶血试验（sucrose lysis test） 【原理】本试验的原理与酸溶血试验相似。蔗糖溶液离子浓度低，经孵育加强补体与红细胞膜的结合，使补体敏感细胞溶 血 【正常结果】阴性 【参考值】溶血度<1% 【临床意义】阳性见于PNH。轻度阳性或溶血度1-5%亦可见于部分巨幼细胞性贫血，再生障碍性贫血、自身免疫性溶血性 贫血和遗传性球形红细胞增多症。此试验可做PNH的筛选试验，阴性可排除PNH，阳性应再做酸溶血试验证实 ⑥热溶血试验（heat hemolysis test）
【原理】原理同酸溶血试验利用患者自己血清中的补体和葡萄糖，经孵育使糖分解酸化，使补体敏感细胞溶解 阴性 阳性见于PNH 遗传性球形红细胞增多症 目身免设性溶血性贫 本试验用 ①高铁血红蛋白还原试验 原理】G-6-PD在 路 蓝（递气体)'和高铁血红蛋白还原酶的作用下使言铁血红蛋白暗棕色)还原为血红蛋白红色 在美 试验时先将亚硝酸钠与血液(Hb)混合形成高铁血红蛋白，在提供足量的葡萄糖的条件下孵育，再测定标本中残余的高铁 血红蛋白量 光电色 和参考红色 还原率>75% 细胞化学洗脱法： 空影细胞<2% ②化物 【原理】先使Hb与空气充分混合形成氧合血红蛋白(Hb02),抗坏血酸钠与Hb02反应过程中可产生过氧化室(H202), 氰化钠能抑 胞过化里海以保护H2○2不微吸，从而与还原型合洗日(GH)作用产生化型合洗日 还原成GSH,若红细胞中提供NADPHE的璃（如G6-PD)缺乏则 02P 【正常 标木红性 【临床意义】阳性（标本呈棕色），本试验是较为敏感的筛选试验 阳性为 杂合 谷胱甘肽过氧化酶缺陷等 ③硝基四氨唑蓝试验 【正常结果和参考值】 定性（纸片法） 紫自 定量（分光光度计比色 6.7-20.5NBT单位 【原理】G6及 剂中 0中m有收峰 酸盐(G6P)转变为6-磷酸葡萄糖(6GP),又使NADP生成NADPH,后者在紫外线 【正常结果和参考值】 :2.8-7.3U1gH 【临床意义 G-6-PD缺陷症患者无荧光点<2.8IU/gHb .6 IU/gH 【原理】PK在糖酵解途径中催化磷酸烯式丙酮酸(PEP)转为丙酮酸，再由乳酸脱室酶(LDH)催化，将其转为乳酸，同 时促使NADH变为NAD.NADH在紫外线下发生荧光，在324nm处有一吸收峰，而NAD没有 正常结果和 专值】 点消铁 【临床意义】阳性(60min取液点样仍有荧光可见)或定量<10ugHb者 L于传性PK缺格征 某些获得性PK缺陷（如粒细胞白血病，骨髓增殖异常综合症） (三)珠蛋白合成异常 ①血红蛋白电泳(hemoglolin electrophoresis)
【原理】原理同酸溶血试验 利用患者自己血清中的补体和葡萄糖，经孵育使糖分解酸化，使补体敏感细胞溶解 【正常结果】阴性 【临床意义】 阳性见于PNH 遗传性球形红细胞增多症 自身免疫性溶血性贫血 (阳性率比PNH为低) 本试验用于PNH筛选试验 （二）红细胞酶缺陷 ①高铁血红蛋白还原试验 【原理】G-6-PD在戊糖旁路中使6-磷酸葡萄糖变成6-磷酸葡萄糖酸，同时催化氧化型辅酶II（NADP）形成还原型辅酶II （NADPH），再使氧化型谷胱甘肽（GSSG）形成还原型谷胱甘肽（GSH）。NADPH是高铁血红蛋白还原酶的辅酶，在美 蓝（递氢体）和高铁血红蛋白还原酶的作用下使高铁血红蛋白（暗棕色）还原为血红蛋白（红色） 试验时先将亚硝酸钠与血液（Hb）混合形成高铁血红蛋白，在提供足量的葡萄糖的条件下孵育，再测定标本中残余的高铁 血红蛋白量 【正常结果和参考值】 目测法：阴性（标本呈红色） 光电比色法：还原率>75% 细胞化学洗脱法：空影细胞<2% ②氰化物——抗坏血酸盐试验 【原理】先使Hb与空气充分混合形成氧合血红蛋白（HbO2），抗坏血酸钠与HbO2反应过程中可产生过氧化氢（H2O2）， 氰化钠能抑制细胞过氧化氢酶以保护H2O2不被破坏，从而与还原型谷胱甘肽（GSH）作用产生氧化型谷胱甘肽 （GSSG），后者需要还原型辅酶II（NADPH）使其再还原成GSH，若红细胞中提供NADPH的酶（如G-6-PD）缺乏则 GSH减少，H2O2储积，氧化HbO2成为棕色的高铁血红蛋白 【正常结果】阴性 （标本呈鲜红色） 【临床意义】阳性（标本呈棕色），本试验是较为敏感的筛选试验 阳性为 G-6-PD缺陷症纯合子型、杂合子型 戊糖旁路中G-6-PD以外的酶缺陷 GSH缺乏症 谷胱甘肽过氧化酶缺陷等 ③硝基四氮唑蓝试验 【正常结果和参考值】 定性（纸片法）：紫色 定量（分光光度计比色法）： 6.7-20.5NBT单位 ④G6PD的荧光点及紫外分光法测定 【原理】G-6-PD使试剂中葡萄糖6-磷酸盐（G6P）转变为6-磷酸葡萄糖（6GP），又使NADP生成NADPH，后者在紫外线 激发下发生荧光，在340nm有一吸收峰 【正常结果和参考值】 荧光点法：有荧光点 紫外线分光光度计法：2.8-7.3 IU/gHb 【临床意义】 G-6-PD缺陷症患者无荧光点 <2.8IU/gHb 杂合子型为0.6-2.8IU/gHb 纯合子型为<0.6 IU/gHb ⑤丙酮酸激酶的荧光点及紫外分光法测定 【原理】PK在糖酵解途径中催化磷酸烯式丙酮酸（PEP）转为丙酮酸，再由乳酸脱氢酶（LDH）催化，将其转为乳酸，同 时促使NADH变为NAD。NADH在紫外线下发生荧光，在324nm处有一吸收峰，而NAD没有 【正常结果和参考值】 荧光点法：阴性（荧光点消失） 紫外分光法：10.0-20.1u/gHb 【临床意义】阳性（60 min取液点样仍有荧光可见）或定量<10u/gHb者 见于遗传性PK缺陷症 某些获得性PK缺陷（如粒细胞白血病，骨髓增殖异常综合症） （三）珠蛋白合成异常 ①血红蛋白电泳（hemoglolin electrophoresis） 【原理】是利用各种血红蛋白（包括正常和异常Hb）等电点不同的原理，血红蛋白在一定pH缓冲液中带不同电荷。缓冲液 pH大于等电点则Hb带负电荷，反之则带正电荷。将除去杂质（细胞膜，基质蛋白及脂溶性物质）的Hb液点样于置于电泳仪