第三节蛋白质的鉴定 一、蛋白质分子量的测定 (一)SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 SDS-PAGE 变性电泳 在巯基乙醇存在下，蛋白质亚基分开，多 肽链伸展；然后SDS与多肽链以1.4：1的重量 比结合成复合物
第三节 蛋白质的鉴定 一、蛋白质分子量的测定 （一）SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 SDS－PAGE 变性电泳 在巯基乙醇存在下， 蛋白质亚基分开，多 肽链伸展；然后SDS与多肽链以1.4:1的重量 比结合成复合物
SDS与蛋白质的结合改变了蛋白质分 子的带电情况和分子形状 因此当蛋白质在电场中移动时，其迁 移率仅与其分子量有关
SDS与蛋白质的结合改变了蛋白质分 子的带电情况和分子形状 因此当蛋白质在电场中移动时，其迁 移率仅与其分子量有关
蛋白质分子量M与迁移率u的关系式： LogM=a-bμu 用已知分子量的标准蛋白在同样条件下 电泳，分别测其迁移率，做成标准曲线。 测出未知蛋白质的迁移率，从图上查得蛋 白质分子量
蛋白质分子量M与迁移率的关系式： Log M = a - b 用已知分子量的标准蛋白在同样条件下 电泳，分别测其迁移率，做成标准曲线。 测出未知蛋白质的迁移率，从图上查得蛋 白质分子量
Myosin 200,000 B-Galactosidase 116,250 Phosphorylase b 97,400 Bovine serum albumin 66,200 Ovalbumin 45,000 Carbonic anhydrase 31,000 Unknown protein Soybean trypsin inhibitor 21,500 Lysozyme 14,400 Mr Unknown standards protein Relative migration (a) h
SDS-PAGE测定蛋白质分子量的特点： 蛋白质已变性； 对多亚基蛋白，测定的是亚基的分子量
SDS-PAGE测定蛋白质分子量的特点： 蛋白质已变性； 对多亚基蛋白，测定的是亚基的分子量