第二节蛋白质的分离纯化 一、蛋白质分离提纯的一般原则 高纯度、高活性、高回收率
第二节 蛋白质的分离纯化 一、蛋白质分离提纯的一般原则 高纯度、高活性、高回收率
二、蛋白质的分离方法 (一)根据分子大小不同的分离方法 l.透析(dialysis)和超滤(ultrafiltration) 半透膜(玻璃纸,火棉纸) 透析常用于蛋白质溶液的除盐 超滤常用于蛋白质溶液的除盐、浓缩
二、蛋白质的分离方法 1.透析(dialysis)和超滤(ultrafiltration) 半透膜 (玻璃纸,火棉纸) 透析常用于蛋白质溶液的除盐 超滤常用于蛋白质溶液的除盐、浓缩 (一)根据分子大小不同的分离方法
2.密度梯度离心 (density gradient ultracentrifugation) 常见有蔗糖密度梯度(连续、不连续) 质量和密度大的蛋白质分子沉降快
2. 密度梯度离心 (density gradient ultracentrifugation) 常见有蔗糖密度梯度(连续、不连续) 质量和密度大的蛋白质分子沉降快
Shallow Sample layered sucrose on gradient gradient Ultracentri- fugation Tube punctured, fractions collected Fastest Slowest sedimenting sedimenting fraction fraction
3.凝胶过滤(gel filtration chromatography) 分子筛层析,分子排阻层析 Sephadex G-50分离范围:1500-30000 交联葡聚糖 (Sephadex) 聚丙烯酰胺凝胶(Bio-GelP) 琼脂糖凝胶 (Sepharose,Bio-GelA)
3.凝胶过滤(gel filtration chromatography) 分子筛层析,分子排阻层析 Sephadex G-50 分离范围:1 500-30 000 交联葡聚糖 (Sephadex) 聚丙烯酰胺凝胶 (Bio-Gel P) 琼脂糖凝胶 (Sepharose,Bio-Gel A)