PCR基因组DNA获取特定DNA片段扩增特定DNA片段
16 基因组DNA 获取特定DNA片段 扩增特DN定A 片段 PCR
PCR的基本原理DNA模板DNA引物dNTPTaqDNA聚合酶
17 PCR的基本原理 DNA模板 DNA引物 dNTP TaqDNA聚合酶
易错PCR技术334590℃变性解链5'3'3y25第一次循环与引物退火，50℃5°3311155'1133°5引物及延伸，75℃532SXXJTTT3345+90℃变性解链进入第二次循环
19 易错PCR技术
2V方法：V降低一种dNTP的量（降至5%-10%）V加入dITP来代替被减少的dNTPV缓冲液中另加0.5mmo1/LMn2+V提高Mg2+浓度
20 v方法： v降低一种dNTP的量（降至5％-10％） v加入dITP来代替被减少的dNTP v缓冲液中另加0.5mmol/L Mn2+ v提高Mg2+浓度
·优点：简便，随机突变丰富·缺点：正突变率低，突变基因文库大，筛选工作量大。适用于较小基因的定向进化
21 • 优点：简便，随机突变丰富 • 缺点：正突变率低，突变基因文库大，筛 选工作量大。 • 适用于较小基因的定向进化