随机突变+定向选择目标突变体最适生长温度提高了!诱发突变的因素50C培细菌养选择压最适生长温突变体温度耐受型力(温度为37℃库突变体度)
11 随机突变+定向选择=目标突变体 细菌 诱发突变的 因素 50 0 C培 养 突变体 库 选择压 力(温 度) 温度耐受型 突变体 最适生长温 度为37 0 C 最适生长温度提高了!
酶分子改造:化学修饰,定点突变·对酶分子的研究可以分为认识和改造两个方面,前者是利用各种生物化学,晶体学光谱学等方法对天然酶或其突变进行研究,获得酶分子特征,空间结构和功能之间的关系以及氨基酸残基功能等方面的信息,以此为依据对酶分子进行改造,成为酶分子的合理设计。如化学修饰,定点突变等
12 • 对酶分子的研究可以分为认识和改造两个方面,前 者是利用各种生物化学,晶体学光谱学等方法对天 然酶或其突变进行研究,获得酶分子特征,空间结 构和功能之间的关系以及氨基酸残基功能等方面的 信息,以此为依据对酶分子进行改造,成为酶分子 的合理设计。如化学修饰,定点突变等。 酶分子改造: 化学修饰,定点突变
澄清一个事实:定向进化不是定点突变·定向进化:突变筛选突变位点是随机的,不确定的;突变位点的数目也是不确定的;突变的效应更是不可预知的理论上讲,凡是能够引起突变的因素(物理的,化学的,生物的)都可以应用于定向进化中突变体的产生。·定点突变:突变位点是确定的,突变的个数也是预知的突变的效应可能是已知的,也可能是未知的;定点突变的方法一般是以PCR技术为基础的
13 澄清一个事实:定向进化不是定点突变 • 定向进化:突变 筛选 突变位点是随机的,不确定的; 突变位点的数目也是不确定的; 突变的效应更是不可预知的; 理论上讲,凡是能够引起突变的因素(物理的,化学的, 生物的)都可以应用于定向进化中突变体的产生。 • 定点突变: 突变位点是确定的,突变的个数也是预知的; 突变的效应可能是已知的,也可能是未知的; 定点突变的方法一般是以PCR技术为基础的
2. 定向进化的基本过程随机突变构建突变基因文库定向筛选
14 2. 定向进化的基本过程 • 随机突变 • 构建突变基因文库 • 定向筛选
2. 1 随机突变易错PCR技术DNA 重排技术(DNAShuffling)基因家族重排技术
15 2.1 随机突变 •易错PCR技术 • DNA 重排技术(DNA Shuffling) • 基因家族重排技术