6.用蒸馏水洗净盛醚瓶底壁(注意勿使水溅入瓶内)。7.将盛粗脂肪的盛醚瓶置于100—105℃烘箱内烘干，大约需1-2h，初烘时烘箱门半开，以免醚气燃烧起火。烘干时间因样本中粗脂肪含量的多少而变化，不宜固定，以达到恒重为准。将盛醚瓶移入干燥器中，冷却30min后称重，直至恒重为止。盛醚瓶增加的重量即为样本的粗脂肪量(注4)。为使测定结果准确，应同时测定试剂空白试验，以作校正。(六)结果与计算方法粗脂肪重 (g)样本中粗脂肪含量%=X100样本重(g)W2-W,式中：W=样本重(即测定饲料干物质的样本重量)(g)Wi=盛醚瓶重量(g)W2=盛醚瓶与粗脂肪重量（g）(七)注意事项1，乙醚易燃烧，在用乙醚提取时，实验室内严禁点酒精灯、擦火柴、吸烟等，以防着2，盛醚瓶称重前后的取放，宜用钳或垫纸张，不宜用手直接接触，以免将手上油汗沾染盛醚瓶，影响测定结果。3．包扎样本时，应先将手洗净，以免影响结果。4.滤纸和棉线或特制滤纸筒仍可继续使用，但应保持清洁。防止污染，以免影响测定结果。注1：索氏测定脂肪法与饲料中其它营养成分概略测定法同样，准确度亦不够高。植物种子的乙醚提取物中真脂肪有86%，青饲料的乙醚提取物中真脂肪量极少，大部分为叶绿注2：鲜肉类(猪肉、鸡肉、鱼肉等)中脂肪测定前须先烘去肉中水分。具体方法如下：称取磨碎鲜肉样约10g放在铺有少量石棉的滤纸筒或滤纸上，用小棒混匀，将滤纸筒或滤纸移入瓷盘或铝厘中，在100一105℃烘箱内烘6h。（烘去鲜肉中水分)，取出瓷盘或铝厘，冷却后，用棉线包扎滤纸包，以下步骤按照饲料中脂肪测定法进行。主3：估计样本中所含脂肪在20%以上时，浸提时间需16h，5--20%时，需12h5%以下时则需 8h。注4：样本中粗脂肪量亦可根据样本滤纸包经乙醚提取前后的失重来计算。方法如下：样本中粗脂肪含量%样本滤纸包经乙醚提取前重（g）一一样本滤纸包经乙醚提取后重（g）X100样本重(g)样本滤纸包经乙醚提取后放入一个干净的已知重量的称重瓶中，在100一105℃烘箱内烘1一2h，在干燥器中冷却，称重，直至恒重。经乙醚提取后的滤纸包在称重时容易吸收空气中湿度，影响包重，因此操作宜迅速。11
11 6．用蒸馏水洗净盛醚瓶底壁(注意勿使水溅入瓶内)。 7．将盛粗脂肪的盛醚瓶置于 100—105℃烘箱内烘干，大约需 1—2h，初烘时烘箱门半 开，以免醚气燃烧起火。烘干时间因样本中粗脂肪含量的多少而变化，不宜固定，以达到 恒重为准。将盛醚瓶移入干燥器中，冷却 30min 后称重，直至恒重为止。盛醚瓶增加的重 量即为样本的粗脂肪量(注 4)。为使测定结果准确，应同时测定试剂空白试验，以作校正。 (六)结果与计算方法 粗脂肪重（g） 样本中粗脂肪含量％ = ×100 样本重（g） W2－Ｗ1 = ×100 Ｗ 式中：W=样本重(即测定饲料干物质的样本重量) (g) W1=盛醚瓶重量(g) W2=盛醚瓶与粗脂肪重量（g） (七)注意事项 1，乙醚易燃烧，在用乙醚提取时，实验室内严禁点酒精灯、擦火柴、吸烟等，以防着 火。 2，盛醚瓶称重前后的取放，宜用坩埚钳或垫纸张，不宜用手直接接触，以免将手上油 汗沾染盛醚瓶，影响测定结果。 3．包扎样本时，应先将手洗净，以免影响结果。 4．滤纸和棉线或特制滤纸筒仍可继续使用，但应保持清洁。防止污染，以免影响测定 结果。 注 1：索氏测定脂肪法与饲料中其它营养成分概略测定法同样，准确度亦不够高。植物 种子的乙醚提取物中真脂肪有 86％，青饲料的乙醚提取物中真脂肪量极少，大部分为叶绿 素。 注 2：鲜肉类(猪肉、鸡肉、鱼肉等)中脂肪测定前须先烘去肉中水分。具体方法如下： 称取磨碎鲜肉样约 10g 放在铺有少量石棉的滤纸筒或滤纸上，用小棒混匀，将滤纸筒或滤 纸移入瓷盘或铝匣中，在 l00—105℃烘箱内烘 6h。(烘去鲜肉中水分)，取出瓷盘或铝匣， 冷却后，用棉线包扎滤纸包，以下步骤按照饲料中脂肪测定法进行。 注 3：估计样本中所含脂肪在 20％以上时，浸提时间需 16h，5-20％时，需 12h,5％以 下时则需 8h。 注 4：样本中粗脂肪量亦可根据样本滤纸包经乙醚提取前后的失重来计算。方法如下： 样本中粗脂肪含量％ 样本滤纸包经乙醚提取前重（g）－ 样本滤纸包经乙醚提取后重（g） = ×１００ 样本重(g) 样本滤纸包经乙醚提取后放入一个干净的已知重量的称重瓶中，在 l00—105℃烘箱内 烘 1—2h，在干燥器中冷却，称重，直至恒重。经乙醚提取后的滤纸包在称重时容易吸收 空气中湿度，影响包重，因此操作宜迅速
思考1.盛有粗脂肪的盛醚瓶在100—105℃烘箱内的时间为什么不能过长？过长是否会影响测定结果？2．脂肪包的长度为何不能超过虹吸管的高度？实验八饲料中粗纤维的测定（粪中粗纤维的测定用同一方法）目的掌握饲料中粗纤维测定方法，并用以测定各类饲料的粗纤维含量原理饲料中粗纤维的常规测定方法是在强行规定的一定条件下测定。内容如下：将脱脂饲料的样本，经用一定容量和一定浓度的预热硫酸和氢氧化钠溶液煮沸一定时间，继续用乙醇处理，这样除去样本中可溶于酸、碱、醇的物质，再减去样本中矿物质量，求得剩余残渣量。此类残渣称之为粗纤维，其中以纤维素为主，并有少量半纤维素和木质在用此法处理饲料时，硫酸可水解饲料中全部淀粉和大部分半纤维素，并可水解部分饲料中蛋白质，溶解部分碱性矿物质及植物碱。碱处理饲料可水解饲料中大部分蛋白质、除去脂肪，并溶解酸不能溶解的全部半纤维素和水解饲料中大量木质素。酒精处理饲料可溶解饲料中的树脂、单宁和色素以及剩余的脂肪和蜡。饲料中粗纤维的测定方法并非一个精确方法，所测结果只是一个在公认的强制条件下测定的数值。测定饲料中粗纤维的含量(%)受饲料样本细度差异的影响。粗纤维并不是个固定的或明确的)化学实体。在测定粗纤维过程中相当数量的木质素（碳水化合物成分中情性最大的一种）溶入煮沸的氢氧化钠溶液，因而饲料中部分木质素并不包括在饲料粗纤维的测定数值内，而被计算入饲料的无氮浸出物结果中。由此可见所测出的饲料粗纤维不包括饲料中全部最粗糙的有机物质。由于粗纤维本身是在强制规定下测得的概略养分，目前尚无更好的测定粗纤维的方法因此现时已改用中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维测定法代替粗纤维测定法的趋势。但在大部分地区的饲料概略营养成分测定法中仍沿用粗纤维测定法(三)仪器名称及需要量1.一个学员做2个测定所需仪器数量烧杯外阶价珍诊玲阶价价质防500ml玻璃盖(盖三角瓶或烧杯用)古氏带盖30ml古氏垫6cm直径布氏漏斗小匙勺橡胶质500ml16cm 长烧杯50mm量筒200ml干燥器30cm直径分析天平味滤布12
12 思 考 题 1．盛有粗脂肪的盛醚瓶在 l00—105℃烘箱内的时间为什么不能过长? 过长是否会影 响测定结果? 2．脂肪包的长度为何不能超过虹吸管的高度? 实验八 饲料中粗纤维的测定 (粪中粗纤维的测定用同一方法) （一） 目的 掌握饲料中粗纤维测定方法，并用以测定各类饲料的粗纤维含量。 （二） 原理 饲料中粗纤维的常规测定方法是在强行规定的一定条件下测定。内容如 下：将脱脂饲料的样本，经用一定容量和一定浓度的预热硫酸和氢氧化钠溶液煮沸一定时 间，继续用乙醇处理，这样除去样本中可溶于酸、碱、醇的物质，再减去样本中矿物质量， 求得剩余残渣量。此类残渣称之为粗纤维，其中以纤维素为主，并有少量半纤维素和木质 素。 在用此法处理饲料时，硫酸可水解饲料中全部淀粉和大部分半纤维素，并可水解部分 饲料中蛋白质，溶解部分碱性矿物质及植物碱。碱处理饲料可水解饲料中大部分蛋白质、 除去脂肪，并溶解酸不能溶解的全部半纤维素和水解饲料中大量木质素。酒精处理饲料可 溶解饲料中的树脂、单宁和色素以及剩余的脂肪和蜡。 饲料中粗纤维的测定方法并非一个精确方法，所测结果只是一个在公认的强制条件下 测定的数值。测定饲料中粗纤维的含量(％)受饲料样本细度差异的影响。粗纤维并不是一 个固定的(或明确的)化学实体。在测定粗纤维过程中相当数量的木质素（碳水化合物成分 中惰性最大的一种）溶入煮沸的氢氧化钠溶液，因而饲料中部分木质素并不包括在饲料粗 纤维的测定数值内，而被计算入饲料的无氮浸出物结果中。由此可见所测出的饲料粗纤维 不包括饲料中全部最粗糙的有机物质。 由于粗纤维本身是在强制规定下测得的概略养分，目前尚无更好的测定粗纤维的方法， 因此现时已改用中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维测定法代替粗纤维测定法的趋势。但在大部 分地区的饲料概略营养成分测定法中仍沿用粗纤维测定法。 (三)仪器名称及需要量 1．一个学员做 2 个测定所需仪器数量 烧杯 500ml 2 个 玻璃盖(盖三角瓶或烧杯用) 2 个 古氏坩埚 带盖 30ml 2 支 古氏坩埚垫 2 个 布氏漏斗 6cm 直径 2 个 小匙勺 橡胶质 2 个 洗瓶 500ml 2 个 玻棒 16cm 长 2 个 烧杯 50mm 1 个 量筒 200ml 1 个 干燥器 30cm 直径 1 个 分析天平 1 架 滤布 2 方
2.公用仪器数量1/4匹马力拍价快价理真空抽气机烧杯1000ml电热板量筒200ml外恨个冶冶橡皮管壁厚0.50.7cm直径3cm定时钟烘箱茂福炉（四）药品名称及需要量一个学员做2个测定所需药品数量硫酸溶液：400ml，0.255±0.005N，每100ml含1.25g纯硫酸。溶液浓度须用NaOH标准溶液准确标定，以甲基橙为指示剂400ml，0.313±0.005N，每100ml含1.25g氢氧化钠，须不含或含氢氧化钠溶液：微量碳酸钠。溶液浓度必须用滴定法准确标定。标定方法如下：在玻璃杯中称取已于100℃烘箱内烘1小时的邻苯二甲酸氢钾KHCsH404(分析纯)4-6g(准称至小数点后3位数)，加蒸馏水 100ml，在电热板上加热，并加2滴酚酞指示剂。用NaOH溶液滴定，由无色变为淡红色为止。KHCH,O (g)1Na0H 溶液浓度 N=1000×KHCsH4O4克当量（204.2g）NaOH溶液用量（ml）石棉制备：将中等长度的酸洗涤石棉薄铺在蒸发皿中，放入600℃茂福炉中烧灼16h，用配制的1.25%HSO4浸没石棉，煮沸30min，过滤，用蒸馏水洗净酸。同样用1.25%NaOH煮沸30min，过滤，用蒸馏水洗净碱。烘干，放入600℃茂福炉中烧灼2h，烧去有机物质。Ig石棉经酸、碱处理的空白试检，测得的粗纤维含量极微小(约1mg)。乙醇95%50ml红色、蓝色各2方石蕊试纸防泡沫剂2滴水与石油醚(1十4)混合(五)操作步骤1.取2g经乙醚提去脂肪的样本（如样本中粗脂肪含量<1%，不需经乙醚提取)或测定脂肪后的样本，全部移入500ml三角瓶中。滤纸如粘附样本细粒，可用毛刷刷净。在三角瓶中加煮沸的 0.255N 硫酸液200ml(注 1)和一滴防泡沫剂(不宜过多，过多使测定结果偏高)。用蜡笔在液面处划一刻度线,在三角瓶口加表玻璃盖或连接回流冷凝管(注2)。3．将三角瓶立即放在电热板上加热，使瓶内液体1min内煮沸。继续微沸30min，每隔5min摇动三角瓶一次，以充分混合瓶内物质。但须避免饲料粘贴在液面以上的瓶壁。在加热过程中溶液如有蒸发，应添加煮沸蒸馏水至三角瓶200ml刻度处。30min后应立即移开三角瓶，随后用铺有滤布的布氏漏斗过滤。调节漏斗抽气速度，使 200ml滤液在10min内全部滤净(如超过10min应重新测定)。再以拂水洗涤三角瓶与残渣(先用50ml沸水，继续再用50ml沸水洗涤三次)，直至滤液用石蕊试纸检查呈中性反应为止(用蓝色石蕊试纸检查)。5.用200ml煮沸的0.313N氢氧化钠溶液冲洗滤布上的残渣至原三角瓶内（先用小匙勺将滤布上的残渣尽量刮入三角瓶内），而后将滤布移入50ml小烧杯。杯中加少量煮沸的13
13 2．公用仪器数量 真空抽气机 1/4 匹马力 1 台 烧杯 1000ml 1 个 电热板 1 块 量筒 200ml 2 个 橡皮管 壁厚 0.5—0.7cm 直径 3cm 1 根 定时钟 1 个 烘箱 1 台 茂福炉 1 台 （四）药品名称及需要量 一个学员做 2 个测定所需药品数量 硫酸溶液： 400ml，0.255±0.005N，每 100ml 含 1.25g 纯硫酸。溶液浓度须用 NaOH 标准溶液准确标定，以甲基橙为指示剂， 氢氧化钠溶液： 400ml，0.313±0.005N，每 100ml 含 1.25g 氢氧化钠，须不含或含 微量碳酸钠。溶液浓度必须用滴定法准确标定。标定方法如下： 在玻璃杯中称取已于 100℃烘箱内烘 1 小时的邻苯二甲酸氢钾 KHC8H404(分析纯)4— 6g(准称至小数点后 3 位数)，加蒸馏水 100ml，在电热板上加热，并加 2 滴酚酞指示剂。 用 NaOH 溶液滴定，由无色变为淡红色为止。 KHC8H4O4（g） １ NaOH 溶液浓度 N＝1000× × KHC8H4O4 克当量（204.2g） NaOH 溶液用量（ml） 石棉制备：将中等长度的酸洗涤石棉薄铺在蒸发皿中，放入 600℃茂福炉中烧灼 16 h，用配制的 1.25％H2SO4 浸没石棉，煮沸 30min，过滤，用蒸馏水洗净酸。同样用 1.25％ NaOH 煮沸 30min，过滤，用蒸馏水洗净碱。烘干，放入 600℃茂福炉中烧灼 2h，烧去有 机物质。lg 石棉经酸、碱处理的空白试检，测得的粗纤维含量极微小(约 1mg)。 乙醇 95％ 50ml 石蕊试纸 红色、蓝色 各 2 方 防泡沫剂 水与石油醚(1 十 4)混合 2 滴 (五)操作步骤 1．取 2g 经乙醚提去脂肪的样本(如样本中粗脂肪含量<1％，不需经乙醚提取)或测 定脂肪后的样本，全部移入 500ml 三角瓶中。滤纸如粘附样本细粒，可用毛刷刷净。 2．在三角瓶中加煮沸的０.255N 硫酸液 200ml(注 1)和一滴防泡沫剂(不宜过多，过多 使测定结果偏高)。用蜡笔在液面处划一刻度线,在三角瓶口加表玻璃盖或连接回流冷凝管 (注 2)。 3．将三角瓶立即放在电热板上加热，使瓶内液体 1min 内煮沸。继续微沸 30min，每 隔 5min 摇动三角瓶一次，以充分混合瓶内物质。但须避免饲料粘贴在液面以上的瓶壁。 在加热过程中溶液如有蒸发，应添加煮沸蒸馏水至三角瓶 200ml 刻度处。 4，30min 后应立即移开三角瓶，随后用铺有滤布的布氏漏斗过滤。调节漏斗抽气速 度，使 200ml 滤液在 10min 内全部滤净(如超过 10min 应重新测定)。再以拂水洗涤三角瓶 与残渣(先用 50ml 沸水，继续再用 50ml 沸水洗涤三次)，直至滤液用石蕊试纸检查呈中性 反应为止(用蓝色石蕊试纸检查)。 5．用 200ml 煮沸的 0.313N 氢氧化钠溶液冲洗滤布上的残渣至原三角瓶内(先用小匙勺 将滤布上的残渣尽量刮入三角瓶内)，而后将滤布移入 50ml 小烧杯。杯中加少量煮沸的
0.313N氢氧化钠液，用玻棒拨动布上残渣使全部移入三角瓶内为止。最后将煮沸氢氧化钠溶液加至200ml刻度处，在三角瓶口加表玻璃盖(或连接回流冷凝管）。6．立即将三角瓶放在电热板上，在1min内煮沸，重复步骤3、4。在洗涤过程中可先用25ml煮沸的0.255N硫酸液，再用50ml沸水洗涤残渣三次，直至洗液用石蕊试纸检查呈中性为止(用红色石蕊试纸检查)，7.在抽滤瓶上安装一个致密薄层石棉的古氏埚（注3)8.将滤布上的残渣全部移入古氏埚，进行方法同步骤5，只是不用氢氧化钠液，而用蒸馏水冲洗，用抽滤瓶抽去古氏埚中的水。9.再以25ml乙醇冲洗埚中的残渣。10.将埚及内容物放入100—105℃烘箱内烘干，烘至恒重，约3h，或130℃烘箱内烘2h。11.将盖半开，置电炉上用小火慢慢炭化至无烟，然后将移入茂福炉600士15℃中灼烧，至残渣中含炭物质全部烧尽，约30min，再将移入干燥器内冷却称重，直至恒重。(六)结果与计界方法粗纤维重（g)W1-W2样本中粗纤维含量%X100X100w样本重（g）式中：W=样本重(g)W=增埚及内容物在烘箱内烘干后的重量(g)W2=灰化后埚及内容物重量(g)(七)注解注1：能量饲料如玉米、大麦等淀粉含量高，在2g样本中加入0.5g处理过的石棉，再加硫酸溶液，便于过滤注2：为保持三角瓶中硫酸液的容量和浓度不变，瓶口装置冷凝管较为合适，以防水蒸气逸出和酸浓度增加注3：备制古氏锅时，将制备的石棉放入盛蒸馏水的玻璃瓶内，加水振摇玻瓶，使石棉成稀薄的悬液。将混匀的石棉悬液约20ml倒入埚内，使其中的水自动漏出，再用抽滤瓶抽干。将埚取下，用眼向有光处检查，如该埚内所铺石棉无小孔，即可使用；但石棉层不可太厚，以免不易过滤。R考顺1.饲料中粗纤维是在什么公认的规定条件下测定的？如果这些规定的条件有变动，所测得结果可否作为粗纤维含量，试说明其原因。2．纤维素和木质素的营养价值有何不同？3．粗纤维中含有哪三种主要组成成分?这三种组成成分是否全部在粗纤维内?酸性洗涤纤维含有哪两种重要成分?酸性洗涤纤维与粗纤维及真纤维有何不同？附：Van Soest 中性洗涤纤维(NDF)及酸性洗涤纤维(ADF)的测定方法饲料养分的常规测定法中存在的重要缺点之一，是测得饲料的粗纤维与无氮浸出物的14
14 0.313N 氢氧化钠液，用玻棒拨动布上残渣使全部移入三角瓶内为止。最后将煮沸氢氧化钠 溶液加至 200ml 刻度处，在三角瓶口加表玻璃盖(或连接回流冷凝管)。 6．立即将三角瓶放在电热板上，在 1min 内煮沸，重复步骤 3、4。在洗涤过程中可先 用 25ml 煮沸的 0.255N 硫酸液，再用 50ml 沸水洗涤残渣三次，直至洗液用石蕊试纸检查 呈中性为止(用红色石蕊试纸检查)， 7．在抽滤瓶上安装一个致密薄层石棉的古氏坩埚(注 3)。 8．将滤布上的残渣全部移入古氏坩埚，进行方法同步骤 5，只是不用氢氧化钠液，而 用蒸馏水冲洗，用抽滤瓶抽去古氏坩埚中的水。 9．再以 25ml 乙醇冲洗坩埚中的残渣。 10．将坩埚及内容物放入 100—105℃烘箱内烘干，烘至恒重，约 3h，或 130℃烘箱内 烘 2h。 11．将坩埚盖半开，置电炉上用小火慢慢炭化至无烟，然后将坩埚移入茂福炉 600± 15℃中灼烧，至残渣中含炭物质全部烧尽，约 30min，再将坩埚移入干燥器内冷却称重， 直至恒重。 (六)结果与计界方法 粗纤维重（g） Ｗ1－Ｗ2 样本中粗纤维含量%＝ ×100 ＝ ×100 样本重（g） Ｗ 式中：W=样本重(g) W1=坩埚及内容物在烘箱内烘干后的重量(g) W2=灰化后坩埚及内容物重量(g) (七)注解 注 1；能量饲料如玉米、大麦等淀粉含量高，在 2g 样本中加入 0.5g 处理过的石 棉，再加硫酸溶液，便于过滤。 注 2：为保持三角瓶中硫酸液的容量和浓度不变，瓶口装置冷凝管较为合适，以防水 蒸气逸出和酸浓度增加。 注 3：备制古氏坩锅时，将制备的石棉放入盛蒸馏水的玻璃瓶内，加水振摇玻瓶，使 石棉成稀薄的悬液。将混匀的石棉悬液约 20ml 倒入坩埚内，使其中的水自动漏出，再用 抽滤瓶抽干。将坩埚取下，用眼向有光处检查，如该坩埚内所铺石棉无小孔，即可使用； 但石棉层不可太厚，以免不易过滤。 思 考 题 1．饲料中粗纤维是在什么公认的规定条件下测定的？如果这些规定的条件有变动，所 测得结果可否作为粗纤维含量，试说明其原因。 2．纤维素和木质素的营养价值有何不同? ３．粗纤维中含有哪三种主要组成成分?这三种组成成分是否全部在粗纤维内?酸性洗 涤纤维含有哪两种重要成分?酸性洗涤纤维与粗纤维及真纤维有何不同？ 附：Van Soest 中性洗涤纤维(NDF)及 酸性洗涤纤维(ADF)的测定方法 饲料养分的常规测定法中存在的重要缺点之一，是测得饲料的粗纤维与无氮浸出物的
数值不能反映饲料的真实情况。测定时粗纤维不是一种纯化合物，而是几种化合物的混合物，其中主要组成是纤维素、半纤维素与木质素。纤维素与半纤维素具有相似的营养价值它们的营养价值对反台家畜较单胃家畜为高。木质素对全部家畜均不能被消化，但用常规法测定饲料的粗纤维时，饲料中仅有一部分半纤维素和木质素量包括在粗纤维的数值内，其余部分都被计算在无氮浸出物的数值中，且都被认为与糖和淀粉具有同样的消化性能。由此可见，常规法测得粗纤维的数值不能全部反映饲料中大部分的不消化成分由于上述原因，Van Soest 氏与其伙伴提出测定饲料中中性洗涤纤维与酸性洗涤纤维的方法，其具体内容如下1.中性洗涤纤维(NDF）称取饲料样本0.5-1.0g放入中性洗涤剂[3%十二烷基硫酸钠(Sodium LauryI Sulfate)缓冲液调节至pH值7.0]煮沸1h，过滤。溶于中性洗涤液中物质(NDS)包括饲料中细胞内容物的大部成分，主要有脂肪、糖、淀粉和蛋白质，这些物质的消化率均高，平均真实消化率达98%不溶中性洗涤液物质(存留在滤纸上的物质)称之为中性洗涤纤维(NDF)，即由植物细胞壁组成，它主要包括纤维素、半纤维素、木质素、硅酸和少量蛋白质。在常规粗略分析法中一定量的半纤维素和木质素由粗纤维中损失而被计算入无氨浸出物中。但在 VanSoest 法中半纤维素与木质素及纤维素均无损失，存在于中性洗涤纤维项内.酸性洗涤纤维（ADF)称取1.0g风干样本放入酸性洗涤溶液中（每升中含49.04g硫酸）加20g十六烷基三甲基溴化铵（CetyltrimetbylammInmbromide)煮沸lh过滤。不溶解的沉淀称之为酸性洗涤纤维(ADF)，主要包括纤维素，木质素和一定量硅酸。NDF 与ADF之差数即得出饲料中半纤维素量。为测定木质素，将ADF放入72%HSO4液中在15℃消化3h，过滤，洗涤沉淀，烘干，称至恒重后，再行灰化，留下的灰分即为饲料中硅酸量。烘干的沉淀量与灰化量之差数即为酸性洗涤木质素(ADL)或称为酸不溶木质素纤维素=ADF一ADL一灰分实验九个饲料中粗灰分(矿物质)的测定（畜体、畜产品、粪、尿中粗灰分的测定用同一方法）(一)目的掌握饲料中粗灰分(矿物质)测定法，并测定各种样本的粗灰分(矿物质)量。（二)原理、饲料中的灰分，即饲料中的矿物质或称无机盐，主要为钾、钠，钙、镁、硫、硅、磷，铁及其它微量元素。测定方法是，将饲料样本中有机物质的主要元素如氮、氢、氧、碳等在高温下(400一600℃)烧灼后被氧化而逸失，所剩残渣总称为“粗灰分”。粗灰分包括饲料中所含各种矿物质元素的氧化物和少量杂质，如粘土，砂石……等，纯灰分则不含杂质。杂质无营养价值。（三）仪器名称及需要量1.一个学员作2个测定所需枝侯住诊分析天平场(带盖)瓷质，容量50ml甘埚钳短柄干燥器30cm直径1个2.公用仪器数量18茂福炉带高温温度计电热板15
15 数值不能反映饲料的真实情况。测定时粗纤维不是一种纯化合物，而是几种化合物的混合 物，其中主要组成是纤维素、半纤维素与木质素。纤维素与半纤维素具有相似的营养价值， 它们的营养价值对反刍家畜较单胃家畜为高。木质素对全部家畜均不能被消化，但用常规 法测定饲料的粗纤维时，饲料中仅有一部分半纤维素和木质素量包括在粗纤维的数值内， 其余部分都被计算在无氮浸出物的数值中，且都被认为与糖和淀粉具有同样的消化性能。 由此可见，常规法测得粗纤维的数值不能全部反映饲料中大部分的不消化成分。 由于上述原因，Van Soest 氏与其伙伴提出测定饲料中中性洗涤纤维与酸性洗涤纤维 的方法，其具体内容如下： 1．中性洗涤纤维(NDF) 称取饲料样本０.5—1.0g 放入中性洗涤剂[3％十二烷基硫酸 钠(Sodium LauryI Sulfate)缓冲液调节至 pH 值 7.０]煮沸 1h，过滤。溶于中性洗涤液中物质 (NDS)包括饲料中细胞内容物的大部成分，主要有脂肪、糖、淀粉和蛋白质，这些物质的 消化率均高，平均真实消化率达 98％。 不溶中性洗涤液物质(存留在滤纸上的物质)称之为中性洗涤纤维(NDF)，即由植物细胞 壁组成，它主要包括纤维素、半纤维素、木质素、硅酸和少量蛋白质。在常规粗略分析法 中一定量的半纤维素和木质素由粗纤维中损失而被计算入无氨浸出物中。但在 VanSoest 法 中半纤维素与木质素及纤维素均无损失，存在于中性洗涤纤维项内。 2．酸性洗涤纤维(ADF)称取1.０g风干样本放入酸性洗涤溶液中(每升中含49.04g硫酸) 加 20g 十六烷基三甲基溴化铵(Cetyl trimetbyl ammonlnm bromide)煮沸 1h 过滤。不溶解的 沉淀称之为酸性洗涤纤维(ADF)，主要包括纤维素，木质素和一定量硅酸。 NDF 与 ADF 之差数即得出饲料中半纤维素量。 为测定木质素，将 ADF 放入 72％H2SO4 液中在 15℃消化 3h，过滤，洗涤沉淀，烘干， 称至恒重后，再行灰化，留下的灰分即为饲料中硅酸量。烘干的沉淀量与灰化量之差数即 为酸性洗涤木质素(ADL)或称为酸不溶木质素。 纤维素=ADF－ADL－灰分 实验九 饲料中粗灰分(矿物质)的测定 (畜体、畜产品、粪、尿中粗灰分的测定用同一方法) (一)目的 掌握饲料中粗灰分(矿物质)测定法，并测定各种样本的粗灰分(矿物质)量。 (二)原理 饲料中的灰分，即饲料中的矿物质或称无机盐，主要为钾、钠，钙、镁、 硫、硅、磷，铁及其它微量元素。测定方法是，将饲料样本中有机物质的主要元素如氮、 氢、氧、碳等在高温下(400 一 600℃)烧灼后被氧化而逸失，所剩残渣总称为“粗灰分”。 粗灰分包括饲料中所含各种矿物质元素的氧化物和少量杂质，如粘土，砂石.等，纯灰 分则不含杂质。杂质无营养价值。 （三）仪器名称及需要量 1．一个学员作 2 个测定所需枝 分析天平 1 架 坩埚(带盖) 瓷质，容量 50ml 1 套 坩埚钳 短柄 1 把 干燥器 30cm 直径 1 个 2．公用仪器数量 茂福炉 带高温温度计 1 具 电热板 1 具