肪酸。②样本中有些物质如脂肪，在加热时可能在空气中氧化，使样本重量不但不减少，反而会增加。在这种情况下，测定样本中干物质需在真空烘箱或装有二氧化碳的特殊烘箱中进行。③有些饲料，在105℃时可能发生某些化学变化。例如，含糖分高的糖浆。这类饲料应在较低温度和减压条件下进行干燥。思考题1.某种饲料半干样本105℃干物质%为90%，该饲料空气干燥干物质%为30%，计算该种新鲜饲料的干物质%。2.种饲料半干样本105℃干物质%为90%，该饲料70℃干物质为32%，计算该种新鲜饲料的干物质%。实验六饲料中粗蛋白质(NX6.25)的测定(畜体，畜产品、粪、尿中粗蛋白质的测定，用同一方法)一)目的掌握饲料中粗蛋白质测定法，并测定各种样本的粗蛋白质含量。二）原理饲料中含氮物质包括纯蛋白质和氨化物(氮化物有氨基酸、酰胺、硝酸盐及氨盐等)，两者总称为粗蛋白质。凯氏定氮法的基本原理是用浓硫酸分解样本中的蛋白质与氨化物，使它们含氮物都转变成氨气，氨气被浓硫酸吸收变为硫酸铵。硫酸铵在浓碱的作用下放出氨气。通过蒸馏，氨气随汽水顺着冷凝管流入硼酸溶液（注2），与之结合成为四硼酸铵，后者用盐酸或硫酸标准液滴定，即可测定放出的氨氮量。根据氮量，乘以特定系一般为6.25(注3)，即可得出样本中粗蛋白质含量。上述过程中的化学反应如下：-2CH3CHNH2COOH(注4)+13H2S04→(NH4)2S04+6C02++12SO21+16H2O(NH4)2SO4+2NaOH -→ 2NH4 1 + 2H, 0 +Naz S044H;BO 3+ 2 NaOH - NH4HB4O7 +5H20NH4HB4O7+HCI+5H20 NH,C1+ 4HBO(三）仪器名称及需要量一个学员做2个测定，所需仪器数量2个消化管2500ml分析天平武理保中业区玻璃珠量筒50 ml漏斗4—6cm直径容量瓶100 ml三角瓶150 ml滴定管移液管10或5ml2.公用仪器数量*i5ml量筒量筒10或20ml消化炉治除价阶20孔半微量凯氏蒸馏器电炉1000瓦蒸气发生瓶2000ml
6 肪酸。②样本中有些物质如脂肪，在加热时可能在空气中氧化，使样本重量不但不减少， 反而会增加。在这种情况下，测定样本中干物质需在真空烘箱或装有二氧化碳的特殊烘箱 中进行。⑧有些饲料，在 105℃时可能发生某些化学变化。例如，含糖分高的糖浆。这类 饲料应在较低温度和减压条件下进行干燥。 思 考 题 1．某种饲料半干样本 105℃干物质％为 90％，该饲料空气干燥干物质％为 30％，计 算该种新鲜饲料的干物质％。 ２．种饲料半干样本 105℃干物质％为 90％，该饲料 70℃干物质为 32％，计算该种新 鲜饲料的干物质％。 实验六 饲料中粗蛋白质(N×6.25)的测定 (畜体，畜产品、粪、尿中粗蛋白质的测定，用同一方法) (一)目的 掌握饲料中粗蛋白质测定法，并测定各种样本的粗蛋白质含量。 （二）原理 饲料中含氮物质包括纯蛋白质和氨化物(氮化物有氨基酸、酰胺、硝酸盐及 氨盐等)，两者总称为粗蛋白质。凯氏定氮法的基本原理是用浓硫酸分解样本中的蛋白质与 氨化物，使它们含氮物都转变成氨气，氨气被浓硫酸吸收变为硫酸铵。硫酸铵在浓碱的作 用下放出氨气。通过蒸馏，氨气随汽水顺着冷凝管流入硼酸溶液（注 2），与之结合成为四 硼酸铵，后者用盐酸或硫酸标准液滴定，即可测定放出的氨氮量。根据氮量，乘以特定系 数，一般为 6.25(注 3)，即可得出样本中粗蛋白质含量。上述过程中的化学反应如下： 2CH3CHNH2COOH (注 4)十 13H2S04 → (NH4)2S04 十 6C02↑＋12SO2↑＋16H2O (NH4)2SO4＋2NaOH → 2NH4↑十 2H２Ｏ＋Na２SO4 4H3BO 3＋２NaOH → NH4HB4O7 ＋5H2O NH4HB4O7＋HCl＋5H2O → NH4Cl＋4H３BO3 (三)仪器名称及需要量 1．一个学员做 2 个测定，所需仪器数量 消化管 2500ml 2 个 分析天平 1 架 玻璃珠 6 粒 量筒 50 ml 1 个 漏斗 4—6cm 直径 2 个 容量瓶 100 ml 2 个 三角瓶 150 ml 2—6 个 滴定管 1 支 移液管 10 或 5ml １支 2．公用仪器数量 量筒 5ml ２个 量筒 10 或 20ml 各１个 消化炉 20 孔 1 台 半微量凯氏蒸馏器 1 套 电炉 1000 瓦 1 个 蒸气发生瓶 2000ml 1 个
定时钟1毒气柜(四)药品名称及需要量一个学员做2个测定所需药品数量化学纯硫酸铜0.52g无水硫酸钠化学纯硫酸(比重1.84，无氮）盐酸或硫酸标准液0.0100N-40ml硼酸溶液1%（溶1g化学纯硼酸于100ml蒸馏水中）氢氧化钠溶液40ml50%（溶50g氢氧化钠于100ml蒸馏水中）2ml甲基红一溴甲酚绿混合指示剂（取20ml0.1%甲基红酒精液与20ml0.5%溴甲酚绿酒精液混匀。此混合指示剂碱性呈蓝色，终点为灰色）铵氮标准液0.01N硫酸铵液10ml（将分析纯硫酸铵放入105℃烘箱中烘1h，在干燥器中冷却30min。称取0.661g干燥的硫酸铵，用蒸馏水定溶至1000ml）（五）操作步骤1.消化（1）称取风干或半干样本0.4—1g(注5)。将称样纸卷成筒状，小心无损地将样本放入洗净烘干的消化管中。(2）加入无水硫酸钠（或无水硫酸钾）2.5g（注6)，硫酸铜0.13g（注7）及浓硫酸1020ml。再加玻璃珠2粒，以防消化时液体溅失（3）在凯氏瓶上加一个小漏斗，将消化管放入消化炉孔上加热，在400－450℃下，消化3一4h。在消化过程中，如有黑泡溅在管壁上，应待消化管冷却后用少量蒸馏水冲洗之，再继续加热消化。如有黑炭粒不能全部消失，则待消化管冷却后，补加少量浓硫酸，继续加热，直至管内溶液澄清，消化才告完毕。消化过程中产生SO2，有刺鼻味，故需在毒气柜中进行。（4）消化管冷却后加蒸馏水20ml，摇匀，然后将消化管中溶液无损地移入100ml容量瓶内，用蒸馏水冲洗消化管数次，洗液亦注入容量瓶中，冷却后，加入蒸馏水稀释至容量瓶刻度处，混匀后供测定氮用。(5）试剂空白测定可另取消化管一个，加入无水硫酸钠2.5g，硫酸铜0.1g及硫酸10ml，同样加热消化，直至管内溶液澄清。此溶液的氮量即试剂中的含氮量，必须由样品测定结果中减去。2.蒸馏（1）将凯氏半微量定氮仪装置（图1）准备妥当后，先用蒸馏水洗涤一次。（2）用量筒量取10ml1%硼酸溶液加入150ml三角瓶内，再加入甲基红一溴甲酚绿混和指示剂 2 滴，子三角瓶置于蒸馏装置的冷凝管下，使管口没入硼酸溶液内。(3）煮沸蒸气发生瓶中蒸馏水。用移液管量10ml样本消化液，由图1中凯氏蒸馏装置上的小玻杯4注入反应室5，再以20ml 蒸馏水冲洗小玻杯4，将小玻杯4之棒状玻璃塞塞紧，使之不漏气。取3一5ml饱和氢氧化钠溶液注入小玻杯4，小心地轻轻提起棒状玻璃塞，使氢氧化钠流入反应室5处，立刻将玻塞盖紧，加水于小玻杯4，使少许水流入反应室5以洗涤碱液，部分水留于小玻杯4，以防漏气。夹紧外套管出口的橡皮管7。开始蒸馏，蒸气7
7 定时钟 1 个 毒气柜 1 个 (四)药品名称及需要量 一个学员做 2 个测定所需药品数量 硫酸铜 化学纯 ０.52g 无水硫酸钠 化学纯 10g 硫酸(比重 1.84，无氮) 24ml 盐酸或硫酸标准液 0.0100N 80ml 硼酸溶液 1％ 40ml （溶 1g 化学纯硼酸于 100ml 蒸馏水中） 氢氧化钠溶液 50% 40ml （溶 50g 氢氧化钠于 100ml 蒸馏水中） 甲基红—溴甲酚绿混合指示剂 2ml (取 20ml 0.1%甲基红酒精液与 20ml ０.5％溴甲酚绿酒精液混匀。此混合指示剂碱性 呈蓝色，终点为灰色) 铵氮标准液 0.01Ｎ硫酸铵液 10ml （将分析纯硫酸铵放入 105℃烘箱中烘 1h，在干燥器中冷却 30min。称取 0.661g 干燥 的硫酸铵，用蒸馏水定溶至 1000ml） （五）操作步骤 1．消化 （1） 称取风干或半干样本 0.4—1g(注 5)。将称样纸卷成筒状，小心无损地将样本放 入洗净烘干的消化管中。 （2）加入无水硫酸钠（或无水硫酸钾）2.5g（注 6），硫酸铜 0.13g（注 7）及浓硫酸 10 —20ml。再加玻璃珠 2 粒，以防消化时液体溅失。 （3）在凯氏瓶上加一个小漏斗，将消化管放入消化炉孔上加热，在 400—450℃下，消 化 3—4h。在消化过程中，如有黑泡溅在管壁上，应待消化管冷却后用少量蒸馏水冲洗之， 再继续加热消化。如有黑炭粒不能全部消失，则待消化管冷却后，补加少量浓硫酸，继续 加热，直至管内溶液澄清，消化才告完毕。 消化过程中产生 SO2，有刺鼻味，故需在毒气柜中进行。 (4) 消化管冷却后加蒸馏水 20ml，摇匀，然后将消化管中溶液无损地移入 100ml 容量瓶 内，用蒸馏水冲洗消化管数次，洗液亦注入容量瓶中，冷却后，加入蒸馏水稀释至容量瓶刻 度处，混匀后供测定氮用。 (5) 试剂空白测定可另取消化管一个，加入无水硫酸钠 2.5g，硫酸铜 0.1g 及硫酸 10ml， 同样加热消化，直至管内溶液澄清。此溶液的氮量即试剂中的含氮量，必须由样品测定结果 中减去。 2．蒸馏 （1） 将凯氏半微量定氮仪装置（图 1）准备妥当后，先用蒸馏水洗涤一次。 （2）用量筒量取 10ml 1%硼酸溶液加入 150ml 三角瓶内，再加入甲基红—溴甲酚绿混 和指示剂 2 滴，将三角瓶置于蒸馏装置的冷凝管下，使管口没入硼酸溶液内。 (3) 煮沸蒸气发生瓶中蒸馏水。用移液管量 10ml 样本消化液，由图 1 中凯氏蒸馏装置 上的小玻杯 4 注入反应室 5，再以 20ml 蒸馏水冲洗小玻杯 4，将小玻杯 4 之棒状玻璃塞塞 紧，使之不漏气。取 3—5ml 饱和氢氧化钠溶液注入小玻杯 4，小心地轻轻提起棒状玻璃塞， 使氢氧化钠流入反应室 5 处，立刻将玻塞盖紧，加水于小玻杯 4，使少许水流入反应室 5 以 洗涤碱液，部分水留于小玻杯 4，以防漏气。夹紧外套管出口的橡皮管 7。开始蒸馏，蒸气
吹入反应室5。用定时钟定时。使氨气通过冷凝管8而流入三角瓶9的硼酸溶液中。蒸馏3min，移动三角瓶9，使硼酸液面离开冷凝管，继续蒸馏1min，并用蒸馏水冲洗管口外壁（该蒸馏水亦须加入甲基红一溴甲酚绿混合指示剂2滴，并调节使呈灰色)。将三角瓶9移开蒸馏装置，准备滴定。（4）蒸馏完毕后，在小玻杯4中加满蒸馏水，将玻棒提起使流入反应室5中，随手夹紧橡皮管3以断气源，于是反应室5中的残液自动吸入反应室外层6中，如此冲洗4次后将外套管下端出口的橡皮管7打开，使反应室外层6中的残液排出。待残液排完后，夹紧橡皮管7。每一次消化液重复蒸馏3次。（5）将试剂空白测定之消化液同样处理，测定其中氨量。图1凯氏蒸馅装置1.电炉2.蒸气发生器3.螺丝小玻杯及棒状玻塞5.反应室6.反应室外层7.橡皮管及螺丝夹8.冷凝器9.蒸馏液接收三角瓶3.滴定（1）先将微量滴定管准备妥当，装入0.01NHCI标准液，然后将上述三角瓶(9)移开蒸馏装置后，即以0.0100N盐酸液滴定，至瓶中溶液由绿色变紫灰色为止。（2）同样滴定试剂空白消化液中蒸馏出的氨量。(六)蒸馏器的检查在使用蒸馏器前须先作检查。方法系吸取5ml0.01N硫酸铵标准液，放入蒸馏器中，再加饱和氢氧化钠溶液，然后进行蒸馏，操作过程与样本的蒸馏相同。滴定硫酸铵蒸馏液所需用的0.01NHCI标准液耗量减去空白(用5ml蒸水代替硫酸铵标准液进行蒸馅所用的0.01NHCI标准液耗量）应为5ml，则该项蒸馏装置才合乎使用标准。（七）结果与计算方法样本中粗蛋白质(NX6.25)含量%Vi100(V:V)XNX0.014g×6.25xV2W100Vi=(V3—Vo)X0.0100×0.014g×6.2WV2式中：W=样本重(g)Vi=消化液稀释容量（ml）V2=样本蒸馏用量Vs=滴定样本馏出液的0.0100NHCI耗量(ml)
8 吹入反应室5。用定时钟定时。使氨气通过冷凝管8而流入三角瓶9的硼酸溶液中。蒸馏3min， 移动三角瓶 9，使硼酸液面离开冷凝管，继续蒸馏 1min，并用蒸馏水冲洗管口外壁(该蒸馏 水亦须加入甲基红—溴甲酚绿混合指示剂 2 滴，并调节使呈灰色)。将三角瓶 9 移开蒸馏装 置，准备滴定。 (4) 蒸馏完毕后，在小玻杯 4 中加满蒸馏水，将玻棒提起使流入反应室 5 中，随手 夹紧橡皮管 3 以断气源，于是反应室 5 中的残液自动吸入反应室外层 6 中，如此冲洗 4 次 后将外套管下端出口的橡皮管 7 打开，使反应室外层 6 中的残液排出。待残液排完后，夹紧 橡皮管 7。每一次消化液重复蒸馏 3 次。 (5) 将试剂空白测定之消化液同样处理，测定其中氨量。 图 1 凯氏蒸馏装置 1．电炉 2．蒸气发生器 3．螺丝夹 4．小玻杯及棒状玻塞 5．反应室 6．反应室外层 7．橡皮管及螺丝夹 8．冷凝器 9．蒸馏液接收三角瓶 3．滴定 （1）先将微量滴定管准备妥当，装入 0.01N HCl 标准液，然后将上述三角瓶(9)移开 蒸馏装置后，即以 0.0100N 盐酸液滴定，至瓶中溶液由绿色变紫灰色为止。 （2）同样滴定试剂空白消化液中蒸馏出的氨量。 (六)蒸馏器的检查 在使用蒸馏器前须先作检查。方法系吸取 5ml 0.01N 硫酸铵标准 液，放入蒸馏器中，再加饱和氢氧化钠溶液，然后进行蒸馏，操作过程与样本的蒸馏相同。 滴定硫酸铵蒸馏液所需用的 0.01N HCl 标准液耗量减去空白(用 5ml 蒸水代替硫酸铵标准液 进行蒸馏所用的 0.01N HCl 标准液耗量)应为 5ml，则该项蒸馏装置才合乎使用标准。 （七）结果与计算方法 样本中粗蛋白质(N × 6.25)含量% V1 100 = (V3—V0)×N×0.014g×6.25× × V 2 W V1 100 = (V3—V0) ×0.0100×0.014g×6.25 × V 2 W 式中：W=样本重(g) V1=消化液稀释容量（ml） V2=样本蒸馏用量 V3=滴定样本馏出液的 0.0100N HCl 耗量(ml)
Vo=滴定试剂空白馏出液的 0.0100 HCI 耗量(ml)N=HCI当量浓度说明：①系数6.25是按照每100g蛋白质含有16g氮计算而得。②系数0.014即1mlINHCL液相当于0.014g氮。③每次测定样本时必须同时作空白实验。（八）注解1.现时测定饲料的粗蛋白质含量，多趋向于采用凯氏半微量定氮法，其原因是称取样本量不多，耗用试剂量较少，用于样本消化和蒸馏的时间较短。凯氏大量定氮法亦在某些情况下被采用，其原理与凯氏半微量定氮法相同。前法备有凯氏蒸馏架，凯氏烧瓶（常用250ml或500ml)中样本消化完毕后，即可加入200ml蒸馏水，直接装置在凯氏蒸馏架上全部蒸馏，不须将凯氏瓶中消化液转移入容量瓶内，而后再吸取部分冲淡液进行蒸馏等手续。这是凯氏大量定氮法的优越性。这个方法适用于测定鲜肉鲜粪与羊毛中粗蛋白质主2:在凯氏定氮法中Meeker和Wagner两氏(Ind.Eng.Chem.，Anal.Ed.5：396,1933)用1%硼酸液10ml替代10ml0.01N盐酸标准液。量取1%硼酸液可用普通量筒，因为硼酸与氨的作用仅是一个简单的结合，消化液蒸馏后即可直接用0.01IN盐酸标准液滴定蒸馏物。应用此法，可省略去氢氧化钠标准液的制备与标定等步骤主3；各种饲料的粗蛋白质中氮的含量，差异很大，变异范围约在14.7-19.5%之间，平均16%。凡饲料的粗蛋白质中实际含氮量尚未确定的，可用6.25平均系数来乘氮量换算成粗蛋白质量。凡饲料的粗蛋白质中实际含氮量已经确定的，可用它们的实际系数来换算。例如荞麦、玉米用系数6.00，箭舌豌豆、大豆、蚕豆、燕麦、小麦、黑麦用系数5.70，牛奶用系数6.34：CH:CHNH.COOH为α一氨基丙酸，代表饲料中粗蛋白质分解后的一种简单氨基酸，是饲料中有机态灸物质的来源注5：现时分析饲料的粗蛋白质一般多用凯氏半微量定氮法。由于饲料的粗蛋白质含量差异较大，最多的可达80%，少的仅有1%左右。因此，称取供消化的风干或半干样本重量、稀释消化液的容量及吸取供蒸馏的稀释消化液的容量，均须根据样本中粗蛋白质含量的多少而调整，故可使最后滴定用的0.01N 标准盐酸液耗量在5ml之内。便于使用微量滴定管而获得准确的结果在饲养试验中测定鲜肉或整个鸡体或羊毛中粗蛋白质时，为保证采样的代表性，可称取10g鲜畜体样本，用滤纸包裹，放入250ml消化管中，再加0.5g硫酸铜，8—10g无水硫酸钠和30ml浓硫酸，加热消化3一4h。消化液冲淡至250ml，再吸取5ml消化液蒸馏，这样约耗用30ml0.02N标准HCI液定家畜粪样中粗蛋白质可取2g半干样或5—10g湿样，加入0.5g硫酸铜，8-10g无水硫酸钠和20ml浓硫酸进行消化注6：加入无水硫酸钠（或无水硫酸钾)的目的是提高浓硫酸的沸点，使消化效力提高纯硫酸的沸点为317℃，加入无水硫酸钠或无水硫酸钾后，硫酸沸点可增至325—341℃。注7：硫酸铜为还原催化剂，其反应原理如下：H2SO42CuS04+CU.S04+ SO21 +CO2 t(有机物质) 2CuSO4+ H20+SO2 t2CuS04+ H2S049
9 V0=滴定试剂空白馏出液的 0.0100 HCl 耗量(ml) N=HCI 当量浓度 说明：①系数 6.25 是按照每 100g 蛋白质含有 16g 氮计算而得。 ②系数 0.014 即 1ml1N HCL 液相当于 0.014g 氮。 ③每次测定样本时必须同时作空白实验。 （八）注解 注 1：现时测定饲料的粗蛋白质含量，多趋向于采用凯氏半微量定氮法，其原因是称 取样本量不多，耗用试剂量较少，用于样本消化和蒸馏的时间较短。 凯氏大量定氮法亦在某些情况下被采用，其原理与凯氏半微量定氮法相同。前法备有 凯氏蒸馏架，凯氏烧瓶(常用 250ml 或 500ml)中样本消化完毕后，即可加入 200ml 蒸馏水， 直接装置在凯氏蒸馏架上全部蒸馏，不须将凯氏瓶中消化液转移入容量瓶内，而后再吸取 部分冲淡液进行蒸馏等手续。这是凯氏大量定氮法的优越性。这个方法适用于测定鲜肉、 鲜粪与羊毛中粗蛋白质。 注 2：在凯氏定氮法中 Meeker 和 Wagner 两氏(Ind．Eng．Chem．，Anal．Ed．5：396， 1933)用 1％硼酸液 10ml 替代 10ml 0.01N 盐酸标准液。量取 1％硼酸液可用普通量筒，因 为硼酸与氨的作用仅是一个简单的结合，消化液蒸馏后即可直接用０.01N 盐酸标准液滴定 蒸馏物。应用此法，可省略去氢氧化钠标准液的制备与标定等步骤。 注 3；各种饲料的粗蛋白质中氮的含量，差异很大，变异范围约在 14.7—19.5％之间， 平均 16%。凡饲料的粗蛋白质中实际含氮量尚未确定的，可用 6.25 平均系数来乘氮量换算 成粗蛋白质量。凡饲料的粗蛋白质中实际含氮量已经确定的，可用它们的实际系数来换算。 例如荞麦、玉米用系数 6.00，箭舌豌豆、大豆、蚕豆、燕麦、小麦、黑麦用系数 5.70，牛 奶用系数 6.38。 注 4：CH３CHNH２COOH 为α—氨基丙酸，代表饲料中粗蛋白质分解后的一种简单氨 基酸，是饲料中有机态氮物质的来源之一。 注 5：现时分析饲料的粗蛋白质一般多用凯氏半微量定氮法。由于饲料的粗蛋白质含 量差异较大，最多的可达 80％，少的仅有 1％左右。因此，称取供消化的风干或半干样本 重量、稀释消化液的容量及吸取供蒸馏的稀释消化液的容量，均须根据样本中粗蛋白质含 量的多少而调整，故可使最后滴定用的０.01N 标准盐酸液耗量在 5ml 之内。便于使用微量 滴定管而获得准确的结果。 在饲养试验中测定鲜肉或整个鸡体或羊毛中粗蛋白质时，为保证采样的代表性，可称 取 10g 鲜畜体样本，用滤纸包裹，放入 250ml 消化管中，再加 0.5g 硫酸铜，8—10g 无水 硫酸钠和 30ml 浓硫酸，加热消化 3—4h。消化液冲淡至 250ml，再吸取 5ml 消化液蒸馏， 这样约耗用 30ml0.02N 标准 HCI 液。 测定家畜粪样中粗蛋白质可取 2g 半干样或 5—10g 湿样，加入 0.5g 硫酸铜，8—10g 无水硫酸钠和 20ml 浓硫酸进行消化。 注 6：加入无水硫酸钠 (或无水硫酸钾)的目的是提高浓硫酸的沸点，使消化效力提高。 纯硫酸的沸点为 317℃，加入无水硫酸钠或无水硫酸钾后，硫酸沸点可增至 325—341℃。 注 7 ：硫酸铜为还原催化剂，其反应原理如下： Ｈ2SO4 2CuS04＋Ｃ ＣU2SO4 十 SO2↑＋ＣO2↑ (有机物质) 2CuS04＋Ｈ2SO4 2ＣUSO4 十 H2O＋SO2↑
考题思1.1Kg饲料中含有25g粗蛋白质，则1Kg饲料中含有多少g氮？2.1ml0.0100NHCI溶液相当于0.00014g氮，如何求得？实验七饲料中粗脂肪(醚浸出物)的测定(畜体、畜产品及粪中粗脂肪的测定用同一方法)(一)目的掌握饲料中粗脂肪测定方法，并用以测定各类饲料中粗脂肪含量。（二)原理、饲料的油脂均可溶解于乙醚中，用乙醚反复浸提饲料中的脂肪，并使溶有脂肪的乙醚流集于盛醚瓶中，而后将乙醚蒸发，瓶中所剩残渣的重量即为饲料的脂肪量。此为索氏测定脂肪法的原理。饲料被乙醚所溶解的物质，除真脂肪外，尚有麦角固醇、胆固醇、脂溶性维生素，叶绿素等。由于所得油脂残渣不纯，故称为粗脂肪(注 1)。测定脂肪所用饲料样品必须烘干，因样品中水分可影响乙醚的浸提和蒸发过程。(三)仪器名称及需要量一个学员做二个测定所需仪器数量残补珍限价索氏脂肪抽出器盛醚瓶150ml脱脂滤纸或特制滤纸筒脱脂白色棉线干燥器30cm直径分析天平2.公用仪器数量2台定温水浴锅（调节温度范围为30℃—90℃）6(四)药品名称及需要量一个学员做2个测定所需药品数量乙醚化学纯，无水200ml氯化钙工业用50普通凡士林(五)操作步骤1．索氏脂肪抽出器由三个部分组成，下部为盛醚瓶，中间为浸提管，上部为冷凝管。冷凝管上端加棉花塞，以防乙醚逸失。，将盛醚瓶和浸提管洗净烘干，放入干燥器中冷却后，在天平上称重。3.将测定干物质的剩余样本(注2)，无损地移入特制滤纸筒或用脱脂滤纸和棉线包扎好(纸包长度以虹吸管高度的2/3为宜)，用铅笔在包上写明样本名称、编号等。然后把滤纸筒或纸包放入浸提管中，将全部抽出器安置妥当。注入乙醚60一80ml。4.加热水浴锅，使温度保持75-85℃，乙醚在盛醚瓶中蒸发，乙醚蒸气至冷凝管处冷凝为液体，仍流回浸提管中。样本受醚的浸渍，其中所含脂肪即被溶解。。当浸提管中乙醚积聚相当高度时，即由虹吸管回流入盛醚瓶。提取时间由4h(乙醚冷却速度5—6滴/秒)至16h(2一3滴/秒)，样本中所含脂肪可全部浸提出而积存于盛醚瓶中(注3)。5.提取完毕后，移去上部的冷凝管，取出样本包，将冷凝管仍装置，再蒸馏，使管中乙醚再回流一次，以冲洗浸提管中余留的脂肪。然后继续蒸馏，当乙醚聚积至虹吸管三分之二高度处，取下装置，将管中乙醚倒入收醚瓶中。继续进行，直至盛醚瓶中乙醚几乎全部收完为止。此时瓶中只有粗脂肪和极少量乙醚存留。10
10 思 考 题 1．1Kg 饲料中含有 25g 粗蛋白质，则 1Kg 饲料中含有多少 g 氮? 2．1ml 0.0100N HCI 溶液相当于 0.00014g 氮，如何求得? 实验七 饲料中粗脂肪(醚浸出物)的测定 (畜体、畜产品及粪中粗脂肪的测定用同一方法) (一)目的 掌握饲料中粗脂肪测定方法，并用以测定各类饲料中粗脂肪含量。 (二)原理 饲料的油脂均可溶解于乙醚中，用乙醚反复浸提饲料中的脂肪，并使溶 有脂肪的乙醚流集于盛醚瓶中，而后将乙醚蒸发，瓶中所剩残渣的重量即为饲料的脂肪量。 此为索氏测定脂肪法的原理。 饲料被乙醚所溶解的物质，除真脂肪外，尚有麦角固醇、胆固醇、脂溶性维生素，叶 绿素等。由于所得油脂残渣不纯，故称为粗脂肪(注 1)。 测定脂肪所用饲料样品必须烘干，因样品中水分可影响乙醚的浸提和蒸发过程。 (三)仪器名称及需要量 1．一个学员做二个测定所需仪器数量 索氏脂肪抽出器 2 套 盛醚瓶 150ml 2 个 脱脂滤纸或特制滤纸筒 2 个 脱脂白色棉线 2 根 干燥器 30cm 直径 1 个 分析天平 2．公用仪器数量 定温水浴锅(调节温度范围为 30℃一 90℃ ) 6 孔 2 台 (四)药品名称及需要量 一个学员做 2 个测定所需药品数量 乙醚 化学纯，无水 200ml 氯化钙 工业用 500g 普通凡士林 10g (五)操作步骤 1．索氏脂肪抽出器由三个部分组成，下部为盛醚瓶，中间为浸提管，上部为冷凝管。 冷凝管上端加棉花塞，以防乙醚逸失。 2．将盛醚瓶和浸提管洗净烘干，放入干燥器中冷却后，在天平上称重。 3．将测定干物质的剩余样本(注 2)，无损地移入特制滤纸筒或用脱脂滤纸和棉线包扎 好(纸包长度以虹吸管高度的 2／3 为宜)，用铅笔在包上写明样本名称、编号等。然后把滤 纸筒或纸包放入浸提管中，将全部抽出器安置妥当。注入乙醚 60 一 80ml。 4．加热水浴锅，使温度保持 75—85℃，乙醚在盛醚瓶中蒸发，乙醚蒸气至冷凝管处 冷凝为液体，仍流回浸提管中。样本受醚的浸渍，其中所含脂肪即被溶解。当浸提管中乙 醚积聚相当高度时，即由虹吸管回流入盛醚瓶。提取时间由 4h(乙醚冷却速度 5—6 滴／秒) 至 16h(2—3 滴／秒)，样本中所含脂肪可全部浸提出而积存于盛醚瓶中(注 3)。 5．提取完毕后，移去上部的冷凝管，取出样本包，将冷凝管仍装置，再蒸馏，使管中 乙醚再回流一次，以冲洗浸提管中余留的脂肪。然后继续蒸馏，当乙醚聚积至虹吸管三分 之二高度处，取下装置，将管中乙醚倒入收醚瓶中。继续进行，直至盛醚瓶中乙醚几乎全 部收完为止。此时瓶中只有粗脂肪和极少量乙醚存留