3.AHA大多为IgG型，但还有其他类型，故必要时需加上述各种单价抗血清。 7.间接Coombsi试验用于Rh或ABO溶血病母体不完全抗体的检测 2.冷凝集素试 冷凝集素是一种可逆性抗体，在低温时可与自身红细胞、0型红细胞或与患者同型红细胞 发生凝集，当温度增高时，凝集块有消失。 参考值：效价<1：40，反应最适温度为4摄氏度。 临床意义：某些AIHA病人的冷凝集素效价很高，有的可达64OO0或更高。 3.冷热双相溶血 阵发性寒冷性血红蛋白尿症(PCH)患者的血清中有双相溶血素，在0-4摄氏度时，溶血素 与红细胞结合，并吸附补体，但不溶血：当升温至30-37摄氏度则发生溶血。 参考值：阴性临床意义：阳性见于PCH。 六阵发性睡眠性血红蛋白尿症有关检测 PNH. 为获得性红细胞膜缺陷引起的慢性血管内溶 ,常在睡眠时加重，可伴发作性血红蛋 白尿和全血细胞减少症 1.酸化溶血试验(Ham】 PN患者的红细胞对补体敏感性增高，在酸化的血清中，经37摄氏度孵有，易溶血。 试剂0.2mo1/LHCL8.5g/L NACL溶血 操作用10ml离心管1支，加8.5 g/L NACL液56ml,再加病人末梢 十几滴，混匀，离心 弃去上清液，如此重复洗涤红 细胞2次，最后配 50 工细胞悬液 取与病人同型或B型血3^5l,待其自然凝固，分离正常人血清（最好采用多人混合新 鲜血清，以保证有足够的补体) 结果判断 试验管溶血，对照管不溶血为阳性 试验管和对照管都 不溶血为阴性 附注 血清酸化后，试管必须塞紧，否则二氧化碳逸出，可使血清酸度下降。 2 抗凝剂会影响PH,故不宜用抗凝血浆，但可用脱纤维血. 为了保证补体充足，最好用混合血清，但正常对照红细胞必须用0型血。 如患者曾经多次输血，血中异常红细胞相对诚少，本试验可为弱阳性或阴性， 临床意义 本试验阳性主要见于P,免疫性溶血性贫血发作严重时也可阳性。 2蔗糖溶血试验 在PH7.4时，人红细胞能从同血型正常人血清中吸附补体，但不发生溶血，PNH红细胞则发 生溶血，因P红细胞对补体C3活化而始动的产物感易于溶血。萨轴、简萄糖等能币 过C3前活化素系统致活补体后端成分而引起溶血 试剂：92.4g/L蔗糖溶液 操作 取新鲜抗凝血（枸橙酸盐或草酸盐抗凝）0.5ml,加入4.5m1蔗糖溶液，混匀，置37℃瓣育箱中30 分钟后取出离心，上清液呈红色为阳性（溶血），上清液无色为阴性 附注 所有仪器应清洁干燥，以免溶血 2. 若无蔗糖也可用葡萄糖代替，做正常对照管，用生理盐水， 临床意义： 1 PN阳患者为阳性，因此本试验为PN简易过筛试验
15 3.AIHA大多为IgG型，但还有其他类型，故必要时需加上述各种单价抗血清。 7. 间接Coombs试验 用于Rh或ABO溶血病母体不完全抗体的检测。 2.冷凝集素试验 冷凝集素是一种可逆性抗体，在低温时可与自身红细胞、O型红细胞或与患者同型红细胞 发生凝集，当温度增高时，凝集块有消失。 参考值：效价<1:40，反应最适温度为4摄氏度。 临床意义：某些AIHA病人的冷凝集素效价很高，有的可达64000或更高。 3.冷热双相溶血试验 阵发性寒冷性血红蛋白尿症（PCH）患者的血清中有双相溶血素，在0-4摄氏度时，溶血素 与红细胞结合，并吸附补体，但不溶血；当升温至30-37摄氏度则发生溶血。 参考值：阴性 临床意义：阳性见于PCH。 六 阵发性睡眠性血红蛋白尿症有关检测 PNH：为获得性红细胞膜缺陷引起的慢性血管内溶血，常在睡眠时加重，可伴发作性血红蛋 白尿和全血细胞减少症。 1.酸化溶血试验（Ham） PNH患者的红细胞对补体敏感性增高，在酸化的血清中，经37摄氏度孵育，易溶血。 试剂 0.2mol/L HCL 8.5g/L NACL溶血 操作 用10ml离心管1支，加8.5g/L NACL液5~6ml,再加病人末梢血 十几滴,混匀,离心 弃去上清液,如此重复洗涤红细胞2次,最后配成50﹪红细胞悬液 取与病人同型或AB型血3~5ml,待其自然凝固,分离正常人血清(最好采用 多人混合新 鲜血清,以保证有足够的补体) 结果判断 1. 试验管溶血, 对照管不溶血为阳性 2. 试验管和对照管都不溶血为阴性 附注 1. 血清酸化后,试管必须塞紧,否则二氧化碳逸出,可使血清酸度下降. 2. 抗凝剂会影响PH,故不宜用抗凝血浆,但可用脱纤维血. 3. 为了保证补体充足,最好用混合血清,但正常对照红细胞必须用0 型血。 4. 如患者曾经多次输血，血中异常红细胞相对减少，本试验可为弱阳性或阴性。 临床意义 本试验阳性主要见于PNH，免疫性溶血性贫血发作严重时也可阳性。 2.蔗糖溶血试验 在PH7.4时，人红细胞能从同血型正常人血清中吸附补体，但不发生溶血，PNH红细胞则发 生溶血，因PNH红细胞对补体C3活化而始动的产物敏感，易于溶血。蔗糖、葡萄糖等能通 过C3前活化素系统致活补体后端成分而引起溶血。 试剂：92.4g/L蔗糖溶液 操作: 取新鲜抗凝血(枸橼酸盐或草酸盐抗凝)0.5ml,加入4.5ml蔗糖溶液,混匀,置37℃孵育箱中30 分钟后取出离心,上清液呈红色为阳性(溶血),上清液无色为阴性. 附注: 1. 所有仪器应清洁干燥, 以免溶血 2. 若无蔗糖也可用葡萄糖代替,做正常对照管,用生理盐水. 临床意义: 1. PNH患者为阳性,因此本试验为PNH简易过筛试验
再生障碍性贫血、巨幼细胞性贫血和免疫性溶血性贫血患者也可偶有阳性。 第三节 正常血细胞形态 骨随血细胞分化， 正常情况下 ,在造血干细胞分化、发有 、成熟的整个演变过程中 存 一定的规律性 。造血干细胞逐级分化形成各系列、各阶段的骨髓血细胞，造血干、 祖细胞在形态上无法鉴别，只有分化发育为各系列原始、幼稚细胞后，其形态学特征才 较明显，才能辨认。 胸体：大一小（后核小一大） 胞浆：细胞越幼稚，染色越 染色 越浅淡， 胞、巨核细胞成熟度。 胞浆染色：深蓝（原始）一蓝色（早幼）一一浅蓝 (中幼)一--粉色 一噬天青颗粒（早 、嗜酸粒、嗜碱 粒)。 胞浆量： 有少 体积：有大一小，成熟红细胞无核 染色质：细致疏松一粗糙紧密快状 核草，不品装 一品芳 核仁：清楚 清 一消失 胞核与胞浆体积之比：大 一小 细胞发有成熟过程：由原始-一早幼-一中幼—晚幼一一成熟细 1,细胞大小、形状 2.响浆量多少、领色、题粒 3。细胞核形状、染色质结构（粗细、凝聚 4.核仁数目、大小。 5.核、浆比例。 红细胞系统：临床四阶段划分（原始红，早幼红，中幼红，晚幼红） 红细胞系统占骨髓有核细胞15一25% 原红细胞圆形或 直径15一22μm胞核圆形或椭圆形，居中染色质粗颗粒网状，深紫 红色，核仁2一3个，胞浆浓（深）蓝色，着色不均，边缘者色深，核周浅染（相当于高 尔基体部分和线粒体)，无颗粒，有钝伪足。0.03-0.05% 早幼红圆形，直径15一18μm核圆形，略偏位，染色质开始凝聚，核仁消失或不明显。胞浆 量增多，蓝色，核周明亮淡染区，无颗粒。0.92-0.41% 中幼红胞体圆形，直径8一18μm,核圆形，居中，或偏位，染色质凝聚小块直至碎墨块状 核周边出现透亮的缝隙。核、浆各占半，浆灰兰色，淡兰色，嗜多色性（碱性核糖体与橙红 色血红蛋白混合所致)。7.41-1.91% 晚幼红直径7一13μm,核圆形，偏位明显，染色质凝聚成大块或团块状（①），甚至固缩不能 看出任何结构（碳核）（红I)胞浆量增多，淡灰或粉红色。核/浆进一步变小。此阶段细刷 基本沿有分裂能力。10.75-2.36 成熟红细胞呈双面凹圆盘形 直径7-8μm,中央为1/3淡染区巨幼贫(g》 叶酸、B:缺乏，骨髓中出现巨幼细跑， 分早巨幼红细胞、中巨幼红细胞、晚巨幼红细胞三个阶段，与相对应阶段的正常幼红细胞比， 其特点：1胞体大2胞浆丰富3核发有落后于浆，染色质疏松， 16
16 2. 再生障碍性贫血、巨幼细胞性贫血和免疫性溶血性贫血患者也可偶有阳性。 第三节 正常血细胞形态 骨髓血细胞分化，正常情况下，在造血干细胞分化、发育、成熟的整个演变过程中， 存在一定的规律性。造血干细胞逐级分化形成各系列、各阶段的骨髓血细胞，造血干、 祖细胞在形态上无法鉴别，只有分化发育为各系列原始、幼稚细胞后，其形态学特征才 较明显，才能辨认。 胞体：大—小 （ 巨核 小—大） 胞浆：细胞越幼稚，染色越深；细胞越成熟，染色 越浅淡，以胞浆染色判断有核红细胞、粒细 胞、巨核细胞成熟度。 胞浆染色：深蓝（原始）---蓝色（早幼）---浅蓝 （中幼）---粉色 颗粒变化：由无颗粒（原始）---噬天青颗粒（早 幼）---特异性颗粒（中性粒、嗜酸粒、嗜碱 粒）。 胞浆量： 有少----多 体积：有大---小，成熟红细胞无核 染色质：细致疏松---粗糙紧密快状 核膜：不显著---显著 核仁：清楚---不清---消失 胞核与胞浆体积之比： 大----小 细胞发育成熟过程：由原始---早幼---中幼---晚幼---成熟细 1. 细胞大小、形状 2. 胞浆量多少、颜色、颗粒、 3. 细胞核形状、染色质结构（粗细、凝聚） 4. 核仁数目、大小。 5. 核、浆比例。 红细胞系统：临床四阶段划分（原始红 ，早幼红，中幼红，晚幼红） 红细胞系统占骨髓有核细胞15－25％ 原红细胞圆形或椭圆形，直径15—22μm胞核圆形或椭圆形，居中染色质粗颗粒网状，深紫 红色，核仁2—3个，胞浆浓（深）蓝色，着色不均，边缘着色深，核周浅染（相当于高 尔基体部分和线粒体），无颗粒，有钝伪足。0.03-0.05% 早幼红圆形，直径15---18μm核圆形，略偏位，染色质开始凝聚，核仁消失或不明显。胞浆 量增多，蓝色，核周明亮淡染区，无颗粒。0.92-0.41% 中幼红胞体圆形，直径8—18μm，核圆形，居中，或偏位，染色质凝聚小块直至碎墨块状， 核周边出现透亮的缝隙。核、浆各占半，浆灰兰色，淡兰色，嗜多色性（碱性核糖体与橙红 色血红蛋白混合所致）。7.41-1.91% 晚幼红直径7—13μm，核圆形，偏位明显，染色质凝聚成大块或团块状(I)，甚至固缩不能 看出任何结构（碳核）(II)胞浆量增多，淡灰或粉红色。核/浆进一步变小。此阶段细胞 基本没有分裂能力。10.75-2.36% 成熟红细胞呈双面凹圆盘形，直径7-8μm，中央为1/3淡染区巨幼贫（g） 叶酸、VB12 缺乏，骨髓中出现巨幼细胞， 分早巨幼红细胞、中巨幼红细胞、晚巨幼红细胞三个阶段，与相对应阶段的正常幼红细胞比， 其特点：1 胞体大 2 胞浆丰富 3 核发育落后于浆，染色质疏松
粒细胞系统在正常骨髓中约占45%-70%中性粒细胞在粒细胞系统占绝大部分，嗜酸性粒细胞 小于5%，嗜碱性粒细胞小于1% 嗜酸粒细胞增多 见于CL 嗜酸粒细胞增多症，嗜酸粒细胞白血病，过敏性疾病等： 嗜碱性粒细胞增多，见于CL,嗜碱性粒细胞白血病。粒细 中幼粒（特异性颗粒） 中性颗粒 嗜酸性颗粒 嗜碱性颗粒 中幼数 中幼特 中幼拉 晚幼料 杆状核 杆状核 杆状移 分叶核 分叶核 分叶核 原粒 1.细跑核圆居中或稍信 2.染色质细致淡紫红色细颗粒网状，均匀平坦，无浓聚 3核仁明显淡兰色小核仁3-5个，外凸 4.胞浆中无颗粒淡蓝色，量少。 5.胞体圆形或椭圆行直径12一20μm 早幼粒： 1核右偏位 2.Go1gi区发有（核附近有淡染区）， 3染色质聚集，颗粒增多 4.胞体较原始细胞大胞浆稍多 5.核仁1-4个或消失占1.57±0.6 整别 中性颗粒：非常细小密集，呈粉黄底色，不透亮 嗜酸性颗粒：比中性颗粒大，大小一致，圆形，桔黄色或灰黄色 皆碱性题粒：大小不一，暗褐色，分布散乱，覆盖核上 注： 以颗粒的特性划分嗜酸性，嗜碱性，中性粒细胞，自中至晚杆、分叶核粒细胞的划分，完全 以细胞核的变化为依据。 直径10-16m 胞核肾型，有凹陷，凹陷度在假设圆径1/2-3/4，小于1/2为中幼粒，大于3/4 为杆状核中性杆 直径10-13口m,胞核如杆状、带状，嗣核之凹路度大于3/4，染色质凝固块状。 直径10-13μm,核呈分叶状，叶与叶之间有一丝相连或完全断开，中性粒细胞的核分为-5 嗜酸性粒细胞分叶核分为2叶呈“八”字 嗜碱性分叶核由于大量嗜碱性颗粒散布在细胞核上，分叶状态看不清楚。 3淋巴细胞系统 原始淋巴细胞： 外形：圆形或椭圆形，直径10-20■ 兰色窄带绕核，透亮，无颗粒 胞核： 居中，略偏位，有切迹： 染色质：深紫红色，粗糙，较厚实，正副染色质不透亮，排列成粗网状核仁：模糊1-2个， 有凹陷 幼稚淋巴细胞体积与原淋相似胞核有小凹陷染色质粗糙核仁消失胞浆淡兰色偶有少许嗜天
17 粒细胞系统在正常骨髓中约占45%-70%中性粒细胞在粒细胞系统占绝大部分，嗜酸性粒细胞 小于5%，嗜碱性粒细胞小于1% 嗜酸粒细胞增多，见于CML，嗜酸粒细胞增多症，嗜酸粒细胞白血病，过敏性疾病等； 嗜碱性粒细胞增多，见于CML，嗜碱性粒细胞白血病。粒细 中幼粒(特异性颗粒） 中性颗粒 嗜酸性 颗粒 嗜碱性 颗粒 中幼粒 中幼粒 中幼粒 晚幼粒 晚幼粒 晚幼粒 杆状核 杆状核 杆状核 分叶核 分叶核 分叶核 原粒 1.细胞核圆居中或稍偏 2.染色质细致淡紫红色细颗粒网状，均匀平坦，无浓聚。 3.核仁明显淡兰色小核仁3-5个，外凸 4.胞浆中无颗粒淡蓝色，量少 。 5.胞体圆形或椭圆行直径12—20μm 早幼粒： 1.核有偏位， 2.Golgi区发育（核附近有淡染区）， 3.染色质聚集，颗粒增多 4.胞体较原始细胞大胞浆稍多 5.核仁1-4个或消失 占1.57±0.6 鉴别 中性颗粒：非常细小密集，呈粉黄底色，不透亮 嗜酸性颗粒：比中性颗粒大，大小一致，圆形， 桔黄色或灰黄色 嗜碱性颗粒：大小不一，暗褐色，分布散乱，覆盖核上 注： 以颗粒的特性划分嗜酸性，嗜碱性，中性粒细胞，自中至晚杆、分叶核粒细胞的划分，完全 以细胞核的变化为依据。 直径10-16μm，胞核肾型，有凹陷，凹陷度在假设圆径1/2-3/4，小于1/2为中幼粒，大于3/4 为杆状核 中性杆 直径10-13μm，胞核如杆状、带状，胞核之凹陷度大于3/4，染色质凝固块状。 直径10-13μm，核呈分叶状，叶与叶之间有一丝相连或完全断开，中性粒细胞的核分为2－5 叶 嗜酸性粒细胞分叶核分为2叶呈“八”字 嗜碱性分叶核由于大量嗜碱性颗粒散布在细胞核上，分叶状态看不清楚。 3 淋巴细胞系统 原始淋巴细胞： 外形： 圆形或椭圆形，直径10-20μm； 胞浆： 天兰色，兰色窄带绕核，透亮，无颗粒； 胞核： 居中，略偏位，有切迹； 染色质：深紫红色，粗糙，较厚实，正副染色质不透亮，排列成粗网状核仁：模糊1-2个， 有凹陷 幼稚淋巴细胞体积与原淋相似胞核有小凹陷染色质粗糙核仁消失胞浆淡兰色偶有少许嗜天
青颗粒 淋巴细胞直径5-18μm染色质致密块状有的有假核仁胞浆量少兰色，透亮少许嗜天青颗粒大 淋巴细胞胞浆量多存在于正常骨随中15%-25% 单核细胞系统 原始单核细胞：外形：不规则形或圆形，直径1425μm胞浆：灰兰色，浅兰色，似毛玻璃， 不诱亮，有伪足，无题粒。胞核：不规则，有折叠扭曲染色质：纤细网状，浅紫红色， 淡旗。核仁：大，1-3个 幼稚单核细胞染色质纤细有凝聚，或粗网状核仁可有可无胞浆量多，灰兰色许多细小沙砾状 天青颗粒 单核细胞胞体稍小直径12-20μm核居中或偏一侧形状不规则染色质凝聚如筛底或粗线条状 胞浆量多，灰兰色散布细小粉红色颗粒在正常骨髓中<5%5浆细胞系统 浆细胞源于细胞，划分为原始，幼稚，成熟浆细胞 原始浆细胞： 胞体 15-25μ 胞核： 偏位于细胞一端，圆形或椭圆行 染色质： 粗颗粒网状，紫红色，有核仁 胞浆： 较多，深蓝或灰兰色，近核处有一半圆 形诱明区，无题粒。 正常骨髓成熟浆细胞(<2.5%) 椭圆形，直径8-20μm,核圆形明显偏位染色质粗凝块胞浆丰富，灰兰色，无或少许嗜天青 颗粒近核处明显半圆形淡染区 巨核细胞系统 1.百核细胞自原百至裸核不做细胞整体分裂，仅仅是NA的核内复制，热色体由2倍体可增至 128倍体，细胞形态也由圆形变为不规则形，胞体明显由小到大。血小板的生成是巨核细 胞走向解体的过程。 2.产生血小板的能力与其倍体数有关：倍体数越高产生血小板越多。一般从8倍体开始产生 血小板，病理情况下可提前或不产生。 3.临床划分：原始巨核一幼稚巨核一成熟巨核（包括成熟有血小板形成巨核，成熟无血小板 形成巨核)一裸核一血小板。 原始巨核： 从细胞的倍体数看，此阶段2一32倍体，但在光镜下8倍体以上的细胞才能识别。 胞体：较其它系统原始细胞大，胞体直径15-45μm,边缘常不规则，有皱韬状突起 胸抱， 量少，深蓝色，不透明，无颗粒。 胞核， 形状不定，圆形或椭圆形多见 染色质：暗深紫红色，粗颗粒状，排列紧密 核仁： 1-2个 幼稚巨核细胞胞体<10um胞质量很少嗜碱性云雾状有毛状或泡状突起胞核类圆形有核仁倍体 为2知少数为4n 倍体数8一32 胞体 增大30-50μm,形状不规则，常有伪足 胞浆：增多，或深或浅的蓝色，近核处染色变淡，可有嗜天青颗粒。 胞核：多形，不规则。 染色质：开始凝聚，粗糙， 18
18 青颗粒 淋巴细胞直径5-18μm染色质致密块状有的有假核仁胞浆量少兰色，透亮少许嗜天青颗粒大 淋巴细胞胞浆量多存在于正常骨髓中15%-25% 4 单核细胞系统 原始单核细胞：外形：不规则形或圆形，直径14-25μm胞浆：灰兰色，浅兰色 ，似毛玻璃， 不透亮，有伪足，无颗粒。胞核：不规则，有折叠扭曲染色质：纤细网状，浅紫红色， 淡薄。核仁：大，1-3个 幼稚单核细胞染色质纤细有凝聚，或粗网状核仁可有可无胞浆量多，灰兰色许多细小沙砾状 嗜天青颗粒 单核细胞胞体稍小直径12-20μm核居中或偏一侧形状不规则染色质凝聚如筛底或粗线条状 胞浆量多，灰兰色散布细小粉红色颗粒在正常骨髓中<5%5 浆细胞系统 浆细胞源于B细胞，划分为原始，幼稚，成熟浆细胞 原始浆细胞： 胞体： 15-25μm 胞核： 偏位于细胞一端，圆形或椭圆行 染色质： 粗颗粒网状， 紫红色，有核仁 胞浆： 较多，深蓝或灰兰色，近核处有一半圆 形透明区，无颗粒。 （见于浆白、MM） 正常骨髓成熟浆细胞（<2.5%） 椭圆形，直径8-20μm，核圆形明显偏位染色质粗凝块胞浆丰富，灰兰色，无或少许嗜天青 颗粒近核处明显半圆形淡染区 巨核细胞系统 1.巨核细胞自原巨至裸核不做细胞整体分裂，仅仅是DNA的核内复制，染色体由2倍体可增至 128倍体，细胞形态也由圆形变为不规则形，胞体明显由小到大。血小板的生成是巨核细 胞走向解体的过程。 2.产生血小板的能力与其倍体数有关：倍体数越高产生血小板越多。一般从8倍体开始产生 血小板，病理情况下可提前或不产生。 3.临床划分：原始巨核－幼稚巨核－成熟巨核（包括成熟有血小板形成巨核，成熟无血小板 形成巨核）－裸核－血小板。 原始巨核： 从细胞的倍体数看，此阶段2－32倍体，但在光镜下8倍体以上的细胞才能识别。 胞体：较其它系统原始细胞大，胞体直径15-45μm，边缘常不规则，有皱褶状突起 胞浆： 量少，深蓝色，不透明，无颗粒。 胞核： 形状不定，圆形或椭圆形多见 染色质：暗深紫红色，粗糙颗粒状，排列紧密。 核仁： 1-2个 幼稚巨核细胞胞体<10um胞质量很少嗜碱性云雾状有毛状或泡状突起胞核类圆形有核仁倍体 为2n少数为4n 倍体数8－32 胞体： 增大30-50μm，形状不规则，常有伪足。 胞浆： 增多，或深或浅的 蓝色，近核处染色变淡，可有嗜天青颗粒。 胞核 ： 多形，不规则。 染色质：开始凝聚，粗糙