考虑与实验技术有关的参数来表示分离度,假定相邻两 的峰宽相等可导出分离度与前述三个基本色谱参数的关 系 R= 4 K+1 (5-8) a 1) (2) (3) 公式中()项中a是选择性或分离因子,与两组分的峰与峰之间的 分离有关。如=,无论柱的理论塔板数有多大分离度R等天0 因此要获得分离,分配系数必须看差别,所以增加,可使二个谱带 的中心相对宇另一谱带发生位移。 公式中(2)项小K是容量因子,可通过改变溶剂强度来改变。,强溶 剂出峰时间短,导致小的K值,弱溶剂给出较大的K值,分离度高, 但峰变宽; 公式中(③)项中N是理论塔板数,可由改变色谱柱的长度,颗粒的 增减流动相的速度而变动。柱长和保留时间是正比的,柱长加 倍, 分离所需的时间亦加倍
考虑与实验技术有关的参数来表示分离度,假定相邻两 峰的峰宽相等可导出分离度与前述三个基本色谱参数的关 系 (5-8) 公式中(1)项中a是选择性或分离因子,与两组分的峰与峰之间的 分离有 关。如a=l,无论柱的理论塔板数有多大,分离度R等于0。 因此要获得分 离,分配系数必须有差别,所以增加a,可使一个谱带 的中心相对于另一谱带发生位移。 公式中(2)项小K’是容量因子,可通过改变溶剂强度来改变。强溶 剂出峰 时间短,导致小的K’值,弱溶剂给出较大的K’值,分离度高, 但峰变宽; 公式中(3)项中N是理论塔板数,可由改变色谱柱的长度,颗粒的 大小,增减流动相的速度而变动。柱长和保留时间是正比的,柱长加 倍,分离所需的时间亦加倍。 (3) (1) (2) 1 1 ' ( )( ) 4 ' 1 a K R N a K - = +
(a) (b) (e 图5-3色谐分离最佳化条件 (a)一分离不良;(b)加大a,提高选择性;(C) 加大N,提高柱效;(d)增大R',改善分离 图5一3表示不同因子对色谱的影响。图中(a)分离不良,两峰距离太 近;(b)加大a值后,提高了选择性,两峰分开:(c)在a的基础上,加大N提 高柱效,使峰变窄,峰尖位置不变,但两峰可以分离;()增大K值,分离度 好,但保留时间延长,峰拖尾后谱带变宽。因此利用式(5一8)使给定的分离 最佳化时,首先调整K值,使K在2一5之间,谱带不太宽,分离的时间亦合 适,其次是选择N,以提高柱效,如分离仍有问题,则可改变a使其具有更大 的选择性
图5-3表示不同因子对色谱的影响。图中(a)分离不良,两峰距离太 近;(b)加大a值后,提高了选择性,两峰分开;(c)在a的基础上,加大N提 高柱效,使峰变窄,峰尖位置不变,但两峰可以分离;(d)增大K’值,分离度 好,但保留时间延长,峰拖尾后谱带变宽。因此利用式(5—8)使给定的分离 最佳化时,首先调整K’值,使K’在2—5之间,谱带不太宽,分离的时间亦合 适,其次是选择N,以提高柱效,如分离仍有问题,则可改变a使其具有更大 的选择性