四、分类 根据固定相对样品分子的保留机理不同主要分为以下4种类型。 1.液固吸附色谱是用高比表面积的颗粒作固定相,根据物质对吸附剂 活性表面的吸附能力的差异而进行分离。 2.液液分配色谱其固定相是由在组成上与流动相互不相溶的另一种液 体或是借化学键盒到暂粒或载使上,物质的分离是由于不同溶质在两 个液相中分配系数不同而达到的。 3.离子交换色谱固定相是具有固定电荷的离子交换树脂,是根据移动 相中样本的不同离子对固定相固定电荷部位的亲和力大小不同而进行 分离。 4.凝胶色谱或空间排阻色谱固定相为不同孔径的多孔凝胶,是根据多 孔凝胶对不同大小的分子的排阻效应进行分离
四、分 类 根据固定相对样品分子的保留机理不同主要分为以下4种类型。 1.液固吸附色谱 是用高比表面积的颗粒作固定相,根据物质对吸附剂 活性表面的吸附能力的差异而进行分离。 2.液液分配色谱 其固定相是由在组成上与流动相互不相溶的另一种液 体或是借化学键合到颗粒或载体上,物质的分离是由于不同溶质在两 个液相中分配系数不同而达到的。 3.离子交换色谱 固定相是具有固定电荷的离子交换树脂,是根据移动 相中样本的不同离子对固定相固定电荷部位的亲和力大小不同而进行 分离。 4.凝胶色谱或空间排阻色谱 固定相为不同孔径的多孔凝胶,是根据多 孔凝胶对不同大小的分子的排阻效应进行分离
(二)液液分配色谱法 液液分配色谱法是根据样品组分在互不相溶的两种液 相中分配系数的不同(类似萃取),来实现分离分析的。 色谱柱中的固定相是涂渍在惰性载体上的液体,或 者将各种不同的有机基团化学键合到载体上,用与固定相 互不相溶的液体作流动相。 流过柱子的流动相在很大面积上与固定相接触,流动 相中的样品组分在两相间进行平衡分配,由于样品组分在 两相中的相对溶解度不同,以不同速度流出色谱柱而得到 分离
(二)液液分配色谱法 液液分配色谱法是根据样品组分在互不相溶的两种液 相中分配系数的不同(类似萃取),来实现分离分析的。 色谱柱中的固定相是涂渍在惰性载体上的液体,或 者将各种不同的有机基团化学键合到载体上,用与固定相 互不相溶的液体作流动相。 流过柱子的流动相在很大面积上与固定相接触,流动 相中的样品组分在两相间进行平衡分配,由于样品组分在 两相中的相对溶解度不同,以不同速度流出色谱柱而得到 分离
当分配达到平衡状态时,组分在固定相中的浓度和在 流动相中的浓度之比即为分配系数,以K表示: KE 组分在国定相中的浓(c=K (5-16) 组分在流动相中的浓度(cm) K值大,物质在柱中停留时间长,移动速度慢,保留 体积大,保留时间长;反之K值小,移动速度快,保留时 间短
当分配达到平衡状态时,组分在固定相中的浓度和在 流动相中的浓度之比即为分配系数,以K表示: (5-16) K值大,物质在柱中停留时间长,移动速度慢,保留 体积大,保留时间长;反之K值小,移动速度快,保留时 间短。 ( ) ( ) ' s m m s c V K K c V 组分在固定相中的浓度 = = 组分在流动相中的浓度
液液色谱中采用极性固定相和非极性溶剂作流 动相,称为正相液液色谱。 该两相也可以交换,即采用非极性固定相和极 性流动相,称为反相液液色谱。 所以通过选择适宜的固定相和流动相,可以对 非常广泛的样品类型进行分离
液液色谱中采用极性固定相和非极性溶剂作流 动相,称为正相液液色谱。 该两相也可以交换,即采用非极性固定相和极 性流动相,称为反相液液色谱。 所以通过选择适宜的固定相和流动相,可以对 非常广泛的样品类型进行分离
1.柱填充剂 (1)薄壳型填料 由30一40μm的玻璃微球表面涂覆1μm的表面多孔物质如硅胶、氧 化铝等。 (2)全多孔微粒型填料 包括硅胶、多孔硅球等。颗粒细度3一10μ,柱效高,试样容量大, 分析速度筷。 以上两种填料可作为载体,涂以适当的固定液即可作为固定相 正相液液色谱使用B,'一氧二丙腈、聚乙二醇,反相液液色谱常用角 鲨烷、氰乙基硅醇等固定液。 液液分配色谱虽有较好的分离效果和温和的色谱条件,但固定液 是以机械的方法涂覆在载体表面,很容易流失,缩短了柱子的使用寿 命,并污染了分离后的组分,基线噪音大,因此其应用受到很天限制 因而化學键合固是相便益运而主
1.柱填充剂 (1)薄壳型填料 由30一40 μm的玻璃微球表面涂覆1μm的表面多孔物质如硅胶、氧 化铝等。 (2)全多孔微粒型填料 包括硅胶、多孔硅球等。颗粒细度3-10μm,柱效高,试样容量大, 分析速度快。 以上两种填料可作为载体,涂以适当的固定液即可作为固定相。 正相液液色谱使用β,β’-氧二丙腈、聚乙二醇,反相液液色谱常用角 鲨烷、氰乙基硅醇等固定液。 液液分配色谱虽有较好的分离效果和温和的色谱条件,但固定液 是以机械的方法涂覆在载体表面,很容易流失,缩短了柱子的使用寿 命,并污染了分离后的组分,基线噪音大,因此其应用受到很大限制。 因而化学键合固定相便应运而生