二、基本原理 高效液相色谱的基本理论是在经典液相色谱的基础上，引入了气相 色谱的理论，加以改进而发展的。本节不再介绍与气相色谱有关的基本 理论。 使用液相色谱的最终日的是要求在最短时间内，使样本获得最好的 分离和分析，因此分离度是最主要的。 (一)选择性（分离因子） 色谱柱的选择性是衡量二个化合物能否分离的指标，亦称分离因子。 它是两个组分净保留时间的比（即相对保留值）或两个组分的平衡分配之 比
二、基本原理 高效液相色谱的基本理论是在经典液相色谱的基础上，引入了气相 色谱的理论，加以改进而发展的。本节不再介绍与气相色谱有关的基本 理论。 使用液相色谱的最终目的是要求在最短时间内，使样本获得最好的 分离和分析，因此分离度是最主要的。 (一)选择性(分离因子) 色谱柱的选择性是衡量二个化合物能否分离的指标，亦称分离因子。 它是两个组分净保留时间的比(即相对保留值)或两个组分的平衡分配之 比
(1z 3 4 B时(in】 困5-1高效液相色谱国 V—保留体积；t—保留时间；W一为峰宽；h—为峰高 根据图5一1的两个峰，选择性可用下式表示： a(选择性)=一= (5-1) t-to k t为溶剂保留时间，t1和t2为峰1和峰2的保留时间，式中k和k2是农药1和2的 分配系数。 分配系数K= 化合物在固定相中的浓度 化合物在移动相中的浓度 (5-2)
V——保留体积；t——保留时间；W——为峰宽；h——为峰高 根据图5－1的两个峰，选择性可用下式表示： （5－1） t0为溶剂保留时间，t1和t2为峰1和峰2的保留时间，式中k1和k2是农药1和2的 分配系数。 （5－2） 2 0 2 1 0 1 ( ) t t k t t k － 选择性 ＝ ＝ － K 化合物在固定相中的浓度 分配系数 ＝ 化合物在移动相中的浓度
(二) 容量因子 某一特定化合物在色谱柱上的容量因子是衡量该柱对此化合物的 保留特性，化合物的净保留时间与非滞留时间之比，根据图5一1，峰 1的容量因子为： K=二0 (5-3)
（二）容量因子 某一特定化合物在色谱柱上的容量因子是衡量该柱对此化合物的 保留特性，化合物的净保留时间与非滞留时间之比，根据图5—1，峰 1的容量因子为： 1 0 （5－3） 0 ' t t K t － ＝
(三)柱效 柱效是衡量某一特定色谱柱对化合物的谱带展宽度和改善分离的 能力，用理论塔板数来表示，根据图5一1，理论塔板数N)可用下式 表示： W=164)P (5-4) (w)2 根据式(5一4)，理论塔板数随t成正比地增大，洗脱的谱带宽度增 加，理论塔板数下降。因半峰宽易测量准确，计算的N值也比较准确， 可用W0.5来表示。 W=5.544)2 (5-5) (5)月 实际计算时，使用理论塔板的相当高度HETP(或H)较方便，它 也是柱效率的量度。 HETP- L W (5—6) L为柱的长度，H小则N大，即柱效高
(三)柱 效 柱效是衡量某一特定色谱柱对化合物的谱带展宽度和改善分离的 能力，用理论塔板数来表示，根据图5—1，理论塔板数(N)可用下式 表示： （5－4） 根据式(5—4)，理论塔板数随t成正比地增大，洗脱的谱带宽度增 加，理论塔板数下降。因半峰宽易测量准确，计算的N值也比较准确， 可用W0.5来表示。 （5－5） 实际计算时，使用理论塔板的相当高度HETP（或H）较方便，它 也是柱效率的量度。 （5－6） L为柱的长度，H小则N大，即柱效高。 2 1 2 1 ( ) 16 ( ) t N w ＝ 2 1 2 0.5 ( ) 5.54 ( ) t N w ＝ L HETP N ＝
(四)分离度 相邻两个峰的分离程度称为分离度R。两个峰尖之间距 离越大，分离度越大；两峰越宽则分离度越低。分离度R 按下式计算： R- 12二4 斯+g,) (5-7) 按式(5一7)很容易比较两化合物分离的好坏，但此式不 能指导如何改进实验设计，以达到更有效的分离
(四)分 离 度 相邻两个峰的分离程度称为分离度R。两个峰尖之间距 离越大，分离度越大；两峰越宽则分离度越低。分离度R 按下式计算： （5－7） 按式(5—7)很容易比较两化合物分离的好坏，但此式不 能指导如何改进实验设计，以达到更有效的分离。 2 1 1 2 1 ( )( ) 2 t t R w w － ＝ ＋