29.a-螺旋的稳定性不仅取决于肽链内部的氢键,而且还与氨基酸侧链的性质有关 室温下,在溶液中下列多聚氨基酸哪些能形成α螺旋冖哪些能形成其它有规则的结构哪 些能形成无规则的结构?并说明其理由。<br>(1)多聚亮氨酸pH=7,<br>(2)多聚异亮氨酸pH 7.0<br>(3)多聚精氨酸pH=7.0<br>(4)多聚精氨酸p=13.0<br>(5)多聚谷氨酸pH 15<br>(6)多聚苏氨酸pH=7.0<br>(7)多聚羟脯氨酸pH=70 30假定蛋白质是在pH70低离子强度的溶液中,下述蛋白质的哪些氨基酸残基能形成 (1)∝-螺旋(2)B-折叠(3)无规则卷曲(4)二硫键 Ile-Cys-Pro-Val-Gln-His-Tyr-Thr-Ala-Phe Cys-Trp-Leu-Met-Pro-Gly-Gly-Hypro-Phe-Gly 15 Ala-Gly-Ala-Gly-Ser-Gly-Ala-Gly-Ile-Glu- 25 Asn-Glu-Gln-Asn-Met-Ala-His-Phe-Trp-Tyr 35 Lys-Gly-Lys-Lys-Arg-Arg-Cys-Glu-Ile-Gly- 45 Ser-Gly-Ser-GlyAla-Gly-Ser-GlyArg-Arg Lys-Gly-Arg-Gly-Arg-Pro-Hypro 31
31 29. −螺旋的稳定性不仅取决于肽链内部的氢键,而且还与氨基酸侧链的性质有关。 室温下,在溶液中下列多聚氨基酸哪些能形成α-螺 旋?哪些能形成其它有规则的结构?哪 些能形成无规则的结构?并说明其理由。<br>(1)多聚亮氨酸 pH=7,<br>(2)多聚异亮氨酸 pH =7.0<br>(3)多聚精氨酸 pH=7.0<br>(4)多聚精氨酸 pH=13.0<br>(5)多聚谷氨酸 pH= 1.5<br>(6)多聚苏氨酸 pH=7.0<br>(7)多聚羟脯氨酸 pH=7.0 30.假定蛋白质是在 pH7.0 低离子强度的溶液中,下述蛋白质的哪些氨基酸残基能形成 (1) −螺旋(2) − 折叠(3)无规则卷曲(4)二硫键
31不同pH时测定二种多聚氨基酸的旋光度,结果如图3-3所示。(1)解释旋光度急剧变 化的原因。(2)旋光度和二级结构有什么关系? a螺旋 多聚L一谷氨酸 a螺旋 无规线团 多聚L一赖氨酸→ 120 无规线团 02468111 PH 图3-3两种多聚氨基酸的旋光度和pH值之间的关系 32假设某蛋白质含有羧基和氨基各10个,FK1的平均值为25FK2的平均值为8 假设10个羧基和10个氨基都能生成盐键,用图表示pH和盐键的关系
32 31.不同 pH 时测定二种多聚氨基酸的旋光度,结果如图 3-3 所示。(1)解释旋光度急剧变 化的原因。(2)旋光度和二级结构有什么关系? <br> 32.假设某蛋白质含有羧基和氨基各 10 个, 的平均值为 2.5。 的平均值为 8.5。 假设 10 个羧基和 10 个氨基都能生成盐键,用图表示 pH 和盐键的关系
33假设某蛋白质含有10个羧基,平均pK为3.5。2个咪唑基,平均p为60和14个 NH2+,平均p为100。从pH开始用NaOH滴定,试问达到等电点时应有多少个H被 滴定掉?画出蛋白质的滴定曲线,并标明等电点的位置。 34图3-4是由末端没有封闭的一条多肽链组成的蛋白质滴定曲线<br>(1)列出该蛋白质 中所有可能的滴定基团和相应的pKa值。<br>(2)估计该蛋白质分子中每一种可滴定的基团 有多少?(假设每分子蛋白质中有36个可滴定的基团,而所有的半胱氨酸残基均包含在二硫 键中)。<br>(3)估计这个蛋白质的相对分子质量,并简述理由 图3-4某蛋白质的滴定曲线 35.有A、B、C三种不同蛋白质,在pH7进行电泳,结果如图3-5所示 br> +<br>若在pH7用中性盐先沉淀这三种蛋白 BA原点 图 质,哪种蛋白质首先沉淀?哪种次之?哪种最后?
33 33.假设某蛋白质含有 10 个羧基,平均 pK 为 3.5。2 个咪唑基,平均 pK 为 6.0 和 14 个 一 ,平均 pK 为 10.0。从 pH1 开始用 NaOH 滴定,试问达到等电点时应有多少个 被 滴定掉?画出蛋白质的滴定曲线,并标明等电点的位置。 34.图 3-4 是由末端没有封闭的一条多肽链组成的蛋白质滴定曲线<br>(1)列出该蛋白质 中所有可能的滴定基团和相应的 pKa 值。<br>(2)估计该蛋白质分子中每一种可滴定的基团 有多少?(假设每分子蛋白质中有 36 个可滴定的基团,而所有的半胱氨酸残基均包含在二硫 键中)。<br>(3)估计这个蛋白质的相对分子质量,并简述理由。 <br> 35.有 A、B、C 三种不同蛋白质,在 pH7 进行电泳,结果如图 3-5 所示。 <br> <br>若在 pH7 用中性盐先沉淀这三种蛋白 质,哪种蛋白质首先沉淀?哪种次之?哪种最后?
6.一些异常血红蛋白(HbD、HbJ、HbN、HbC)利正常血红蛋白(HbA)仅仅是一个氨基酸 的差异。 hbD(a 68) Asn-变成 <br> →Lys HbJ(β69) Gly- 变成 sp Hb(β95): Lys-&RE>Glu HbC(β6): G1u-变Lys 将上述四种异常血红蛋白与正常血红蛋白在pH86条件下进行电泳,电泳迁移率如 下阴极 阳极同a带、b ↑↑↑ a b HbA 带、c带和d带分别代表哪种异常血红蛋白? 37正常人血红蛋白(HbA)的β-链经胰蛋白酶水解可得一肽段 为Val- His-Leu-Thr- Pro-Glu-Glu-ys镰刀状贫血病血红蛋白(Hbs)的β-链经胰蛋白酶水解可 得一肽段为:Val- His-Leu-Thr-Pro- /al-Glu-Lys试讨论:<br>(1)在pH50和80时,这两个 八肽的电泳行为。<br>(2)若正常的八肽被一个六肽取代,N端的5个氨基酸不变,在pH80 时,此六肽在电场中不移动,问C端是什么氨基酸才会有这种电泳行为。各解离基团的 pK值如下:末端NH2+7.0,末端C00H34,咪唑基6.0,y-COOH40,E-NH2+10.8
34 36.一些异常血红蛋白(HbD、HbJ、HbN、HbC)利正常血红蛋白(HbA)仅仅是一个氨基酸 的差异。 <br> 将上述四种异常血红蛋白与正常血红蛋白在 pH8.6 条件下进行电泳,电泳迁移率如 下: <br>问:a 带、b 带、c 带和 d 带分别代表哪种异常血红蛋白? 37.正常人血红蛋白(HbA)的β-链经胰蛋白酶水解可得一肽段 为:Va1-His-Leu-Thr-Pro-Glu-Glu-Lys 镰刀状贫血病血红蛋白(HbS)的β-链经胰蛋白酶水解可 得一肽段为: Va1-His-Leu-Thr-Pro-Val-Glu-Lys 试讨论:<br>(1)在 pH5.0 和 8.0 时,这两个 八肽的电泳行为。<br>(2)若正常的八肽被一个六肽取代,N 端的 5 个氨基酸不变,在 pH8.0 时,此六肽在电场中不移动,问 C 端是什么氨基酸才会有这种电泳行 为。各解离基团的 pK 值如下:末端 7.0,末端 C00H3.4,咪唑基 6.0,γ-COOH4.0,ε- 10.8
38在体外,用下列方法处理,对血红蛋白与氧的亲和力有什么影响?<br>(1)pH从7.0 增加到74br>(2)CO2分压从10托增加到40托<br>(302分压从60托下降到20托<br>(42,3 二磷酸甘油酸的浓度从8×10mo1L下降到2×10mo1/L<br(5a2B2解聚成单个亚 基 39在下面指出的pH值,下述蛋白质在电场中将向哪个方向移动?即向阳极(A)、阴极C 或不动(O-br>(1)卵清蛋白,在pH50<br>(2)B乳球蛋白,在pH50和7.0br>(3胰凝乳蛋 白酶原,在pH5.0,95和11 40.下列蛋白质的混合物在什么pH时电泳,分离最为有效?br>(1)血清清蛋白和血红蛋 白<br>(2)肌红蛋白和胰凝乳蛋白酶原<b>(3)卵清蛋白、血清清蛋白和脲酶 41指出下列蛋白质在分离范围为5000~400000的凝胶过滤柱上洗脱下来的先后顺序。 肌红蛋白、过氧化氢酶、细胞色素C、肌球蛋白、胰凝乳蛋白酶原和血清清蛋白
35 38.在体外,用下列方法处理,对血红蛋白与氧的亲和力有什么影响?<br>(1)pH 从 7.0 增加到7.4<br>(2) 分压从10托增加到40托<br>(3) 分压从60托下降到20托<br>(4)2,3- 二磷酸甘油酸的浓度从 8× 下降到 2× <br>(5) 解聚成单个亚 基 39.在下面指出的 pH 值,下述蛋白质在电场中将向哪个方向移动?即向阳极(A)、阴极 或不动(O)<br>(1)卵清蛋白,在 pH5.0<br>(2)β-乳球蛋白,在 pH5.0 和 7.0<br>(3)胰凝乳蛋 白酶原,在 pH5.0,9.5 和 11。 40.下列蛋白质的混合物在什么 pH 时电泳,分离最为有效?<br>(1)血清清蛋白和血红蛋 白<br>(2)肌红蛋白和胰凝乳蛋白酶原<br>(3)卵清蛋白、血清清蛋白和脲酶 41.指出下列蛋白质在分离范围为 5000~400 000 的凝胶过滤柱上洗脱下来的先后顺序。 肌红蛋白、过氧化氢酶、细胞色素 C、肌球蛋白、胰凝乳蛋白酶原和血清清蛋白