1 色谱分离法 参考 生物大分子的液相色谱制备 第二版，师治 贤编著，科学出版社 生物工程下游技术——细胞培养、分离纯 化，分析检测，刘国诠编，化学工业出版 社，1993
1 色谱分离法 参考 生物大分子的液相色谱制备 第二版，师治 贤编著，科学出版社 生物工程下游技术——细胞培养、分离纯 化，分析检测，刘国诠编，化学工业出版 社，1993
2 色谱种类 相互作用力类型 特点 体积排阻色谱（size exclusion chromatography）SEC 凝胶过滤色谱 (gel filtration chromatography)GFC 不应有作用力 根据分子大小 离子交换色谱(Ion exchange chromatography)IEC 电荷力 电荷 聚焦色谱 等电点 正相色谱 氢键、定向力（或选择 性作用力） 反相色谱 非选择性作用力 疏 水 色 谱 HIC(hydrophobic interaction chromatography) 疏水相互作用力和非选 择性作用力 疏水性 亲 和 色 谱 Affinity chromatography 选择性的生物作用力 亲和性 各类色谱中溶质与固定相间的相互作用力
2 色谱种类 相互作用力类型 特点 体积排阻色谱（size exclusion chromatography）SEC 凝胶过滤色谱 (gel filtration chromatography)GFC 不应有作用力 根据分子大小 离子交换色谱(Ion exchange chromatography)IEC 电荷力 电荷 聚焦色谱 等电点 正相色谱 氢键、定向力（或选择 性作用力） 反相色谱 非选择性作用力 疏 水 色 谱 HIC(hydrophobic interaction chromatography) 疏水相互作用力和非选 择性作用力 疏水性 亲 和 色 谱 Affinity chromatography 选择性的生物作用力 亲和性 各类色谱中溶质与固定相间的相互作用力
3 ■ 色析法的发展过程： 圆形滤纸 长条滤纸 薄层层析 (TLC) 管柱层析 容量变大 容量更大 加展开液 Adapted from Scope RK (1987) Protein Purification – Principles and Practice p.9 Paper partition chromatography (PPC) Martin, Synge (1952)
3 ■ 色析法的发展过程： 圆形滤纸 长条滤纸 薄层层析 (TLC) 管柱层析 容量变大 容量更大 加展开液 Adapted from Scope RK (1987) Protein Purification – Principles and Practice p.9 Paper partition chromatography (PPC) Martin, Synge (1952)
4 ■ 色层分析法的基本机制： ● 极性相似的两分子间，其亲和力较强。 极性 → 极性 非极性 → 非极性 Like Dissolves Like
4 ■ 色层分析法的基本机制： ● 极性相似的两分子间，其亲和力较强。 极性 → 极性 非极性 → 非极性 Like Dissolves Like
5 L L ■ 色层分析法的基本原理： 流动相 Mobile phase 固定相 Stationary phase 样本分子依其分子极性 选择亲和两相之一 ADSORPTION PARTITION Liquid - Solid Liquid - Liquid 两相系統 A B C 每次分离样本 都要做一次选择 One Plate of Separation (理论板数) S 极 性 L 非 极 性 极 性 非 极 性 样本 样本
5 L L ■ 色层分析法的基本原理： 流动相 Mobile phase 固定相 Stationary phase 样本分子依其分子极性 选择亲和两相之一 ADSORPTION PARTITION Liquid - Solid Liquid - Liquid 两相系統 A B C 每次分离样本 都要做一次选择 One Plate of Separation (理论板数) S 极 性 L 非 极 性 极 性 非 极 性 样本 样本