定点突变法 从基因的水平上对特定位点的核苷酸进行 突变,使得蛋白产物特定的氨基酸残基转变成 另一种氨基酸残基,观察突变对酶活力的影响。 例如,1987年 Claik将胰蛋白酶Asp102突变成 Asn102,突变的胰蛋白酶的kcat只有野生型酶的 五千分之一,突变酶水解酯底物的活力仅是野 生型酶的万分之一,可见Asp102对胰蛋白酶的 活力是必需的
定点突变法 从基因的水平上对特定位点的核苷酸进行 突变，使得蛋白产物特定的氨基酸残基转变成 另一种氨基酸残基，观察突变对酶活力的影响。 例如，1987年Claik将胰蛋白酶Asp102突变成 Asn102，突变的胰蛋白酶的kcat只有野生型酶的 五千分之一，突变酶水解酯底物的活力仅是野 生型酶的万分之一，可见Asp102对胰蛋白酶的 活力是必需的
影响酶每催化效率 的有关因素
三、影响酶催化效率 的有关因素
底物和酶的郊近效应 与定向效应 (proximity and orientation) 对于双底物反应或三底物反应来说,由 于酶活性部位对底物有高亲和力,增加了参 与反应的底物碰撞的几率,这就是邻近效应。 在酶活性部位,底物之间参与反应的基团或 键靠近,使反应易于进行,这就是定向效应
底物和酶的邻近效应 与定向效应 （proximity and orientation） 对于双底物反应或三底物反应来说，由 于酶活性部位对底物有高亲和力，增加了参 与反应的底物碰撞的几率，这就是邻近效应。 在酶活性部位，底物之间参与反应的基团或 键靠近，使反应易于进行，这就是定向效应
底物的形变和诱导契合 ( distortion and induced-fit) 底物与酶结合后,发生构象变化,相应的 键变得对反应更敏感,降低了反应的活化能
底物的形变和诱导契合 底物与酶结合后，发生构象变化，相应的 键变得对反应更敏感，降低了反应的活化能。 （distortion and induced-fit）
酸碱催化 (acid-base catalysis) 酶活性部位的催化基团可以通过向底物提 供质子或从底物上夺取质子,而催化反应。若 提供质子和夺取质子的是反应液中的H+和OH 称为专一酸碱催化或狭义酸碱催化;若提供质 子和夺取质子的是酶活性部位的残基,称为总 酸碱催化或广义酸碱催化
酸碱催化 酶活性部位的催化基团可以通过向底物提 供质子或从底物上夺取质子，而催化反应。若 提供质子和夺取质子的是反应液中的H +和OH －， 称为专一酸碱催化或狭义酸碱催化；若提供质 子和夺取质子的是酶活性部位的残基，称为总 酸碱催化或广义酸碱催化。 （acid-base catalysis）