氨基酸等电点的确定 pKa=2.34 CH3CHCOH +NH3 alanine pKa=9.69 2.34+9.69 12.03 6.02 2 2 pl (pK1 pK2)/2 本课件由西华大学生物工程学院车振明制作
氨基酸等电点的确定 （1）中性氨基酸 等电点（pI）的高低与氨基酸分子两性解 离基团的解离平衡常数有一定关系。用K’1、 K’2分别表示α-COOH和α-NH3 +表观解离 平衡常数时，它们的负对数分别用pK’1、 pK’2表示，则中性氨基酸的等电点在数值 上等于两个pK’值之和的二分之一。即： pI = (pK1 + pK2 ) / 2 本课件由西华大学生物工程学院车振明制作
2.酸、碱性氨基酸 COOH C00 C00 H HaN. 酸性氨基酸： pl (pK+pK'R-coo-)/2 险性氨基酸： pl (pK'2 pK'r-NH )/2 Lys l=,+p.895+105羽 2 2
2.酸、碱性氨基酸 在溶液中氨基酸随pH升高而逐级解 离时，总是pK＇值小的基团先解离， pK＇值大者后解离。因此，对于具有 三个解离基团的氨基酸，只有靠近等 电离子的两个pK＇值影响等电离子的 浓度。所以，只要正确写出解离反应 式，皆可根据等电离子两边的pK＇计 算其pI值。 酸性氨基酸： pI = (pK’ 1 + pK’R-COO- )/2 硷性氨基酸： pI = (pK’ 2 + pK’R-NH2 )/2
(三)氨基酸的重要化学反应 1.与亚硝酸反应 COOH COOH H2N-C-H+HNO2-*HO-C-H+N21+H20 R R ā氨基酸亚硝酸 羟酸氨气水
（三）氨基酸的重要化学反应 1.与亚硝酸反应 反应特点： ❖（1）脯氨酸不发生该反应； ❖（2）只有α –氨基氮可发生此 反应，R上的氮几乎不参与反应。 ❖（3）通过测定N2 的体积（摩尔 数），可测定游离氨基氮
2.与甲醛反应 HCHO R-CH-C00+HCHOR-CH-C00 →R-CH-C00 CH2OH NHCH2OH N CH2OH &氨基酸 甲醛 羟甲基衍生物 二羟甲基衍生物
2.与甲醛反应 反应特点： 反应放出H+ ，可用标准NaOH溶液 滴定，是常用的测定氨基酸的反应
3.脱黢反应 L谷氨酸脱羧酶 HOOC-CH-CH-CHCOOH HOOC-CH2CH2CH2+C L谷氨酸 y氯基丁酸
3.脱羧反应 反应特点： 在专一性酶的催化下进行，放出 CO2 ,工业上通过呼吸仪测定CO2的 量来测定AA