变性后的蛋白质称变性蛋白,能使Pr变性 的物质叫Pr变性剂。 高温、高压 物理因素 紫外线、X射线、 变性因素 电离辐射和超声波等 强酸、强碱 化学因素 有机溶剂、重金属盐 高浓度尿素、盐酸胍等 变性实质: 破坏了空间结构,一级结构不受影响(分于组成、 MW不变)
变性后的蛋白质称变性蛋白,能使Pr变性 的物质叫Pr变性剂。 变性因素 物理因素 高温、高压 紫外线、X射线、 电离辐射和超声波等 化学因素 强酸、强碱 有机溶剂、重金属盐 高浓度尿素、盐酸胍等 变性实质: 破坏了空间结构,一级结构不受影响(分子组成、 MW不变)
①生物学活性丧失 溶解度↓,沉降率↑, 变性蛋白质的特点 上②理化性质改变 粘度, 扩散速度, 旋光性、光吸收改变等; ③易被蛋白酶水解 酶水解。 变性与复性 可逆变性:P变性后如将变性剂除去, 该Pr分子的天然构象和生物学 变性 活性还能恢复。 不可逆变性:若变性条件强烈,作用时间长,构像变化大,理化性 质难以恢复。 举例:医疗;生物制品保存;生活等
变性蛋白质的特点 旋光性、光吸收改变等; ①生物学活性丧失 ②理化性质改变 ③易被蛋白酶水解 溶解度↓,沉降率↑, 粘度↑, 扩散速度↓, 酶水解。 变性与复性 变性 可逆变性:Pr变性后如将变性剂除去,该Pr分子的天然构象和生物学 活性还能恢复。 不可逆变性:若变性条件强烈,作用时间长,构像变化大,理化性 质难以恢复。 举例:医疗;生物制品保存;生活等
8mol/L尿素(变性) 阝一疏基乙尊 透析除尿素和 用-巯基乙醇(复性) (A) 面氧化 (B) 尿家, 人驱蓝 环暴乙 8moLR素 (C) RNase的变性与复性
RNase的变性与复性
2.沉淀与凝固 定义:蛋白质分子相互聚寨而从溶液中析出 的现象称为沉淀。 变性后的蛋白质由于疏水基团的暴路而易于沉淀, 但沉淀的蛋白质不一定都是变性后的蛋白质。加热使蛋 白质变性并疑聚成块状称为凝固。因此,凡疑固的蛋白 质一定发生变性。 总结:PY变性、沉淀与疑固之间的关系 变性Pr不一定沉淀 沉淀Pr不一定变性 变性Pr不一定疑固 疑固的PY一定变性
变性后的蛋白质由于疏水基团的暴露而易于沉淀, 但沉淀的蛋白质不一定都是变性后的蛋白质。加热使蛋 白质变性并凝聚成块状称为凝固。因此,凡凝固的蛋白 质一定发生变性。 总结:Pr变性、沉淀与凝固之间的关系 变性Pr不一定沉淀 沉淀Pr不一定变性 变性Pr不一定凝固 凝固的Pr一定变性 2. 沉淀与凝固 定义: 蛋白质分子相互聚集而从溶液中析出 的现象称为沉淀
酸 碱 碱 酸 带正电荷的蛋白质 在等电点的蛋白质 带负电荷的蛋白质 (亲水胶体) (亲水胶体) (亲水胶体) 脱水 脱水 脱水 碱 酸 不稳定的蛋白质颗粒 带负电荷的蛋白质 带正电荷的蛋白质 (沉淀) (疏水胶体) (疏水胶体) 蛋白质胶体颗粒的沉淀
+ + + + + + + + - - - - - - - - + + + + + + + + - - - - - - - - 蛋白质胶体颗粒的沉淀 带正电荷的蛋白质 在等电点的蛋白质 带负电荷的蛋白质 酸 碱 酸 碱 脱水 脱水 脱水 不稳定的蛋白质颗粒 (沉淀) 带正电荷的蛋白质 (疏水胶体) 带负电荷的蛋白质 (疏水胶体) 碱 酸 (亲水胶体) (亲水胶体) (亲水胶体)