蛋白质的结构与功能 Structure and Function of Protein (四)
蛋白质的结构与功能 Structure and Function of Protein (四)
第四节蛋白质的理化性质 及其分离纯化 蛋白质的理化性质 二 蛋白质分离和纯化 三、 多肽链中氨基酸顺序分析 蛋白质一级结构的测定 两性解离和等电点
第四节 蛋白质的理化性质 一 、蛋白质的理化性质 二、 蛋白质分离和纯化 三、 多肽链中氨基酸顺序分析 ——蛋白质一级结构的测定 (一)两性解离和等电点 及其分离纯化
P了是两性电解质。在溶液中的带电状况 主要取决于溶液的pH值。 COOH Pr NH: NH pH<pI H=pl pH>pI pI定义: 在某一H值溶液中,Pr酸性基团和碱性基团的解离程 度相当Pr分子所带正负电荷相等,净电荷为零此时溶液的 pH值称为Pr的pI
Pr是两性电解质。在溶液中的带电状况 主要取决于溶液的pH值。 Pr COOH NH3 + Pr COONH3 + Pr COONH2 OHH+ OHH+ pH<pI pH=pI pH>pI pI定义: 在某一pH值溶液中,Pr酸性基团和碱性基团的解离程 度相当Pr分子所带正负电荷相等,净电荷为零此时溶液的 pH值称为Pr的pI
蛋白质的胶体性质 Pr分子颗粒大小1-100nm之间,属胶体颓粒范围, 在溶液中能形成稳定的胶体。 表面形成水化层 原因: 表面同种电荷的斥力 除去这两个因素,P就会发生沉淀。由于胶体 溶液中的PY不能通过半透膜,因此可以应用透析 法将非蛋白的小分子杂质除去
Pr分子颗粒大小1-100nm之间,属胶体颗粒范围, 在溶液中能形成稳定的胶体。 原因: (二)蛋白质的胶体性质 表面形成水化层 表面同种电荷的斥力 除去这两个因素,Pr就会发生沉淀。由于胶体 溶液中的Pr不能通过半透膜,因此可以应用透析 法将非蛋白的小分子杂质除去
(三)蛋白质的变性、沉淀和旅固 l.蛋白质的变性(denaturation) 定义:在某些理化因素的作用下,P工严格的空间结构被破坏 (不包括肽键的断裂),从而引起若干理化性质和生 物学性质改变的现象。 吴完教授1931年:“天然Pr分子借助次级键 连接而成一种紧密,有规则的空间结构, 变性作用使次级键破坏从而使结构松散
(三)蛋白质的变性、沉淀和凝固 吴宪教授1931年: “天然Pr分子借助次级键 连接而成一种紧密,有规则的空间结构, 变性作用使次级键破坏从而使结构松散” 。 1. 蛋白质的变性(denaturation) 定义:在某些理化因素的作用下,Pr严格的空间结构被破坏 (不包括肽键的断裂),从而引起若干理化性质和生 物学性质改变的现象